药物头孢Ⅳ号和氨苄青霉素及其生物合成前体的毛细管区带电泳分离.pdf

药物头孢 号和氨苄青霉素及其生物合成 前体的毛细管区带电泳分离 王 志 孙亦梁 王丹丹 北京大学化学与分子工程学院 北京 提 要 研究了同分异构体药物头孢 号和氨苄青霉素及其目标生物合成前体三肽 苯丙氨酸 半胱氨酸 缬氨酸 苯丙氨酸 半胱氨酸 缬氨酸的毛细管区带电泳分离 结果表明 采用含 二甲基 环糊精 的 缓冲溶液 既可将头孢 号和氨苄青霉素分离 又可将 苯丙氨酸 半胱氨酸 缬氨酸 苯丙氨酸 半胱氨酸 缬氨酸分离 关键词 毛细管区带电泳 头孢 号 氨苄青霉素 生物合成前体 分类号 前言 毛细管电泳 是 年代末发展起来的一门 新的分析技术 过去几年中得到了较快的发展 它 有 毛细管区带电泳 胶束电动毛细管色谱 毛细管电色谱 毛细管凝胶电泳 等几种分离模式可供选择 已用于包括生物 大分子 药物等小分子 无机离子 以及各种异 构体 等的分离工作中 的应用研究比重不断 增加 开发利用三肽 苯丙氨酸 半胱氨酸 缬 氨酸和 苯丙氨酸 半胱氨酸 缬氨酸生物合成 头孢 号和氨苄青霉素 需要建立快速监测方法 已 有关于 和 的青霉素和头孢菌素类的生 物合成监测方法的报道 然而 的操作费用要 大大低于 法 本文采用了 分离模式获得 了满意的分离效果 实验部分 仪器和试剂 毛细管电泳仪由本实验室组装 毛细管 有效长度 河北 永年光纤厂 高压电源由本实验室自制 可提供 电压 应用 检测器 在 处负极检测 满标尺吸光 度 响应时间 记录仪 毛细管柱用 微型电扇通风以驱散所产生的焦耳热 图 所研究的化合物的结构式 苯丙氨酸 半胱氨酸 缬氨酸 苯丙氨酸 半胱氨酸 缬氨酸 头孢 号 氨苄青霉素 第 卷第 期色 谱 年 月 国家教委博士点基金和国家自然科学基金资助项目 河北农业大学基础部 保定 通讯联系人 本文收稿日期 修回日期 环糊精 二甲基 环糊 精 研究样品由本学院有 机化学研究所提供 其结构式见图 其它药品均为 分析纯 所用水为去离子水 实验条件 缓冲溶液 称取 溶于水中 用 滴至 后定容于 容量瓶中制得 将适量环糊精溶于上述缓冲 溶液中 缓冲溶液使用前经过 滤膜过滤并 超声波脱气 将适量样品溶于 缓冲溶液 中制得约 溶液以获得适当的峰高响应 分别用 和水真空抽洗 活化新毛细管柱表面 然后再用缓冲 溶液冲洗 每次进样前 分别用 和水 各冲洗 再用缓冲溶液冲洗 以电动法正 极进样 在室温 下操作 结果与讨论 从图 可以看出 药物头孢 号和氨苄青霉素 是同分异构体 而 苯丙氨酸 半胱氨酸 缬氨 酸和 苯丙氨酸 半胱氨酸 缬氨酸属非对映立 体异构体 它们均属两性物质 在碱性介质中它们荷 负电 在电场中将向正极移动 在酸性介质中它们荷 正电 在电场中将向负极移动 本研究首先选用酸性 介质 低 值 以 方式进行分离研究 在此条 件下 电渗流亦向负极移动 但电渗流速度很小 图 给出了用 缓冲溶液 时的电泳分离图 图 表明 在此缓冲溶液中 苯丙 氨酸 半胱氨酸 缬氨酸和 苯丙氨酸 半胱氨 图 所研究的化合物的毛细管电泳分离图 酸 缬氨酸只获得部分分离 而头孢 号和氨苄青 霉素基本达到基线分离 环糊精类物质已作为 缓冲溶液添加剂用于 包括手性分离在内的各种异构体的分离 在本研 究中 我们分别向 缓冲溶液中 加入 的 和 以改善分离 结果见图 图 表明 当用含有 的 缓冲液 时 虽然 对生物合成前体三肽 苯丙氨酸 半胱氨酸 缬氨酸和 苯丙氨酸 半胱氨酸 缬氨酸的分离 有所改善 但对头孢 号和氨苄青霉素的分离性能 反而下降了 从图 可以看出 当用 时 苯丙氨酸 半胱氨酸 缬氨酸和 苯丙氨酸 半胱氨酸 缬氨酸以及头孢 号和氨苄青霉素 之间的分离均得到了改善 都获得了基线分离 加入 类环糊精改变分离选择性的原因可能是由于待分 离物质 均为苯环取代结构 与 类环糊精疏水腔 体尺寸基本相当而形成主客体配合物所致 图 所研究的化合物的毛细管电泳分离图 背景电解质 背景电解质 其它同图 结论 应用 体系对药物头孢 号和氨苄青霉素 及其生物合成前体 和 在含有 的酸性介质 中实现了完全的分离 本 分离方法简单 快速 易于操作并且仅使用常用试剂 在操作费用上要大大低于 法 为头孢 号和氨 苄青霉素合成过程的定性监测提供了新的途径 期 王 志等 药物