分子生物学复习提纲.doc

分子生物学复习提纲名解：10*5=50论述：5*10=50名解：1. Genomics 基因组学：基因组是细胞中一套完整单体遗传物质的总和。对细菌和噬菌体而言，基因组是指单个染色体上所含的全部基因，而二倍体真核生物的基因组则是指维持配子或配子体正常功能的最基本的一套染色体及其所携带的全部基因。2. proteomics 蛋白质组学：是指对在一定时间内或某一特定的环境条件下，细胞、组织或有机体内所表达的所有蛋白质（即蛋白质组），进行系统的、总的研究的一门学科。是以动态的方式，研究那些可表达的基因组部分。3. Gene chip 基因芯片：基因芯片的测序原理是杂交测序方法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法，基因芯片又称为DNA微阵列。可分为三种主要类型：1）固定在聚合物基片表面上的核酸探针或cDNA片段，通常用同位素标记的靶基因与其杂交，通过放射显影技术进行检测2）用点样法固定在玻璃板上的DNA探针阵列，通过与荧光标记的靶基因杂交进行检测3）在玻璃等硬质表面上直接合成的寡核苷酸探针阵列,与荧光标记的靶基因杂交进行检测4. Genetic Diagnosis 基因诊断：是以DNA和RNA为诊断材料,通过检查基因的存在、缺陷或表达异常,对人体状态和疾病作出诊断的方法。其基本原理是检测DNA或RNA的结构变化与否、量的多少及表达功能是否正常,以确定被检查者是否存在基因水平的异常变化,以此作为疾病确诊的依据。基因诊断不仅能对疾病作出早期确切诊断,而且也能确定个体对疾病的易感性及疾病的分期分型、疗效监测、预后判断等。它适用于遗传性疾病、感染性疾病、肿瘤和法医学等领域。5. Gene therapy 基因治疗：基因治疗是指将人的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或者发挥治疗作用，从而达到治疗疾病目的的生物医学新技术。基因治疗与常规治疗方法不同：一般意义上疾病的治疗针对的是因基因异常而导致的各种症状，而基因治疗针对的是疾病的根源-异常的基因本身。基因治疗有二种形式：一是体细胞基因治疗，正在广泛使用；二是生殖细胞基因治疗，因能引起遗传改变而受到限制6. Telomere 端粒：真核生物线性染色体末端的蛋白质-DNA片段所组成的一种特殊的结构，其功能是完成染色体末端的复制，防止染色体末端融合、重组或降解。大多数生物端粒的DNA片段是由非常短而且数目精确的串联重复DNA小片段排列而成，富含鸟嘌呤，从单细胞生物到高等动植物，端粒的结构和功能都很保守。7. Human genome project 人类基因组计划：是80年代在全球范围内广泛开展的一项研究计划。目标是全面而透彻地认识人类就基因组的正常结构、功能及基因的异常结构（变异）与人类疾病。对生命进行系统科学的解码，以了解和认识生命的起源，种间和个体间存在差异的起因，疾病产生机制以及长寿与衰老等生命现象。它包含两个部分，一是人类基因组DNA全部序列的测定，二是基因DNA序列的识别和正常功能，基因变异与人类疾病的研究。8. Ribozyme 核酶： 核酶（Ribozyme）具有催化功能的RNA分子。核酶能起催化作用的结构要求：槌头结构至少含有3 个茎，1至3个环和至少有13个一致性的碱基位点。同一分子上包括有催化部份和底物部份 。 核酶的发现对中心法则作了重要补充；核酶的发现 是对传统酶学的挑战；利用核酶的结构设计合成人工核酶 9. Antisense technology 反义技术：根据碱基互补原理，用人工合成或生物体合成的特定互补的反义寡核苷酸片段抑制或封闭目的（靶）基因表达的技术。包括反义RNA、反义DNA及核酶，最常用的为反义寡脱氧核苷酸（反义寡核苷酸），其优点在于其理论上的高度靶特异性（碱基互补）、设计容易、多样且合成简单及高度的局部性和针对性。10. Oncogene and Tumor Suppression Gene 癌基因，抑癌基因：癌基因是一类会引起细胞癌变的基因。其实，癌基因有其正常的生物学功能，主要是刺激细胞正常的生长，以满足细胞更新的要求。肿瘤抑制基因(tumor suppressor gene)又称抗癌基因，是指能够抑制细胞癌基因活性的一类基因，其功能是抑制细胞周期，阻止细胞数目增多以及促使细胞死亡。抑癌基因与癌基因之间的区别在于癌基因只要有一个等位基因发生突变时就可引起癌变，而抑癌基因只要有一个等位基因是野生型时，就可抑制癌变。