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第3讲 植物组织培养、dna技术及植物有效成分的提取一、选择题。1(2015年江苏)图1、2分别为“dna的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图,下列叙述不正确的是()图1图2a图1、2中加入蒸馏水稀释的目的相同b图1中完成过滤之后保留滤液c图2中完成过滤之后弃去滤液d在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质【答案】a【解析】图1中加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破,图2中加入蒸馏水的目的是调节nacl溶液的浓度,使dna析出;图1中含有dna的核物质位于滤液中,因此完成过滤后应保留滤液;图2中析出的dna在纱布上,因此完成过滤后应弃去滤液;嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,能催化杂质蛋白分解。2(2014年江苏)下列关于“dna的粗提取与鉴定”实验叙述,错误的是()a酵母和菜花均可作为提取dna的材料bdna既溶于2 mol/l nacl溶液也溶于蒸馏水c向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物ddna溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝【答案】c【解析】理论上只要含dna的生物材料都可以作为提取dna的材料,只是从操作难易程度上分,最好选择容易操作的,所以酵母和菜花可作为提取dna的材料,a正确;dna在2 mol/l nacl溶液和蒸馏水中都能溶解,只不过溶解度不同,b正确;向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,鸡血细胞会破裂,dna在蒸馏水中溶解度较大,不会析出,c错误;dna溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝,d正确。3(2011年广东)以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的是()a洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂b猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少c血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测d在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢【答案】d【解析】凝胶色谱法分离蛋白质过程中,分子量较小的蛋白质易进入凝胶内部,移动速度比较慢,故血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动快,d错误。二、非选择题。4(2015年新课标)回答与胡萝卜素有关的问题:(1)胡萝卜含有的胡萝卜素中,最主要的是_(填“胡萝卜素”、“胡萝卜素”或“胡萝卜素”),该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子_,后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症,该疾病称为_,胡萝卜素是_(填“挥发性”或“非挥发性”)物质。(2)工业生产上,用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时,_(填“需要”或“不需要”)将新鲜的岩藻干燥。(3)现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂,应选用其中的_作为胡萝卜素的萃取剂,不选用另外一种的理由是_。【答案】(1)胡萝卜素维生素a夜盲症非挥发性(2)需要(3)乙酸乙酯萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶,而乙醇为水溶性有机溶剂【解析】(1)胡萝卜含有的胡萝卜素有三类,其中最主要的是胡萝卜素,胡萝卜素在人体内可以转变成维生素a,维生素a缺乏会导致夜盲症。胡萝卜素是非挥发性物质。(2)胡萝卜素的提取一般采用萃取法,萃取前需要对材料进行干燥处理,以提高萃取的效率。(3)萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有很高的沸点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水混溶,如乙酸乙酯。乙醇是水溶性有机溶剂,因萃取过程中能与水混溶而影响萃取效果,所以不选用它作萃取剂。5(2014年江苏)为了获得胡萝卜素产品,某小组开展了产胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题:(1)实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是_;为了减少灭菌后器皿被污染,灭菌前应该_。(2)为了筛选出酵母菌,培养基中添加了青霉素,其目的是_。(3)如图是灭菌锅及其局部剖面示意图,图中甲、乙、丙指示的依次是_。(填序号)安全阀、放气阀、压力表放气阀、安全阀、压力表安全阀、放气阀、温度表放气阀、安全阀、温度表(4)为了将分离到的菌株纯化,挑取了菌落在3块相同平板上划线,结果其中一个平板的各划线区均未见菌生长,最可能的原因是_。(5)为增加胡萝卜素提取量,在研磨酵母细胞时,添加石英砂的目的是_;研磨时_(填“需要”或“不需要”)添加caco3,理由是_。【答案】(1)干热灭菌和湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)用牛皮纸(报纸)包扎器皿(2)抑制细菌(放线菌)生长(3)(4)接种环温度过高,菌被杀死(5)有助于研磨充分不需要胡萝卜素较耐酸【解析】(1)微生物培养时常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌等,培养皿常用高压蒸汽灭菌、干热灭菌。将培养皿放入灭菌锅之前通常用牛皮纸或报纸包扎避免灭菌后的再次污染。(2)青霉素能破坏细菌的细胞壁并能抑制细菌的繁殖,因此添加青霉素可抑制细菌的生长。(3)乙连接软管为排(放)气阀,甲为安全阀,丙是压力表。(4)三个平板有两个平板长有菌落,说明含有菌株并可在培养基上生长;而其中一个未见菌落,说明菌株死亡,因此,应是在接种过程中接种环灼烧后未足够冷却便开始划线,使菌株因温度过高被杀死。(5)石英砂有助于研磨充分。caco3用于中和酸性物质,胡萝卜素较耐酸,因此不需添加。6(2013山东)胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得,流程如下:(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌r时,可选用_或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环,其目的是_。(2)培养酵母菌r时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌r的生长提供_和_。(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好温度和_以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用_方式加热以防止温度过高;萃取液浓缩前需进行过滤,其目的是_。(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素,鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为_。【答案】(1)稀释涂布平板法灭菌(或防止杂菌污染)(2)碳源氮源(3)时间水浴滤去不溶物(4)(实验)对照【解析】(1)微生物分离和培养中常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。微生物培养需要无菌操作,其中对接种环需进行灼烧灭菌处理。(2)蔗糖和硝酸盐可分别为微生物的生长提供碳源和氮源。(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程中若温度过高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解;萃取过程应避免明火加热,宜采用水浴方式加热,以防止温度过高;萃取液在浓缩之前,还要进行过滤,以除去萃取液中的不溶物。(4)利用纸层析法鉴定所提取的胡萝卜素时,需用胡萝卜素标准样品作对照,对比分析标准样品和萃取样品出现的层析带。7(2012年新课标)为了探究6ba和iaa对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响,某研究小组在ms培养基中加入6ba和iaa,配制成四种培养基(见下表),灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体,在适宜条件下培养一段时间后,统计再生丛芽外植体的比率(m),以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n),结果如下表。培养基编号浓度/(mgl1)m/%n/个6baiaa10.5076.73.120.177.46.130.266.75.340.560.05.0回答下列问题:(1)按照植物的需求量,培养基中无机盐的元素可分为_和_两类。上述培养基中,6ba属于_类生长调节剂。(2)在该实验中,自变量是_,因变量是_,自变量的取值范围是_。(3)从实验结果可知,诱导丛芽总数最少的培养基是_号培养基。(4)为了诱导该菊花试管苗生根,培养基中一般不加入_(填“6ba”或“iaa”)。【答案】(1)大量元素微量元素细胞分裂素(2)iaa浓度再生丛芽外植体的比率(m)和再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n)00.5 mgl1(3)1(4)6ba【解析】本题考查植物组织培养的相关知识。(1)植物组织培养常用ms培养基,其中,无机盐的元素可分为大量元素和微量元素两类,前者如n、p、k、ca、mg、s等,后者如b、mn、cu、zn、fe、mo等。ms培养基中还常需要添加能诱导细胞分裂、脱分化、再分化的生长素和细胞分裂素,常用的生长素有2,4d、iaa、naa等,常用的细胞分裂素有6ba、kt等。(2)该实验中,各组6ba浓度均为0.5 mg/l,iaa的浓度

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