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壳聚糖处理含生物碱类成分中药浸提液应用研究更新日期：2010-08-15 点击： 王曙东宋炳生李汉宝谢虞陶建生 提要探讨壳聚糖作为澄清剂对主含生物碱类成分中药浸提液的影响，并与水煎液、醇沉液作比较。结果表明：大部分中药都可达到澄清目的，淀粉含量高者澄清效果较差，沉淀除去大部分淀粉后仍有一定的澄清范围，达到澄清所需要的澄清剂量与生药量有关，而与药液体积关系不大，澄清效果与中药的药用部位及药物所含生物碱的类型无关。TLC定性表明，在实验所采用的展开条件下，壳聚糖沉淀法、醇沉法与水煎液样品的成分基本相似。 关键词壳聚糖澄清剂；生物碱；薄层色谱法 絮凝澄清剂壳聚糖在中药浸提液精制中的应用已有一些报道1，指标成分含量无明显变化或略低于醇沉法2，3，原儿茶醛及多糖有一定增加4。然而用壳聚糖作为澄清剂对中药浸提液的精制尚缺乏系统、全面的探讨。生物碱无论从数量上或生物活性方面看，都是一类存在于中药中的重要化学成分，故本文选择30味主含生物碱类成分中药以考察壳聚糖对中药浸提液的澄清效果，涉及不同的药用部位，以观察不同成分、不同质地药材的澄清效果与范围，从中选择8味中药进行TLC对比实验，定性观察壳聚糖对中药化学成分的影响。 1材料与仪器 1.1药材：黄连、黄柏、麻黄、益母草、马钱子、升麻、苦参、草乌、山豆根、川牛膝、石斛、白鲜皮、半边莲、半枝莲、百部、百合、北沙参、元胡、粉防己、吴茱萸、附子、青木香、青蒿、荜拨、钩藤、秦艽、浙贝母、龙胆草、续断、莶草，均购于上海徐汇饮片厂，并经鉴定符合中国药典1995版有关标准。 1.2对照品：士的宁、马钱子碱、盐酸小檗碱、盐酸麻黄碱、盐酸水苏碱，均购于中国药品生物制品检定所。 1.3试剂：壳聚糖购于华东理工大学华凯科技贸易公司，用1%醋酸配成1%溶液后使用；硅胶板购于青岛海洋化工厂；其余试剂均为分析纯。 1.4仪器：海鸥照相机DF-1，为上海照相机厂产品。 2中药浸提液澄清效果考察 2.1实验条件的选择：实验在室温条件下，从药液浓度、壳聚糖加入量、放置时间三个方面考察壳聚糖对中药浸提液的澄清效果。 2.1.1药液浓度：按生药克数与药液毫升数比确定4个不同药液浓度。21(2 g生药比1 ml药液)，11(1 g生药比1 ml药液)，12(1 g生药2 ml药液)，14(1 g生药比4 ml药液。) 2.1.2壳聚糖加入量：按药液毫升数的2%、4%、6%、8%、10%、20%、40%、60%、80%、100%等10个梯度加入。 2.1.3放置时间(h)：从0.5 h、1.5 h、3.0 h、6.0 h、12.0 h、24.0 h等6个时间段来观察澄清效果。 2.1.4澄清效果的确定：以肉眼观察药液浓度澄清为“”，混浊为“”。 2.2实验方法：分别取每种中药200 g，加水煎煮2次，第1次加10倍量水，煎煮1 h；第2次加8倍量水，煎煮40 min，合并两次煎液，浓缩至21、11、12、14四个浓度梯度，按1995版中国药典1部附录中所载方法测定 pH值、相对密度。每种浓度取2 ml各10份，分别加入不同的壳聚糖溶液量，从0.5 h到24.0 h分6个时间段观察澄清效果。部分结果见表1。 表1中药浸提液澄清效果考察 药材 不同壳聚糖加入量的澄清效果 pH d 相对密度 2% 4% 6% 8% 10% 20% 40% 60% 80% 100% 山豆根 5.08 1.0112 川牛膝 5.07 1.0227 马钱子 6.26 1.0026 升麻 5.32 1.0111 石斛 6.72 1.0054 白鲜皮 6.64 1.0197 半边莲 5.34 1.0172 半枝莲 5.58 1.0123 百部 4.84 1.0253 百合 3.84 1.0115 北沙参 5.32 1.0119 延胡索 5.38 1.0086 粉防己 4.48 1.0091 吴茱萸 4.98 1.0232 附子 4.70 1.0042 青木香 5.44 1.0065 青蒿 5.18 1.0083 苦参 4.82 1.0084 荜拨 5.60 1.0062 草乌 4.82 1.0087 钩藤 4.70 1.0062 秦艽 4.46 1.0178 浙贝母 4.46 1.0072 益母草 5.84 1.0146 黄连 5.30 1.0096 黄柏 5.12 1.0075 麻黄 5.18 1.0119 龙胆草 4.48 1.0176 续断 5.88 1.0129 莶草 5.96 1.0069 注：生药药液体积为14(gml) 观察时间为6.0 h 3TLC定性比较 从前述30味中药中挑选8味中药煎煮浸提后分别采用壳聚糖、醇沉处理并进行TLC比较，考察壳聚糖对中药浸提液中化学成分的影响。 3.1样品的制备 3.1.1水煎液样品：取中药浸提液(11)2 ml，水浴挥干，备用。 3.1.240%醇沉样品：取中药浸提液(11)2 ml，加入乙醇使含醇量达40%，放置24 h，过滤，滤液水浴挥干，备用。 3.1.31%壳聚糖澄清样品：取中药浸提液(11)2 ml，加入一定量的澄清剂，放置24 h，过滤，滤液水浴挥干，备用。 3.2样品处理及TLC图谱比较：取各样品粉末分别加入有机溶剂后，超声提取10 min，得供试液，按1995版中国药典1部及中药材薄层色谱鉴别相应方法，选择层析条件点样，展开，显色或置u灯下，拍照。结果见图1。 4讨论 4.1从表中可知：大部分中药都可达到澄清目的，并有其一定的澄清范围，淀粉含量高者澄清效果不佳，其中粉防己、浙贝母、百合在所选范围内药液混浊；浙贝母、百合沉淀除去大部分淀粉后有其一定的澄清范围。达到澄清所需要的澄