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（浙江专用）2015届高考生物 考前三个月 知识专题突破练13 生物技术实践直击考纲1.微生物的利用：(1)大肠杆菌的培养和分离；(2)分离以尿素为氮源的微生物。2.酶的应用：(1)果汁中的果胶和果胶酶；(2)淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测。3.生物技术在食品加工中的应用：(1)果酒及果醋的制作；(2)泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定。4.浅尝现代生物技术：植物的组织培养。考点38微生物的利用1判断下列有关微生物的培养与应用的叙述(1)在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是检测培养基上的细菌含量(2014新课标，39(1)改编)()(2)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养(2013江苏，18c)()(3)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有划线分离法和涂布分离法(2011新课标，39(2)改编)()(4)在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌(2011重庆，2a)()(5)培养微生物的培养基分装到培养皿后进行灭菌(2013江苏，18a改编)()2(2014浙江自选，节选)(1)现有一份污水样品，某兴趣小组欲检测其中的细菌数，进行以下实验。将一定量的污水样品进行浓度梯度稀释。取适量不同稀释度的稀释液，用_法分别接种于固体平面培养基上，经培养后进行计数。该实验应注意，接种前，从盛有_的容器中将玻璃刮刀取出，放在酒精灯火焰上灼烧，冷却后待用；分组时，需用_作为对照。(2)在上述细菌培养实验中进行计数时，应计数的是接种了_。a各个稀释度样品的培养基上的细菌数b合理稀释度样品的培养基上的细菌数c各个稀释度样品的培养基上的菌落数d合理稀释度样品的培养基上的菌落数答案(1)涂布分离70%酒精未接种的培养基(2)d解析(1)细菌的分离与计数常用涂布分离法，即用玻璃刮刀将一定体积的稀释液涂布到固体平面培养基上。玻璃刮刀在使用前需进行灭菌处理，即将其浸入体积分数为70%的酒精中，随后取出放在酒精灯火焰上灼烧，冷却后待用。为排除其他因素的影响，提高实验的可信度，实验中要设置空白对照。(2)将菌液涂布到固体平面培养基上后，倒置放在恒温箱中培养，培养一段时间后，统计菌落数。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，这样通过统计菌落数就可估算出待测样品的细菌数目，所以要选择合理稀释度的样品。1微生物接种最常用的两种方法(1)划线分离法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。(2)涂布分离法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。2分离以尿素为氮源的微生物(1)实验原理筛选以尿素为氮源的微生物，可使用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行培养选择。细菌合成的脲酶能将尿素分解成nh3，致使ph升高，使酚红指示剂变红。(2)实验步骤制备培养基：将已灭菌的lb固体培养基和尿素固体培养基，在酒精灯旁分别倒入两个培养皿中，摇匀，平放至凝固制备细菌悬液：用1 g土样配制不同浓度的细菌悬液用涂布分离法分离细菌：将不同浓度的土壤稀释液分别加入到有lb培养基和尿素培养基的培养皿中，并用玻璃刮刀涂布到整个平面上培养：倒置培养皿，在37 恒温箱中培养2448 h观察：培养基中菌落数量1下列有关实验室中微生物培养和分离的叙述，错误的是()a获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵b高温灭菌的目的是杀死所有微生物c划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落d涂布分离法可用于计数活菌数目答案c解析微生物培养过程中要进行无菌操作，防止外来杂菌的入侵，a正确；高温灭菌可杀死所有微生物，b正确；划线分离可在培养基上获得逐渐变稀分布的单菌落，c错误；涂布分离法中根据菌落的数目可计数活菌数目，d正确。2下列关于微生物的营养，说法正确的是()a同一种物质不可能既作碳源又作氮源b凡是碳源都能提供能量c除水以外的无机物仅提供无机盐d无机氮源也可能提供能量答案d解析此题考查我们对微生物的营养和能源的理解。对一些微生物来说，含c、h、o、n的化合物既是碳源，又是氮源。co2是光能自养细菌的碳源，但不能提供能量。co2和n2是无机物，也是微生物的碳源和氮源。硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨，同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源。3(2014四川，10)有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、_四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_。(2)与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和_，这些植物激素一般需要事先单独配制成_保存备用。(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是_。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_。(4)为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_，该实验设计是否合理？为什么？_。答案(1)氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖(2)细胞分裂素母液(3)接种环接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质不合理，缺少空白对照解析(1)微生物生长繁殖需要的主要营养物质包括碳源、氮源、水和无机盐四类。根据题意可知，土壤中某些微生物有降解苯磺隆的能力，该实验的目的是探索其降解机制，因此，需要分离出有降解苯磺隆能力的土壤中的某些微生物，故选择培养时为了排除其他碳源的干扰，培养基中唯一碳源只能是苯磺隆。(2)与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基需要添加生长素和细胞分裂素，用于调节植物细胞脱分化和再分化；这些植物激素一般需要事先单独配制成母液保存备用。(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是无菌接种环。划线的平板培养后，发现第一划线区域的划线上不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，而其他划线上有菌落。造成此现象的原因可能有两个：一是接种环灼烧后未冷却，菌种接触到高温的接种环而死亡；二是划第二划线区域第一条线时未从第一区域末端开始。(4)根据图乙所示实验中的上清液加入蛋白酶溶液推测，实验目的是探究目的菌株是否能分泌降解苯磺隆的蛋白质，实验设计不合理之处是缺少不加蛋白酶溶液、其他条件同图乙的空白对照。4(2014新课标，39改编)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用涂布分离法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_；然后，将1 ml水样稀释100倍，在3个平板上用涂布分离法分别接入0.1 ml稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为_。(2)该小组采用划线分离法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过_灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_。(3)示意图a和b中，_表示的是用涂布分离法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中_的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高_的利用率。答案(1)检测培养基平板灭菌是否合格3.8107(2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3)b(4)溶解氧营养物质解析(1)为了检测培养基平板灭菌是否合格，可在涂布接种前，随机取灭菌后的空白平板先行培养一段时间。0.1 ml稀释液中平均有(393837)/338个活菌，则每毫升稀释液中活菌的数目为38/0.1380，则稀释前每毫升水样中活菌数目为3801003.8104，则每升水样中活菌数目为3.81041 0003.8107。(2)接种环、接种针等金属用具可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，以达到迅速彻底灭菌的目的。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，其目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(3)比较图a和图b可以看出：a培养基中细菌的分布呈线性，是用划线分离法接种培养后得到的结果；b培养基中细菌均匀分布，是用涂布分离法接种培养后得到的结果。