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文档简介
培养基配方 1玫瑰红钠琼脂培养基胨5.0g玫瑰红钠0.0133g葡萄糖10.0g琼脂14.0g磷酸二氢钾1.0g水1000ml硫酸镁0.5g除葡萄糖、玫瑰红钠外,取上述成分,混合,微温溶解,滤过,加入葡萄糖、玫瑰红钠,分装,灭菌。2酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)胨10.0g琼脂14.0g酵母浸出粉5.0g水1000ml葡萄糖20.0g除葡萄糖外,取上述成分,混合,微温溶解,滤过,加入葡萄糖,分装,灭菌。3胆盐乳糖培养基(BL)胨20.0g磷酸二氢钾1.3g乳糖5.0g牛胆盐2.0g氯化钠5.0g(或去氧胆酸钠)(0.5g)磷酸氢二钾4.0g水1000ml除乳糖、牛胆盐(或去氧胆酸钠)外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.40.2,煮沸,滤清,加入乳糖、牛胆盐(或去氧胆酸钠),分装,灭菌。4乳糖胆盐发酵培养基蛋白胨20.0g 0.04%溴甲酚紫水溶液25ml乳糖10.0g水1000ml牛胆盐5.0g除0.04%溴甲酚紫水溶液外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.40.2,加入0.04%溴甲酚紫指示液,根据要求的用量分装于含倒管/27.19的试管中。灭菌。所用倒管的规格应保证产气结果的观察。5.曙红亚甲蓝琼脂培养基(EMB)营养琼脂培养基100ml曙红钠指示液2ml20乳糖溶液5ml亚甲蓝指示液1.31.6ml取营养琼脂培养基,加热溶化后,冷至60,按无菌操作加入灭菌的其他3种溶液,摇匀,倾注平皿。6.麦康凯琼脂培养基(MacC)胨20.0g 1%中性红指示液3ml乳糖10.0g琼脂14.0g牛胆盐5.0g水1000ml氯化钠5.0g除乳糖、1%中性指示液、牛胆盐及琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.20.2,加入琼脂,加热溶化后,再加入其余各成分,摇匀,分装,灭菌,冷至约60,倾注平皿。7.4-甲基伞形酮葡糖苷酸(4-methylumbelliferyl-D-glucuronide,MUG)培养基胨10.0g磷酸二氢钾(无水)0.9g硫酸锰0.5mg磷酸氢二钠(无水)6.2g硫酸锌0.5mg亚硫酸钠40mg硫酸镁0.1g去氧胆酸钠1.0g氯化钠5.0g MUG 75mg氯化钙50mg水1000ml除MUG外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.30.1,加入MUG,溶解,每管分装5ml,灭菌。8三糖铁琼脂培养基(TSI)胨20.0g硫酸亚铁0.2g牛肉浸出粉5.0g硫代硫酸钠0.2g乳糖10.0g 0.2%酚磺酞指示液12.5ml蔗糖10.0g琼脂12.0g/27.20葡萄糖1.0g水1000ml氯化钠5.0g除三种糖、0.2%酚磺酞指示液、琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.30.1,加入琼脂,加热溶化后,再加入其余各成分,摇匀,分装,灭菌,制成高底层(23cm)短斜面。9.四硫磺酸钠亮绿培养基(TTB)胨5.0g硫代硫酸钠30.0g牛胆盐1.0g水1000ml碳酸钙10.0g取上述成分,混合,微温溶解,灭菌。临用前,取上述培养基,每10ml加入碘试液0.2ml和亮绿试液0.1ml,混匀。10.沙门、志贺菌属琼脂培养基(SS)胨5.0g硫代硫酸钠8.5g牛肉浸出粉5.0g中性红指示液2.5ml乳糖10.0g亮绿试液0.33ml牛胆盐8.5g琼脂16.0g枸橼酸钠8.5g水1000ml枸橼酸铁铵1.0g除乳糖、中性红指示液、琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.20.1,滤过,加入琼脂,加热溶化后,再加入其余各成分,摇匀,灭菌,冷至60,倾注平皿。12.胆盐硫乳琼脂培养基(DHL)胨20.0g枸橼酸钠1.0g牛肉浸出粉3.0g枸橼酸铁铵1.0g乳糖10.0g中性红指示液3ml蔗糖10.0g琼脂16.0g去氧胆酸钠1.0g水1000ml硫代硫酸钠2.3g/27.21除糖、指示液及琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.20.1,加入琼脂,加热溶化后,再加入其余成分,摇匀,冷至60,倾注平皿。13.溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基胨10.0g溴化十六烷基三甲铵0.3g牛肉浸出粉3.0g琼脂14.0g氯化钠5.0g水1000ml除琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.50.1,加入琼脂,加热溶化后,分装,灭菌,冷至60,倾注平皿。