血清葡萄糖的测定.ppt

GOD POD法 实验九血清葡萄糖浓度的测定 CONTENTS 1 相关临床知识 血液中的葡萄糖称为血糖 1 相关临床知识 空腹血糖3 9 6 1mmol L 正常餐后两小时 3 9 7 8mmol L 糖尿病 空腹 餐后两小时 7 0mmol L 11 1mmol L 1 相关临床知识 胰岛B细胞 靶细胞 胰岛素 I型糖尿病 T1DM 别名 青年发病型糖尿病或胰岛素依赖性糖尿病 原因 胰腺产生胰岛素的细胞已经彻底损坏 易发病人群 年龄轻 大多 30岁治疗 依赖胰岛素治疗 II型糖尿病 T2DM 别名 非胰岛素依赖型糖尿病原因 自身能产生胰岛素 但细胞无法对其做出反应 易发病人群 中老年人 肥胖者治疗 需要胰岛素单独或与口服药联合应用的治疗 有些患者血糖含量并不稳定 有什么办法进一步更准确诊断 1 相关临床知识 口服葡萄糖耐量试验 OGTT 概念 是一种葡萄糖负荷试验 用以了解胰岛 细胞功能和机体对血糖的调节能力 是诊断糖尿病的确诊试验 原理 正常人进食糖类后血糖会暂时升高 0 5 1小时后升到最高峰 但不超过8 9mmol L 2小时后回到空腹水平 1 相关临床知识 OGTT操作步骤 1 试验前3天内 每日碳水化合物摄入量不少于150g 2 空腹取血后 5分钟内口服溶于250 300ml水内的75g无水葡萄糖粉的糖水 妊娠妇女用量为100g 儿童按1 75g kg体重给予 不超过75g 3 服糖后半小时 1小时 2小时 3小时分别在前臂采血测血糖 采血同时 每隔1小时取尿液作尿糖试验 试验过程中 受试者不喝茶及咖啡 不吸烟 不做剧烈运动 4 OGTT2小时后血糖 11 1mmol L可以确诊糖尿病 OGTT诊断1 当静脉空腹血糖 6 1mmol L OGTT2小时血糖 7 8mmol L 说明人体对进食葡萄糖后的血糖调节能力正常 2 当静脉空腹血糖 7 0mmol L或OGTT2小时血糖 11 1mmol L 说明人体处理进食后葡萄糖的能力明显降低 可以确诊糖尿病 3 当静脉空腹血糖 7 0mmol L 并且OGTT2小时血糖介于7 8 11 1mmol L之间 说明人体对葡萄糖的调节能力轻度下降 可以诊断糖耐量减低 4 当静脉空腹血糖介于6 1 7 0mmol L之间 且OGTT2小时血糖 7 8mmol L 说明人体对进食葡萄糖后的血糖调节能力尚好 但对空腹血糖调节能力轻度减退 可以诊断空腹血糖受损 1 相关临床知识 2 实验目的 1 掌握酶法测定血清葡萄糖浓度的原理2 掌握血糖变化的临床意义 3 实验原理 血糖测定的方法有哪些 一 无机化学法 Folin Wu法 基于葡萄糖醛基的还原性 二 有机化学法 邻甲笨胺法 联笨胺法等 三 酶法 Cu2 OH Glu Cu 磷钼酸 显色 1 己糖激酶法 HK 2 葡萄糖氧化酶法 GOD POD法 邻甲笨胺 Glu 葡萄糖基胺 蓝绿色化合物 分子重排 脱水 希夫氏碱 缩合 特异性差 3 实验原理 葡萄糖氧化酶法 GOD POD法 葡萄糖氧化酶 GOD 将葡萄糖氧化为葡萄糖酸酶 同时释放过氧化氢 过氧化氢酶 POD 催化过氧化氢氧化色素原 如4 氨基安替比林和苯酚 并使色素原氧化成红色醌类化合物 即Trinder反应 红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比 葡萄糖 O2 H2O 葡萄糖酸 2H2O2 GOD 2H2O2 4 氨基安替比林 苯酚 红色醌类化合物 POD 4 实验器材和试剂 一 器材5ml移液管 微量可调式移液管 721E分光计 37 恒温水浴 二 试剂1 苯甲酸钠溶液 12mmol L 2 酶酚混合试剂酶试剂 酚溶液1 13 葡萄糖标准工作液 5mmol L 防止氧化 葡萄糖为单糖 含醛基 易氧化成羧基 5 实验操作 取试管3支 按表操作 混匀 置37 水浴中 保暖25min 在波长510nm处比色 以空白管调零 读取标准管及测定管的吸光度 计算公式 血清葡萄糖浓度 A测定 A标准 5mmol L 参考值空腹血清葡萄糖浓度 3 89 6 11mmol L 临床意义 1 生理性高血糖可见摄入高糖食物后 或情绪紧张肾上腺分泌增加时 2 病理性高血糖糖尿病 病理性高血糖常见于胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患者 内分泌腺功能障碍 甲状腺功能亢进 肾上腺皮质功能及髓质功能亢进 引起各自对抗胰岛素的激素分泌过多 或升高血糖的激素增多引起的高血糖现已归入特异性糖尿病中 颅内压增高 可刺激血糖中枢 如脑膜炎 颅外伤 颅内出血等 引起血糖增高 脱水引起的高血糖 如呕吐 腹泻和高热等也可使血糖轻度增高 3 生理性低血糖见于饥饿和剧烈运动时 4 病理性低血糖特发性功能性低血糖最多见 其次是药源性 肝源性和胰岛素瘤等 注意事项 1 葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄糖含量 但不能直接测定尿液葡萄糖含量 这是因为尿液中的尿酸等干扰性物质浓度过高 可干扰过氧化氢酶反应