(4)振荡培养可以提高培养液中溶解氧的含量，还可以使菌体与培养液充分接触，提高了营养物质的利用率，因此振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。5现从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，实验过程如下图所示：请回答：(1)欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，将土壤用_进行一系列的梯度稀释，同一浓度的土壤稀释液应至少涂布_个平板，通常以每个培养皿中有_个以内的单菌落的那一组稀释倍数为最合适。(2)接种后的培养皿_于37 的恒温箱中培养。若培养基中存在含脲酶的细菌，其菌落周围会出现_，这是由于尿素被分解产生氨气，遇培养基中的_产生的颜色变化，从而证明这一菌株能以尿素为氮源。(3)分离能利用尿素的细菌时所用的培养基成分上最主要的特点是_。(4)下列操作需要在酒精灯火焰旁进行的是(多选)()a称取葡萄糖、琼脂糖等培养基成分b倒平板c涂布平板d微生物的培养(5)与lb全营养培养基上的菌落数相比，尿素培养基上只有少数菌落的原因是_。答案(1)无菌水320(2)倒置红色环带酚红指示剂(3)以尿素作为唯一氮源的(固体)培养基(4)bc(5)土壤中能利用尿素的细菌在土壤菌群中只占极少数量考点39酶的应用1判断下列有关酶的研究及应用的叙述(1)玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用固定化技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本(2014山东，35(3)()(2)反应产物对固定化酶的活性没有影响(2013江苏，6b)()(3)相同ph时加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉(2012江苏，16c)()(4)在酶的制备和应用中，透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化(2011江苏，15b)()2(2014浙江自选，节选)(1)某兴趣小组欲利用固定化酶进行酶解淀粉的实验，分组见下表。组别固定化酶柱长度(cm)淀粉溶液的流速(mlmin1)甲100.3乙100.5丙150.3丁150.5将吸附了淀粉酶的石英砂装入柱中后，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去_。按上表分组，将配制好的淀粉溶液加入到固定化酶柱中，然后取一定量的流出液进行kii2检测。若流出液呈红色，表明有_生成；若各组呈现的颜色有显著差异，则流出液中淀粉水解产物浓度最高的是_组。(2)下列关于上述固定化酶实验的叙述，错误的是_。a固定化酶柱长度和淀粉溶液流速决定了酶柱中酶的含量b淀粉溶液流速过快会导致流出液中含有淀粉c各组实验所用的淀粉溶液浓度应相同d淀粉溶液的ph对实验结果有影响答案(1)未吸附的淀粉酶糊精丙(2)a解析(1)利用固定化酶进行酶解淀粉的实验时，先要将酶固定化。此题中利用石英砂吸附淀粉酶，装入固定化酶柱时有些酶没有完全吸附在石英砂上，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去未吸附的游离的淀粉酶。淀粉酶可使淀粉水解成糊精，如果用淀粉指示剂(kii2)检测糊精，则呈现红色。酶的量不同，水解的效果也不同，丙组固定化酶柱的长度较长，其固定化酶的总量较多，且柱中淀粉溶液的流速也较慢，反应充分，故产物浓度高，颜色最深。(2)a项，固定化酶柱的长度决定了酶的含量，反应是否充分与淀粉溶液的流速有关，从而决定了产物的浓度。b项，如果淀粉溶液的流速过快，则淀粉与酶接触不充分，从而使淀粉不能被充分水解。c项，各组淀粉溶液的浓度是实验的无关变量，故各组实验所用的淀粉溶液浓度应该相同。d项，温度、ph会影响酶的活性，从而对实验结果造成影响。1果胶酶(1)来源：黑曲霉、苹果青霉。(2)组成：果胶酶并不是特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，主要包括果胶酶和果胶甲酯酶。(3)作用：将果胶分解成可溶性的分子，使出汁率提高，也使浑浊的果汁变得澄清。2淀粉水解的测定实验固定淀粉酶滴管滴加淀粉溶液加kii2溶液观察洗涤几天后重复实验。3淀粉酶固定化实验过程固定化淀粉酶，装入注射器中以0.3 ml/min的流速滴加淀粉溶液过柱流出5 ml淀粉溶液后接收0.5 ml滴加kii2溶液，观察颜色，稀释1倍后再观察颜色用10倍柱体积的蒸馏水洗涤固定化柱，放置在4 冰箱中，几天后重复实验1(2013浙江自选，节选)利用紫甘薯制酒可提高其附加值。