11. Genemic libraries 基因组文库：基因组文库是通过机械剪切或限制性酶消化将某种生物的基因组切成一定大小的片段，然后与合适的载体（噬菌体载体或粘粒）连接，并导入宿主细胞中进行扩增，从而获得一群重组DNA克隆的混合物，其中包含了该生物的各种基因或基因组。原核生物和低等真核生物，由于基因结构简单，基因组文库可以作为直接提供目的基因的来源12. DNA library DNA文库：某一特定来源DNA通过细胞DNA克隆技术构建呈含有所用DNA片段的重组DNA分子，并转化至细菌内，构成DNA文库。依据DNA的来源不同，可分为，基因组DNA文库和cDNA文库。13. cDNA library cDNA 文库：将细胞总mRNA反转录成cDNA并获得克隆，由此得到的cDNA克隆群体便称为cDNA文库，它代表了某种生物的全部mRNA序列，即蛋白质编码信息14. gene targeting 打靶（敲除技术）：是人为的将实验动物某一种有功能基因使其完全缺失的技术。既可以用突变基因敲除相应的正常基因，也可以用正常的基因敲除相应的突变基因，由此使生物体的性状发生改变，观察试验动物的整体效应，从而推测相应基因的功能以及建立相关疾病治疗模型等。15. Probe 探针：化学及生物学意义上的探针(probe)，是指与特定的靶分子发生特异性相互作用，并可被特殊的方法探知的分子，核酸探针是指带有标记物的已知序列的核酸片段，它能和与其互补的核酸序列杂交，形成双链，所以可用于待测核酸样品中特定基因序列的检测。可将核酸探针分为基因组DNA探针、cDNA探针、RNA探针和人工合成的寡核苷酸探针等几类。16. Southern blot Southern印迹法: Southern印迹杂交的基本方法是将DNA标本用限制性内切酶消化后，经琼脂糖凝胶电泳分离各酶解片段，然后经碱变性，Tris缓冲液中和和高盐下通过毛吸作用将DNA从凝胶中转印至硝酸纤维素膜上、烘干固定后即可用于杂交。凝胶中DNA片段的相对位置在DNA片段转移到滤膜的过程中继续保持着，附着在滤膜上的DNA与32P标记的探针杂交，利用放射自显影术确立探针互补的每一条DNA带的位置，从而可以确定在众多消化产物中含某一特定序列的DNA片段的位置和大小。17. Western blot Western印迹法：其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。18. RNA editing 编辑：基因转录产生的mRNA分子中，由于核苷酸的缺失、插入或置换，基因转录物的序列不与基因编码序列互补，是翻译生成的蛋白质的氨基酸组成，不同于基因序列中的编码信息，这种现象称为RNA编辑。RNA编辑同基因的选择剪接或可变剪接一样，使得一个基因序列有可能产生几种不同的蛋白质。 19. RNAi RNA干扰: RNAi是由dsRNA介导的由特定酶参与的特异性基因沉默现象,它在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因的表达。具有核苷酸序列特异性的自我防御机制，是一种当外源基因导入或病毒入侵后，细胞中与转基因或入侵病毒RNA同源的基因发生共同基因沉默的现象。20. Northern blot Northern印迹法：在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳，继而按照同Southern Blot相同的原理进行转膜和用探针进行杂交检测。可检测样品中是否含有基因的转录产物（mRNA）及其含量。21. footprinting 足迹法：是一种用来测定DNA蛋白质专一性结合的方法。用于检测与特定蛋白质结合的DNA序列的部位，可展示蛋白质因子同特定DNA片段之间的结合区域。其原理为：DNA和蛋白质结合以后便不会被DNAase分解，在测序时便出现空白区（即蛋白质结合区），从而了解与蛋白质结合部位的核苷酸对数目。在用酶移出与蛋白质结合的DNA后，又可侧出被结合处DNA的序列。论述（金亮部分）：1 The general character of DNA replication 起始，终止Telomere replication 端粒复制Reverse transcription 逆转录病毒2. The three RNA polymerase characterization and function The general character of RNA