高中生物 4.2 分子生物学技术同步训练 苏教版选修1.doc

2013年高中生物 4.2 分子生物学技术同步训练 苏教版选修1引物的作用是()a打开dna双链b催化合成dna子链c使dna聚合酶能够从引物的3端开始复制d提供模板解析：选c。引物的作用是使dna聚合酶能够从引物的3端开始复制。有关pcr反应的叙述中，正确的是()apcr反应所需要的引物只是rnabpcr反应所需要的原料是核糖核苷酸cpcr反应所需要的酶在60 时会变性dpcr反应需要在一定的缓冲液中进行解析：选d。pcr反应所需要的引物是dna或rna；原料是四种脱氧核糖核苷酸；变性是在高温下进行的，所用taq聚合酶的特点是耐高温，即在高温下不变性。pcr技术扩增dna新链之前必须合成()adna解旋酶b引物c新的脱氧核苷酸 d核苷酸解析：选b。dna复制时，合成dna新链之前必须合成引物。标准的pcr过程一般分为变性、退火、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是()a94 、56 、72 b72 、50 、92 c50 、92 、72 d80 、50 、72 解析：选a。当温度上升到94 时，作为模板的双链dna解旋成为单链dna，称之为变性；当温度下降到56 (4060 )左右时，两种引物通过碱基互补配对原则与两条单链dna结合；当温度回升到72 左右(taq聚合酶的最适反应温度)，在单链上4种脱氧核苷酸按照碱基互补配对原则连接在引物之后，使引物链延伸，形成互补的dna双链，称为延伸。(2012徐州高二检测)下列关于dna复制和pcr的描述中，正确的是()adna聚合酶不能从头开始合成dna，只能从5端延伸dna链bdna复制不需要引物c引物与dna母链通过碱基互补配对进行结合dpcr扩增的对象是氨基酸序列解析：选c。由于dna聚合酶不能从头开始合成dna，只能从3端延伸dna链，故dna复制需要引物，而且它与dna母链通过碱基互补配对结合。pcr扩增的对象是dna，而不是氨基酸。回答下列关于dna复制与pcr技术的相关问题：(1)pcr与生物体内的dna复制有何区别？_。(2)pcr每次循环都可分为_、_和_三步。(3)_的发现和使用大大提高了pcr的效率，使pcr技术趋向_。(4)pcr通过控制_来控制双链的_与_。(5)pcr反应需要一定的缓冲溶液中提供_、分别与两条模板结合的_、_种脱氧核苷酸、_的dna聚合酶。(6)从第二轮循环开始，dna聚合酶只能特异的复制_的dna序列，使这段_的序列呈指数扩增。解析：本题主要考查关于dna复制与pcr技术的知识，尤其对pcr技术的考查较细致，可参考答案。答案：(1)pcr反应不需要解旋酶，而生物体内dna复制时需要解旋酶；pcr需要耐热的dna聚合酶，而生物体内dna聚合酶在高温的时候会变性pcr一般要经历三十多次循环，而生物体内dna复制需要生物体自身的控制(2)变性退火延伸(3)taq聚合酶自动化(4)温度解聚结合(5)dna模板两种引物四耐热(6)处于两个引物之间固定长度taq dna聚合酶的特点是()a耐高温 b耐盐酸c耐强碱 d不耐热解析：选a。taq dna聚合酶的特点是耐高温。有关pcr技术的说法，错误的是()apcr是一项在生物体外复制特定dna片段的核酸合成技术bpcr技术的原理是dna双链复制c利用pcr技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列dpcr扩增中必须有解旋酶才能解开双链dna解析：选d。pcr扩增中双链dna受热变性后会解旋。在pcr反应中，只有一个dna的片段作为模板，经过一次循环后，含引物的dna单链占dna总链数的()a1/2 b1/4c1 d1/8解析：选b。在pcr反应中，只有一个dna的片段作为模板，经过一次循环后，得到2个dna分子共4条链，含引物的dna单链占dna总链数的1/4。在下列哪种温度范围内，dna的双螺旋结构能解开()a1020 b80100 c2030 d4060 解析：选b。dna在80 以上才会变性。下列关于dna双链的叙述错误的是()a通常将dna的羟基末端称为5端，而磷酸基团的末端称为3端b通常将dna的羟基末端称为3端，而磷酸基团的末端称为5端c通常dna只能从3端延伸dna链d通常dna不能从5端延伸dna链解析：选a。本题考查dna双链的结构与复制。通常将dna的羟基末端称为3端，磷酸基团末端称为5端。(2012南京高二检测)在pcr扩增实验中，引物是很重要的。