请回答：(1)为提高紫甘薯的利用率，工厂化生产时，可加入果胶酶和淀粉酶，其中果胶酶可来自_等微生物。由于酶在水溶液中不稳定，因此常将酶固定在某种介质上制成_。(2)果胶酶可将紫甘薯匀浆中的果胶水解成_。a半乳糖醛酸和葡萄糖b半乳糖和果糖c半乳糖醛酸甲酯和果糖d半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯(3)紫甘薯匀浆流经淀粉酶柱后，取适量流出的液体，经脱色后加入kii2溶液，结果液体呈红色，表明该液体中含有_。a淀粉 b糊精 c麦芽糖 d葡萄糖答案(1)黑曲霉(或苹果青霉)固定化酶(2)d(3)b解析(1)、(2)果胶酶可将紫甘薯匀浆中的果胶水解成半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯，以提高紫甘薯的利用率；有些微生物，如黑曲霉、苹果青霉都可用于生产果胶酶；由于酶在水溶液中不稳定，所以常将酶固定在某种介质上制成固定化酶。(3)紫甘薯匀浆流经淀粉酶柱后，淀粉会被水解成糊精，糊精经脱色后加入kii2溶液后呈红色。2某同学用实验来探究ph对果胶酶活性的影响。他准备了5份含有等量果胶酶溶液的试管，用0.1%的氢氧化钠或盐酸溶液调节至不同的ph，每支试管加五块0.1 cm3的正方体苹果块，试管均置于25 室温条件下。(1)请你帮助选取ph梯度：_。(2)请设计两种方法改进实验，使实验在更短时间内完成。_。(3)生成果汁的量与酶活性强弱的关系是：_。可根据_来判断最适ph。(4)为确认澄清果汁的大量生成是由于果胶酶的作用，还应对实验进行怎样的设计？_。答案(1)5、6、7、8、9(2)将苹果块换成苹果泥；适当提高温度(3)酶活性越强，果胶分解越快，生成的果汁量越多相同时间内生成果汁量的多少(4)另设计一组实验，不加果胶酶，其他条件不变解析在探究ph对果胶酶活性影响的实验中选取的ph梯度一般为5、6、7、8、9；将苹果块制成苹果泥，使苹果泥与果胶酶充分接触，从而提高酶促反应速率，缩短反应的时间；在一定温度范围内，适当提高反应的温度，也可以提高酶促反应速率。3果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，常用于果汁的生产。(1)果胶酶用于果汁生产，是因为它能分解果胶，可解决果肉出汁率低和_等问题。(2)果胶由_和_组成。(3)若要检测苹果汁中是否还含有果胶，可取一定量的果汁与_混合，若出现_现象，说明果胶还没有被完全分解。(4)右图为某同学进行的澄清苹果汁生产实验，下列相关叙述正确的是_。a实验中所用的固定化果胶酶可由某些物质吸附，吸附后的酶可永久使用b为防止杂菌污染，图示装置制作完毕后需瞬间高温灭菌c通过控制阀调节苹果汁流出的速率，保证反应充分进行d固定化果胶酶不可重复使用，每次生产前需重新装填反应柱(5)固定化酶技术是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使酶能与_接触，又能与_分离。(6)在“淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测”这一实验中，淀粉酶固定在石英砂上，使用了下图中的_。答案(1)果汁浑浊(2)半乳糖醛酸半乳糖醛酸甲酯(3)乙醇浑浊(4)c(5)底物(反应物)产物(6)4如图是固定化酶反应柱，请回答下列问题。(1)将淀粉酶溶于水中，再加入石英砂，不时搅拌，这样淀粉酶就可以固定在石英砂上。这种固定化的方法称为_。30 min后，装入如图所示的反应器中，构成固定化酶反应柱，并用10倍体积的蒸馏水洗涤此反应柱，洗涤的目的是_。洗涤时，蒸馏水流速_(填“能”或“不能”)过快。(2)实验时，将此反应柱固定在支架上，用滴管滴加可溶性淀粉溶液，并以0.3 ml/min的流速过柱，控制流速的目的是_。在流出5 ml后接收0.5 ml流出液，加入12滴_，观察颜色。为了使观察到的颜色变化明显，可_后再观察。如果溶液呈红色，说明淀粉水解成为_。(3)实验后，用10倍柱体积的蒸馏水洗涤此反应柱，洗涤的目的是_。洗涤后，放置在4 冰箱中保存。几天后，可重复使用。(4)一段时间后，某同学从冰箱中取出此反应柱，重复上述实验，却没有了相同的结果，试分析可能的原因。_。答案(1)吸附法除去未吸附的游离淀粉酶不能(2)使淀粉溶液与溶粉酶充分接触充分反应kii2溶液稀释糊精(3)洗去残留的反应物和产物(4)从酶的活性、酶的数量、反应条件等方面分析，合理答案均可。解析(1)固定化酶的制作方法有吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法，本题所示为吸附法。洗涤是除去未吸附的一些游离的酶，在洗涤时流速不能过快，为1 ml/min。(2)以相对较慢的流速使淀粉溶液流过反应柱，可以让吸附着的酶与底物充分反应。根据kii2溶液与淀粉反应呈蓝色，与糊精反应呈红色的原理来鉴定反应情况。(3)实验完成后还需要对反应柱进行洗涤，以除去参与反应的反应物及生成的产物，以便重复使用。