离子色谱法检测药品处方中的柠檬酸盐和磷酸盐.doc

离子色谱法检测药品处方中的柠檬酸盐和磷酸盐董瑞山东省产品质量监督检验研究院，山东，250103摘要：本文建立了一种采用离子色谱法，抑制型电导检测器测定药品处方中的柠檬酸盐和磷酸盐的方法。选择的色谱条件为:IonPac AS11阴离子交换柱，20mM氢氧化钾等度淋洗，抑制型电导检测。该方法定量限约为0.2 mg/L，线形相关系数r2均大于等于0.9990，柠檬酸小于1 %，磷酸盐精密度小于0.5 %，回收率在95 %105 %，具有灵敏度高，选择性好，操作简单，等特点。 关键词：离子色谱；柠檬酸；磷酸；AS11色谱柱 柠檬酸是药品处方中的常见组分。在制药学中，柠檬酸最常用于抗酸剂和牙膏中，与碳酸盐或碳酸氢盐共同作用产生兴奋效应。柠檬酸也广泛作为香料和稳定剂应用于制药学制剂中，来屏蔽药的味道。柠檬酸还可以作为缓冲试剂，或通过促进悬浮液的传播来维持活跃组分的稳定性，并且增强抗氧化效力。另外还可以利用它防止血液流失的效果，作为抗凝血剂和灌肠剂使用。中国色谱网针对柠檬酸不同的药剂形态，采用一些不同的方法进行检测。这些分析技术包括：热量计，比重计，离子交换色谱法和反相液相色谱法。检测方法的变更，是应检测某一特定形态药剂而对不同技术的需求产生的。方法的变更带来了不同的显色试剂，淋洗液，色谱柱和检测器的使用。/Shop/Product/Product_621085.shtml我们已经可以通过使用离子交换色谱、离子排斥色谱和反相液相色谱方法，将柠檬酸从药剂和生物体等各种广阔样本试剂中分离出来。尽管在报道中针对此类分离最常见的检测方法是间接紫外吸收检测法，然而电导检测法和示差检测法也常常被应用。使用反相液相色谱对柠檬酸盐进行分离时，需要淋洗液有很低的pH值，以促进柠檬酸的离子化。此外，除非添加有机改良剂，否则在使用离子排斥色谱进行柠檬酸的分离时，保留时间往往很长。柠檬酸盐的紫外吸收不好，所以在进行间接紫外检测时，必须在淋洗液中加入强紫外吸收的显色基团。Chalgari和Tan描述了采用带有间接分光检测器的离子色谱，对美国药典专著记载的一些药剂中的柠檬酸盐进行了分析。在这个方法中，他们使用具有强紫外吸收的Trimesic Acid作为淋洗液，在280nm处以负峰的形式对柠檬酸盐进行了检测。然而在此方法中，为了获得恒定的保留时间，需要使用NaOH对淋洗液的pH值进行准确调节。当pH值比较低时（pH 3.2-4.5），柠檬酸的保留时间随着其离子化程度降低而降低；反之，在pH值相对较高的区间（pH 4.5-6.0），柠檬酸的保留时间因其离子化程度高而增长。 采用带有抑制型电导检测器的离子色谱法检测柠檬酸盐，是一个不错的选择。通过此方法还可以同时检测出药剂中的磷酸盐和其他阴离子，而且也无需昂贵的试剂，同时省去了繁冗的调节pH值的过程。脂肪族羧酸，譬如柠檬酸，都对阴离子交换固定相有很强的附着能力。因此，离子强度比较低的碳酸盐和碳酸氢盐不适合做为淋洗液使用。当使用氢氧化物作淋洗液时，柠檬酸很容易从色谱柱上洗脱下来。 在此方法中，我们使用淋洗液在线发生器自动生成等浓度KOH，通过IonPac AS11色谱柱，在10分钟内使磷酸盐和柠檬酸盐得到很好的分离。 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 ICS-2000无化学试剂离子色谱系统（RFIC），Chromeleon 6.5 色谱工作站。去离子水（试剂纯），电导率不低于18M-cm；柠檬酸（USP，目录号1134368）；水合磷酸二氢钠（NaH2PO4H2O）（EM Science）；二水合氯化钙，CaCl22H2O (Fisher Scientific)；无水乙酸钠（Fluka Chemical Co.）；氯化钠（J.T. Baker）；六水合氯化镁，MgCl26H2O (Sigma-Aldrich)；二水合柠檬酸钠 （Sigma-Aldrich）；氯化钾（Sigma-Aldrich）；氢氧化钠，50 % （J.T. Baker） 1.2 色谱条件 分离柱：Dionex IonPac AS111分离柱和IonPac AG11保护柱，20mM氢氧化钾等度淋洗，AMMS III阴离子抑制器，自循环模式，抑制电流100 mA。淋洗液流速为2.0 mL/min，进样体积为10 L。/product.asp?action=search1.3 样品前处理 将约100 mg剂量的柠檬酸（粉状）加入到300毫升热的（80）去离子水中，保持温度在70-80并磁力搅拌约30分钟。将溶液冷却并且在500-mL容量瓶中定容至刻度线，得到样品储备液。用AS11分离A和B样品中的磷酸和柠檬酸2 结论: 使用包含有对氢氧化物有选择性的低柱容阴离子交换色谱柱，和抑制型电导检测器的离子色谱方法，可以对不同药剂中磷酸盐和柠檬酸盐进行高效迅速的分离。此方法满足了美国药典对磷酸盐和柠檬酸盐分离方法中特异性、线性、精密性和标准添加回收率的各项要求。美国药典专著中，现存九种方法对18种药剂样品中