微生物实验课培养基配方.doc

第一组：5人牛肉膏蛋白胨培养基（固体培养基，用于分离培养细菌）配方：1000 ml ，pH7.4左右水（自来水）1000ml牛肉膏5g蛋白胨10gNaCl5g琼脂条24 g（8g3）步骤：1. 洗干净所需的器具。2. 开电炉，取1000ml自来水倒900ml到1L的烧杯中，进行适当加热（50度左右）。3. 称10g蛋白胨，5g NaCl依次分别加入热水中，边加热边用玻璃棒搅拌，直至彻底溶解，称5g牛肉膏，连同称量纸一起投入烧杯中，搅拌溶解，捞起称量纸，用余下的100ml水冲洗称量纸到溶液中，扔掉称量纸。4. 试剂溶解后用pH试纸检测pH值，比对，然后慢速少量加入NaOH调pH至7.2-7.4之间（使用pH试纸比对），用1L量筒定容至总体积1000ml。5. 取三个容量为500ml的三角瓶，尽量剪短琼脂条，称重，往每个三角瓶中加8g琼脂。6. 使用500ml的量筒，依次取330ml加入已有琼脂的三角瓶中，余下的液体再平分，适当摇动使琼脂条侵入溶液中。7. 用吸水纸清洁瓶口，加棉花塞，扎口，注明培养基名称“牛肉膏蛋白胨”，班级，日期。第二组：5人高氏一号培养基（固体培养基，用于分离培养放线菌）配方：1000 ml ，pH7.4左右水（自来水）1000ml可溶性淀粉20g先加入冷水中搅拌溶解K2HPO40.5gKNO31gMgSO47H2O5gNaCl0.5gFeSO40.01g加1ml 1%母液琼脂条24 g（8g3）步骤：1. 洗干净所需的器具。2. 量1000ml自来水倒入1L大烧杯中，加入20g可溶性淀粉，搅拌溶解。3. 开电炉，进行适当加热（50度左右）。4. 称0.5g K2HPO4，1g KNO3，5g MgSO47H2O，0.5 g NaCl，依次分别加入热水中，边加热边用玻璃棒搅拌，直至彻底溶解。5. 溶解后慢速少量加入NaOH调pH至7.2-7.4之间（使用pH试纸比对），用1L量筒定容至总体积1000ml。6. 取三个容量为500ml的三角瓶，尽量剪短琼脂条，称重，往每个三角瓶中加8g琼脂。7. 使用500ml的量筒，依次取330ml加入已有琼脂的三角瓶中，余下的液体再平分，适当摇动使琼脂条侵入溶液中。8. 用吸水纸清洁瓶口，加塞，扎口，注明培养基名称“高氏一号”，班级，日期。第三组：4人马丁氏培养基（固体培养基，用于培养真菌）配方：1000 ml ，pH自然水（自来水）990ml葡萄糖10g蛋白胨5gKH2PO41gMgSO47H2O 0.5g 1/300孟加拉红水溶液10 ml 最后加琼脂条24 g（8g3）步骤：1. 洗干净所需的器具。2. 开电炉，取990ml自来水进行适当加热（50度左右）。3. 称10g葡萄糖，5g蛋白胨，1g KH2PO4，0.5g MgSO47H2O，依次分别加入热水中，边加热边用玻璃棒搅拌，直至彻底溶解。对称量纸上残留的成分可抓住称量纸的一个角，在溶液中稍作漂洗。4. 将溶液倒入1L的量筒中，加10ml 1/300孟加拉红水溶液，定容至总体积1000ml。5. 取三个容量为500ml的三角瓶，尽量剪短琼脂条，称重，往每个三角瓶中加8g琼脂。6. 使用500ml的量筒，依次取330ml加入已有琼脂的三角瓶中，余下的液体再平分，适当摇动使琼脂条侵入溶液中。7. 用吸水纸清洁瓶口，加塞，扎口，注明培养基名称“马丁氏”，班级，日期。第四组：4人淀粉培养基（固体培养基，用于淀粉水解试验）配方：1000 ml ，pH7.0-7.2水（自来水）1000ml可溶性淀粉2g先加入冷水中搅拌溶解蛋白胨10g牛肉膏5gNaCl5g琼脂条24 g（8g3）步骤：1. 洗干净所需的器具。2. 量1000ml自来水倒900ml到1L大烧杯中（另100ml等会用于冲洗称牛肉膏的称量纸），加入20g可溶性淀粉，搅拌溶解。3. 开电炉，进行适当加热（50度左右）。4. 称10g蛋白胨，5g牛肉膏，5g NaCl，2g K可溶性淀粉，依次分别加入热水中，边加热边用玻璃棒搅拌，直至彻底溶解。对称量纸上残留的成分可抓住称量纸的一个角，在溶液中稍作漂洗，用上面预留的100ml水冲洗。5. 溶解后慢速少量加入NaOH调pH至7.0-7.2之间（使用pH试纸比对），将溶液倒入1L的量筒中，定容至总体积1000ml。6. 取三个容量为500ml的三角瓶，尽量剪短琼脂条，称重，往每个三角瓶中加8g琼脂。7. 使用500ml的量筒，依次取330ml加入已有琼脂的三角瓶中，余下的液体再平分，适当摇动使琼脂条侵入溶液中。8. 用吸水纸清洁瓶口，加塞，扎口，注明“淀粉”培养基，班级，日期。第五组：3人葡萄糖蛋白胨水培养基（液体培养基，乙酰甲基甲醇试验【V.P.实验】用）配方：300 ml ，pH自然水（自来水）300 ml蛋白胨1.5 gK2HPO40.6 g葡萄糖1.5 g步骤：1. 装60支试管于试管架上，洗干净其它所需的器具。2. 开电炉，取300ml自来水进行适当加热（50度左右）。3. 称1.5 g蛋白胨，0.6 g KH2PO4，1.5 g葡萄糖，依次分别加入热水中，边加热边用玻璃棒搅拌，直至彻底溶解。4. 定容至总体积300ml，调pH至7.0-7.2。5. 分装于60支试管，每支5ml。6. 注意试管口勿沾上培养基，若不小心沾上，用吸水纸清洁试管口。7. 加塞，每10支一扎，牛皮纸包口。试管正放，勿倒下。注明“V.P.”，班级。第六组：3人蛋白胨水培养基（液体培养基，吲哚试验用）配方：300 ml ，pH7.6水（自来水）300 mlNaCl1.5 g蛋白胨3 g步骤：1. 装60支试管于试管架上，洗干净其它所需的器具。2. 开电炉，取300ml自来水进行适当加热（50度左右）。3. 称3 g蛋白胨，1.5 g NaCl，依次分别加入热水中，边加热边用玻璃棒搅拌，直至彻底溶解。4. 定容至总体积300ml，调pH至7.6。5. 分装于60支试管，每支5ml。6. 注意试管口勿沾上培养基，若不小心沾上，用吸水纸清洁试管口。7. 加塞，每10支一扎，牛皮纸包口。试管