(4)一段时间后重复使用得不到相同的结果，排除反应物本身，肯定是酶出了问题，可能这些酶已经失活，再次操作时相应的反应条件(如温度)不适合等。考点40生物技术在食品加工中的应用1判断下列有关传统发酵技术的叙述(1)醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸(2014广东，4a)()(2)酵母菌在无氧条件下利用葡萄汁产生酒精(2014广东，4b)()(3)泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵(2014广东，4c)()(4)某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵(2012江苏，14b改编)()(5)在制作果醋时，如果条件适宜，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸(2012江苏，21b改编)()(6)在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，让发酵装置接受光照并放在45 处(2010北京，1ad改编)()2(2013浙江自选，节选)(1)在发酵前，为使酵母菌迅速发生作用，取适量的干酵母，加入温水和_。一段时间后，酵母悬液中会出现气泡，该气泡内的气体主要是_。将酵母菌接种到待发酵液后，随发酵的进行，酵母菌在_条件下产生了酒精和二氧化碳。(2)下图表示发酵液ph对酒精浓度的影响。据图判断，最佳ph值是_。答案(1)蔗糖co2无氧(2)4.7解析(1)酵母菌可分泌酶，酶在胞外将蔗糖分解后，酵母菌再吸收利用单糖。加入蔗糖使发酵原料更丰富，有利于早期酵母菌的大量繁殖，该时期酵母菌进行需氧呼吸产生co2和h2o；将酵母菌接种到待发酵液后，酵母菌会在无氧条件下发酵产生酒精和co2。(2)分析曲线图可知，ph为4.7时能获得最大酒精浓度。1果酒、果醋的制作(1)制作原理c6h12o6,2co22c2h5ohc2h5oho2,ch3coohh2o(2)制作过程果酒制作的一般过程：果醋制作的一般过程：连接发酵装置加入醋化醋杆菌发酵并检测ph调节活塞，控制流量测定ph，监控发酵情况。2泡菜的制作(1)制作原理：在无氧的条件下，微生物利用菜中的糖和其他营养物进行发酵，发酵产物有有机酸和醇类物质等。(2)制作过程各种菜洗净并切成34 cm长的小块。将泡菜坛洗净，并用热水洗坛内壁两次。将各种蔬菜、盐水、糖及调味品放入坛中，混合均匀。将坛口用水封好，防止外界空气进入。腌制1周左右即可开坛食用，也可随时加入新鲜蔬菜，不断取用。3亚硝酸盐测定原理亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，这一产物再与n1萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物，可用光电比色法定量。1利用如图装置制作果酒和果醋，下列叙述正确的是()a制作果酒时应关闭阀b，适时打开阀a几秒钟b制作果酒时如果关闭阀a，打开阀b，会导致爆瓶c制作果醋时需打开阀a通气，打开阀b排气d制作果醋时把发酵装置放到25 环境中比较适宜答案a解析图示装置中，阀a控制排气，阀b控制进气，所以制作果酒时应关闭阀b，适时打开阀a几秒钟以排出产生的气体；如果关闭阀a，打开b，产生的气体不能排出，会使发酵液从右侧导管排出，不会导致爆瓶；制作果醋时，打开阀a是为了排气，打开阀b是为了通气；制作果醋时发酵装置应放到3035 环境中比较适宜。2如图是泡菜的腌制及亚硝酸含量测定的实验流程示意图，请据图回答：(1)制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料，原因是_。泡菜腌制过程中起主要作用的菌种是_。(2)在制作泡菜的过程中，因为操作不当，造成泡菜腐烂。下列原因中正确的是()a罐口密闭缺氧，抑制了乳酸菌和需氧腐生细菌的生长繁殖b罐口密闭不严，氧气使乳酸菌的生长繁殖受到抑制，需氧腐生细菌的生长繁殖加快c罐口密闭不严，氧气使酵母菌和需氧腐生细菌的生长繁殖减慢d罐口密闭缺氧，促进了乳酸菌和需氧腐生细菌的生长繁殖(3)测定亚硝酸盐含量的方法是_。亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，反应产物再与n1萘基乙二胺偶联，形成_色产物。绘制标准曲线时，应以亚硝酸钠含量为横坐标，以_为纵坐标。(4)某同学在测定泡菜中亚硝酸盐含量时，取10 ml样品溶液，加入4.5 ml氯化铵缓冲液、2.5 ml 60%乙酸溶液和5 ml显色液，定容并在暗处静置25 min后测量亚硝酸盐含量。请指出该同学在实验中的失误之处并改正：_。(5)在腌制过程中的第3、5、7、9、11、13天分别对食盐浓度为4%、6%、8%的三坛泡菜做了亚硝酸盐含量的检测，得到以下数据：食盐浓度发酵天数1号坛4%2号坛6%3号坛8%第3天1.61.20.5第5天3.25.52第7天3.84.01.8第9天3.51.81.6第11天3.41.21.5第13天3.21.21.2请根据表中数据，对泡菜的制作提出两条建议：_、_。