14.亚碲酸盐肉汤培养基临用前,取灭菌的营养肉汤培养基,每100ml中加入新配制的1%亚碲酸钠(钾)试液0.2ml,混匀,即得。15.卵黄氯化钠琼脂培养基胨6.0g 10%氯化钠卵黄液100ml牛肉浸出粉1.8g琼脂14.0g氯化钠30.0g水650ml除10%氯化钠卵黄液外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.60.1,灭菌,待冷至约60,以无菌操作加入10%氯化钠卵黄液,充分振摇,倾注平皿。10%氯化钠卵黄液的制备取新鲜鸡蛋1个,以无菌操作取出卵黄,放入10%无菌氯化钠溶液100ml中,充分振摇,即得。16.甘露醇氯化钠琼脂培养基胨10.0g酚磺酞指示液2.5ml牛肉浸出粉1.0g琼脂14.0g甘露醇10.0g水1000ml氯化钠75.0g除甘露醇、酚磺酞指示液及琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.40.2,加入琼脂,加热溶化后,滤过,分装,灭菌,冷至60,倾注平皿。/27.2217.乳糖发酵培养基胨20.0g 0.04%溴甲酚紫指示液25ml乳糖10.0g水1000ml除0.04%溴甲酚紫指示液外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.20.2,加入指示液,分装于含倒管的小试管中,每管3ml。灭菌。18.绿脓菌素(Pyocyanin)测定用培养基(PDP琼脂培养基)胨20.0g甘油10ml氯化镁(无水)1.4g琼脂14.0g硫酸钾(无水)10.0g水1000ml取胨、氯化镁、硫酸钾和水混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.30.1,加入甘油及琼脂,加热溶化,混匀,分装于试管,灭菌,置成斜面。19.梭菌增菌培养基牛肉浸出粉10.0g盐酸半胱氨酸0.5g胨10.0g氯化钠5.0g酵母浸出粉3.0g醋酸钠3.0g可溶淀粉1.0g琼脂0.5葡萄糖5.0g水1000mL取上述成分,混合,加热煮沸使溶解,调节pH值使灭菌后为6.80.2,热溶化,滤过,分装,灭菌。20.哥伦比亚琼脂培养基酪蛋白胰酶消化物10.0g肉胃酶消化物5.0g心胰酶消化物3.0g氯化钠5.0g玉米淀粉1.0g琼脂15.0g酵母浸出粉5.0g水1000ml除琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.30.2,加入琼脂,加热溶化,滤过,分装,灭菌,冷至4550,加入相当于20mg庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素,混匀,倾注平皿。21.沙氏葡萄糖液体培养基葡萄糖40g水1000ml/27.23蛋白胨10g除葡萄糖外。取上述成分,混合,微温溶解,滤过。加入葡萄糖,溶解,分装,灭菌。22.沙氏葡萄糖琼脂培养基葡萄糖40g琼脂1518g蛋白胨10g水1000ml除琼脂和葡萄糖外。混合,微温溶解,滤过。加入琼脂和葡萄糖,溶解,分装,灭菌。23.念珠菌显色培养基(CHROMagar)蛋白胨10.2g琼脂15g氢罂素0.5g,灭菌水1000ml色素22.0g除琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值至6.30.2。滤过,加入琼脂,加热煮沸,不断搅拌至琼脂完全溶解,倾注平皿。24.1%吐温80-玉米琼脂培养基黄色玉米粉40g琼脂1015g聚山梨酯80 10ml水1000ml取玉米粉、吐温80及蒸馏水500ml,混合,65加热30分钟,混匀,用纱布滤过,补足原水量。取琼脂,水500ml,混合,加热溶解。将以上两种溶液混合,摇匀,分装,灭菌。二盐酸二甲基对苯二胺试液取二盐酸二甲基对苯二胺0.1g,加水10ml,即得。需新鲜少量配制,于冷处避光保存,如试液变成红褐色,不可使用。亚碲酸钠(钾)试液取亚碲酸钠(钾)0.1g,加新鲜煮沸后冷至50的水10ml使溶解。玫瑰红钠试液取玫瑰红钠0.1g,加水使溶解成75ml。亮绿试液取亮绿0.1g,加水100ml使溶解。盐酸试液取盐酸8.4ml,加水使稀释成100ml。靛基质试液取对二甲氨基苯甲醛5.0g,加入戊醇(或丁醇)75ml,充分振摇,使完全溶解后,再取浓盐酸25ml徐徐滴入,边加边振摇,以免骤热导致溶液色泽变深,或取对二甲氨基苯甲醛1.0g,加入95%乙醇95ml,充分振摇,使完全溶解后,取盐酸20ml徐徐滴入。碘试液取碘6g与碘化钾5g,加水20ml使溶解。过氧化氢试液取浓过氧化氢溶液(30%),加水稀释成3%的溶液。临用时配制。指示液中性红指示液取中性红1.0g,研细,加95乙醇60ml使溶解,再加水至100ml。
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