下列属于引物特点的是()引物长度一般是80100个碱基对(bp)为宜引物是一小段dna或rna引物能与dna母链的一段碱基序列互补配对a bc d解析：选b。引物长度一般以1540个碱基对(bp)为宜，包括引物和引物两种。引物太短或太长，都可能降低产物的特异性。引物是一小段dna或rna，它能与dna母链的一段碱基序列互补配对。如图表示dna变性和退火示意图，下列相关说法正确的是()a向右表示dna加热(94 左右)变性的过程b向左表示dna双链迅速制冷退火过程c变性与在生物体内解旋过程的条件和实质都相同d图中dna片段共有四个游离的磷酸基、四个3端解析：选a。在94 左右温度范围内，dna的双螺旋结构解体，双链分开，这一过程称为变性，则a项正确。变性后的dna在缓慢降温后才会退火，则b项错误。变性与在生物体内解旋过程的条件不同，但实质相同，即氢键断裂，双链解开，则c项错误。任何一个dna片段都有两个游离的磷酸基(5端)和两个游离的羟基(3端)，则d项错误。pcr技术的操作步骤依次是()a高温变性、中温延伸、低温退火b高温变性、低温退火、中温延伸c中温延伸、高温变性、低温退火d中温延伸、低温退火、高温变性解析：选b。pcr技术的操作步骤依次是：高温变性、低温退火、中温延伸。(2012无锡高二检测)关于dna复制，下列叙述正确的是()adna聚合酶不能从头开始合成dna，只能从5端延伸dna链bdna复制不需要引物c引物与dna母链通过碱基互补配对进行结合ddna的合成方向总是从子链的3端向5端延伸解析：选c。本题主要考查dna聚合酶的作用特点。dna聚合酶不能从头开始合成dna，只能从引物的3端延伸dna链。模板链首先复制的是3端，即复制方向是35。而dna分子是反向平行的，子链是依据碱基互补配对原则，在dna聚合酶作用下合成的，其合成方向为从子链53。某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中，发现了一种冰冻的已灭绝的巨大动物的肌肉。他想了解该巨型动物的dna与现今印度大象的dna的相似性，于是做了如下检测工作，其中正确的操作步骤及顺序是()降低温度，检测处理后形成的杂合dna双链区段通过pcr技术扩增巨型动物和大象的dna把巨型动物的dna导入大象的细胞中在一定的温度条件下，将巨型动物和大象的dna水浴共热abcd解析：选d。要想对比两个dna分子的相似性，首先需要有足够的样本，所以先扩增；然后在一定温度下，使其变性，解成单链；再降低温度，检测杂合dna双链区段。pcr一般要经过三十多次循环，从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，由引物延伸而成的dna单链作模板时将()a仍与引物结合进行dna子链的延伸b与引物结合进行dna子链的延伸c同时与引物和引物结合进行子链延伸d无需与引物结合，在酶的作用下从头合成子链解析：选b。当由引物延伸而成的dna单链作模板时，此单链引物端为5端，因此与它互补的子链应从另一端开始合成，即与引物结合延伸dna的子链。关于pcr引物的说法中，不正确的是()a引物是pcr过程中与模板dna部分序列互补，并能引导模板dna的互补链合成的(脱氧)核苷酸序列b引物常根据需要扩增的目标dna的碱基序列用化学合成的方法获得cdna聚合酶只能使dna链从引物的3端开始向引物的5端延伸d引物的3端必须具有游离的oh基团解析：选c。引物结合在模板链的3端，dna聚合酶只能使dna链从引物的5端开始向引物的3端延伸。(2012周口高二检测)pcr技术是一种dna的扩增技术，操作步骤简介如下：第一步：准备反应式溶液和模块dna。a配制聚合酶链式反应溶液：配方：按如下比例进行配制：蒸馏水100、缓冲溶液15、氯化镁溶液8、引物13、引物23、dna聚合酶、矿物油1(防止聚合酶在冻结时受伤害)；datp、dgtp、dctp、dttp每一种各加5。b准备要拷贝的dna：提取准备要拷贝的dna(如可以用一牙签轻刮口腔内壁，将牙签放入蒸馏水中摇动。加热蒸馏水沸腾，使细胞破碎放出dna。用离心机离心后，去除蒸馏水中较大的细胞碎片。这时上清液中就有了较纯的dna。)第二步：聚合酶链式反应。将要拷贝的dna“b”放入反应液“a”中。水浴加热。首先，94 ，使dna双螺旋解旋，历时1 min；然后，56 ，使引物结合到dna上，历时90 s；最后，72 ，用聚合酶使dna拷贝，历时90 s。重复步骤。每重复一次，即完成一次拷贝。