答案(1)所含亚硝酸盐的含量低假丝酵母和乳酸菌(2)b(3)光电比色法紫红光密度值(4)缺少对照，再取10 ml水做空白对照(5)泡菜腌制时间最好长于13天适当地增加食盐的浓度3(2014海南，30节选)已知泡菜中亚硝酸盐含量与泡制时间有关。为了测定不同泡制天数泡菜中亚硝酸盐的含量，某同学设计了一个实验，实验材料、试剂及用具包括：刻度移液管、比色管、不同浓度的亚硝酸钠标准溶液、亚硝酸盐的显色剂、不同泡制天数的泡菜滤液等。回答相关问题：(1)请完善下列实验步骤。标准管的制备：用_和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管。样品管的制备：用刻度移液管分别吸取一定量的_，加到不同的比色管中，然后在各个比色管中加入等量的显色剂进行显色，得到样品管。将每个_分别与系列标准管进行比较，找出与样品管颜色深浅_的标准管，该管中亚硝酸钠含量即代表样品管中的亚硝酸盐含量，记录各样品管亚硝酸盐的含量。(2)下图表示的是泡菜中_趋势。答案(1)不同浓度亚硝酸钠标准溶液不同泡制天数的泡菜滤液样品管相同(相近)(2)亚硝酸盐解析(1)在亚硝酸盐的含量测定中，用不同浓度亚硝酸钠标准溶液和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管；用刻度移液管分别吸取一定量的不同泡制天数的泡菜滤液，加到不同的比色管中，然后在各个比色管中加入等量的显色剂进行显色，得到样品管；将每个样品管分别与系列标准管进行比较，找出与样品管颜色深浅相近的标准管，该管中亚硝酸钠含量既代表样品管中的亚硝酸盐含量，记录各样品管亚硝酸盐的含量。(2)据图可知，该图表示亚硝酸盐的含量随发酵时间的变化曲线。4下图为果酒和果醋制作的实验流程。(1)为了提高苹果的利用率，可以在榨汁过程中使用纤维素酶和_酶，后者常利用_等微生物来生产。(2)在酒精发酵阶段，接种酵母菌一段时间后要密闭装置，此时，酵母菌进行_呼吸。培养液中酒精的浓度一般不会超过_。可观察的酒精发酵完毕的标志是_。(3)在酒精发酵过程中，下列各项中符合如图曲线的是_。a氧气含量 b酸碱度c酒精含量 d酵母菌数量(4)在醋酸发酵阶段，要向装置中通入_的空气，该阶段起作用的微生物是_。此时主要发生的生化反应是_(填总反应式)。答案(1)果胶黑曲霉、苹果青霉(2)厌氧16%装置中停止出现气泡(3)d(4)无菌(洁净)醋杆菌c2h5oho2ch3coohh2o考点41植物组织培养技术判断下列有关植物组织培养技术的叙述(1)在25 c的实验条件下可顺利完成的是制备用于植物组织培养的固体培养基(2014北京，5d)()(2)在植物组织培养中，为了诱导菊花试管苗生根，培养基中一般不加入iaa(2012新课标全国，39(4)改编)()(3)在植物组织培养中，二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株(2011江苏，16b)()(4)在植物组织培养中，以花粉作为外植体可得到单倍体植株(2011上海，22c)()(5)同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同(2008江苏，20d)()1培养基(1)发芽培养基：细胞分裂素摩尔浓度大于生长素摩尔浓度的培养基。(2)生根培养基：生长素摩尔浓度大于细胞分裂素摩尔浓度的培养基。2过程3操作流程配制ms固体培养基外植体的消毒：用70%的乙醇和5%的次氯酸钠溶液对外植体进行消毒，注意时间不能太长接种：接种过程中插入外植体时形态学上端朝上，每个锥形瓶接种23个外植体。外植体接种与细菌接种相似，操作步骤相同，而且都要求无菌操作培养：应该放在无菌箱中进行，并定期进行消毒，保持适宜的温度和光照移栽：将生根的苗从锥形瓶中移至草炭土或蛭石中继续生长，苗健壮后再移至土中栽培1菊花的组织培养的大致过程如下图所示。请回答下列问题：图中b、c依次表示_过程(填名称)，添加的关键激素是_。该实验操作成功的关键是_，要对外植体、超净工作台等消毒，对_等灭菌。答案脱分化、再分化细胞分裂素、生长素无菌操作(或无菌技术)培养基(或培养器具)解析植物组织培养中b表示脱分化形成愈伤组织，c表示再分化形成试管幼苗，添加的关键激素是细胞分裂素、生长素，二者浓度的配比调节分化过程。该实验成功的关键是无菌操作，要对外植体、超净工作台等消毒，对培养基(或培养器具)等灭菌。2下图为利用胡萝卜韧皮部组织细胞在一定的条件下培育形成胡萝卜幼苗的过程示意图，其中字母代表过程或结构。请据图回答：(1)该技术过程的原理是_，a、b分别代表_；采用的胡萝卜韧皮部细胞必须处于_状态，培养基中除加入一定的营养成分外，还需要加入_。(2)c代表_，其优点是_。(3)利用该项技术可以生产脱毒苗，原因是_。答案(1)植物细胞具有全能性脱分