活血止痛膏制备及质量标准.doc

活血止痛膏制备及质量标准活血止痛膏制备及质量标准更新日期：2010-07-09 点击： 李俊松章仲懿 活血止痛膏是我院骨伤科使用多年的外用制剂，具有活血化瘀、消肿止痛的功效，方中有虎杖、黄柏等药组成，经水和不同浓度的醇分别提取后加入适当基质和透皮吸收促进剂制成的外用膏剂。我们对其制剂及质量标准进行了研究：分别对虎杖、黄柏进行定性鉴别，并对方中君药-虎杖中的主要成分-总蒽醌进行了定量测定。 1仪器设备及药材和试剂 紫外可见分光光度计TV-1201(北京通用仪器设备公司)，药材(购于南京市药材公司)，大黄素对照品(卫生部药品生物制品检定所)，超声提取器TS0.5/20型(清华大学风光仪器厂制)。 2制备工艺 取刘寄奴、黄柏、虎杖等分别用6倍量的95%和80%乙醇回流提取各1次，2 h/次，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味得稠膏。残渣加6倍量水煎煮2次，2 h/次，滤过，合并滤液浓缩至稠膏(波美1.301.35；25)。余药粉碎过100目筛。取上述稠膏(、)及饴糖(95；波美1.321.34)，甘油、氮酮、苯甲酸钠等混合，挥去部分水分，得稠膏(95，波美度1.301.32)趁热加入上述药粉混匀，于60左右涂布，切制，包装。 3定性鉴别试验 3.1取本品4 g，加甲醇50 ml，超声提取20 min，滤过，取滤液20 ml于蒸发皿中蒸干，用乙醚10 ml溶解，必要时过滤，滤液加NH4OH试液。结果水层显红色(虎杖)；空白对照无干扰。 3.2取上述提取液20 ml，浓缩至5 ml作为供试品液；另取黄柏对照药材0.2 g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，制成每1 ml甲醇液中含0.5 mg溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法项下试验，吸取上述3种溶液4 l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯乙酸乙酯甲醇异丙醇浓氨试液(631.51.50.5)为展开剂，置氨气饱和的层析缸内，展开，取出晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视，在与对照药材色谱的位置上，有相同的两个黄色荧光斑点；在与对照品色谱的相应位置上，显相同的一个黄色荧光斑点(黄柏)，空白对照无干扰(见图1)。 4含量测定 4.1实验条件的选择 4.1.1紫外光谱的测定及测定波长的选择：将除去虎杖外的处方中其余药及基质等制成空白制剂，按下述供品溶液制备法，制备成空白对照溶液；供试品液制备按下述供试品溶液制备项下，分别测定其紫外光谱图(见图2)。 实验证明，样品的最大吸收波长为519522 nm，大黄素在520 nm处有最大吸收1，故选用520 nm为测定波长，空白溶液在520 nm处的吸收值为供试品的4.01%，说明本处方中虎杖以外的药材和基质对本实验的干扰小。 4.1.2对照品碱性溶液稳定性考察：大黄素于碱后，放置1、2、4、6 h测定，数值基本相同，供试品溶液亦基本相同。见表1。 表1稳定性试验( A值) 样品 A RSD (%) 1 h 2 h 4 h 6 h 供试品 0.194 0.194 0.193 0.193 0.30 对照品 0.358 0.359 0.357 0.357 0.27 4.2标准曲线的绘制：精密称取大黄素对照品10 mg，于100 ml量瓶中，加无水乙醇使溶解，并稀释至刻度、摇匀制成标准溶液。分别精密量取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 ml标准溶液于50 ml量瓶中，水浴蒸干，加混合碱液(5%的NaOH液和2% NH3*H2O溶液等量混合)使溶解，并稀释至刻度，在暗处避光放置1 h，以混合碱液为空白对照，于520 nm处测定吸收值，绘制标准曲线。结果显示，大黄素在2.06016.48 g/ml间呈线性关系，回归方程为： A=7.07310-4+29.090 C， =0.9999。浓度单位：mg/ml。 4.3活血止痛膏供试品的制备：精密称取药品6 g，加甲醇90 ml于容量瓶中，超声提取30 min，放冷至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液10 ml，置100 ml圆底烧瓶中，挥去甲醇，加2.5 mol/L硫酸液20 ml，置沸水浴中加热回流1 h，放冷，加氯仿30 ml，回流2 h，冷却，移置分液漏斗中，用少量氯仿洗涤容器，并入分液漏斗中，分取氯仿层，置50 ml量瓶中，酸液用氯仿萃取2次，8 ml/次，氯仿层并入50 ml量瓶中，加氯仿定容，精密量取氯仿液10 ml于50 ml容量瓶中，水浴蒸干，加混合碱液使溶解，并稀释至刻度、过滤、滤液在暗处避光放置1 h，为供试品溶液。 4.4总蒽醌的测定：分别取供试品溶液和对照品溶液，以混合碱液为空白，于520 nm处测定。结果见表2。 表2每张跌打损伤膏中总蒽醌的测定 (mg， n=3) 测定项 样品1 样品2 样品3 样品4 总蒽醌含量 5.5080 5.4381 5.3552 5.5640 4.4回收率试验：采用加样回收法试验，取已知含量的活血止痛膏3 g，分别加入大黄素对照品，按上述试验方法提取、测定。结果见表3。 表3虎杖中总蒽醌的回收率 ( n=3) 加入量 (mg) 测得量 (mg) 回收率 (%) 平均回收率 (%) RSD (%) 2.150 2.152 100.1 2.365 2.341 99.0 99.25 0.73 2.570 2.557 99.5 1.935 1.904 98.4 5讨论 本制剂克服了原制剂(外用散剂用饴糖调和后敷)用量随意，涂布后易干裂，敷贴后易从纱布后流出等缺点，具有剂量固定，易于病人贴敷，易于保存等特点。且应用透皮促渗剂后增强了原药的临床疗效。 虎杖、黄柏分别是处方中的主要药物。我们对虎杖中的蒽醌、黄柏中的小檗碱作为处方定性鉴别指标，专属性强，重现性好。 用紫外分光光度法对虎杖中的