分析回答下列问题：(1)以上材料可以说明()adna的复制必须在活细胞内才能完成bdna能指导蛋白质的合成c在合适的条件下，非细胞环境也能进行dna复制dpcr技术是一种无性生殖技术(2)为什么要加入两种引物。_。引物的作用是什么？_。(3)pcr技术中用到的dna聚合酶，取自生长在温泉中的一种细菌，就pcr技术来讲，你认为使用这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的dna聚合酶的优势是_。解析：在pcr技术中，催化合成dna子链的dna聚合酶的活性是扩增的关键因素之一。最初，pcr反应用的是ecoli dna聚合酶，但这种酶在94 双链dna解旋时被破坏，因此每个循环都要重新加酶，造成操作繁琐、反应低效及费用增加。后来发现温泉中的细菌dna聚合酶能在高温下很好地工作，这个发现推动了pcr的发展。水生栖热菌(thermos aquatics，taq)生活在75 的温泉中，它的dna聚合酶(taq聚合酶)的最适温度是72 ，并且在94 相当稳定，这种酶在95 下半衰期长达38 min。taq聚合酶只需要在反应开始时加一次就能在整个扩增循环中保持活性，这样，就可通过编程控制pcr循环仪的反应温度和反应时间，使pcr完全自动化。答案：(1)c(2)dna分子两条链是呈反向平行的，dna聚合酶不能从头合成dna分子，只能从3端到5端延伸，而引物也是一段核苷酸序列，与dna分子双链中的一条链互补引导dna分子的复制(3)较高温下不会变性失活pcr是一种选择性体外扩增dna片段的方法。其特异性是由两个人工合成的引物序列决定的。所谓引物就是与待扩增dna片段两翼互补的寡聚核苷酸。待扩增dna模板加热变性后，两引物分别与两条dna的两翼序列退火。此时，两引物的3端相对，5相背。在合适的条件下，由dna聚合酶催化引物引导dna合成，即引物的延伸。上述过程是由温度控制。这种热变性退火延伸的过程就是一个pcr循环。pcr就是在合适条件下的这种循环的不断重复。理论上扩增产物量呈指数上升，即n个循环后，产量为2n个。根据上述文字回答下列问题：(1)pcr扩增时加入的物质有：_、_、_、_、_、_。(2)pcr扩增的过程包括_个反应步骤，即_、_、_。(3)“上述过程是由温度控制”，你对这句话的理解是_。解析：进行pcr扩增时向离心管中加入的物质包括：引物、反应物(4种脱氧核苷酸：datp、dgtp、dctp、dttp)、taq聚合酶、模板dna、mg2、反应缓冲液。pcr扩增具体的过程包括3个反应步骤，即变性、退火和延伸。在这一过程中通过控制温度实现扩增的自动化，其中变性温度为94 ，退火为4060 ，延伸为72 。答案：(1)引物 反应物 taq聚合酶 模板dna mg2反应缓冲液 (2)3 变性 退火 延伸(3)变性温度为94 ，退火为4060 ，延伸为72 (2012新乡高二质检)在遗传病及刑侦破案中常需要对样品dna进行分析，pcr技术能快速扩增dna片段，在几个小时内复制出上百万份的dna拷贝，有效地解决了因为样品中dna含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题：_(1)在相应的横线上写出引物，并在复制这一步骤中将引物置于合适的位置。(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的dna分子。(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32p标记，请分析循环一次后生成的dna分子的特点：_，循环n次后生成的dna分子中不含放射性的单链占总单链的比例为_。(4)pcr反应过程的前提条件是_，pcr技术利用dna的_原理解决了这个问题。(5)在对样品dna进行分析的过程中发现，dna掺杂着一些组蛋白，要去除这些组蛋白可加入的物质是_。解析：(1)dna聚合酶不能从头开始合成dna，只能从3端延伸dna链，所以引物就提供了3端，子链延伸方向为53，引物与b链部分碱基互补，引物则与a链部分碱基互补，且连接到a链的3端，故引物的结构为5gaoh，复制结果为：5ggtc3 hoag5(2)经过一次循环后，产生的两个dna分子分别含有引物和引物。(3)由于作为原料的四种脱氧核苷酸被32p标记，所以新合成的子链均含有放射性，一次循环后的两个dna各有一条链含32p，若复制n次，共产生子链2n2，其中只有dna母链不含32p，则其所占比例为2/(2n2)。(4)dna