【创新设计】（山东专用）高考生物 专题2 细胞工程教学案 新人教版选修3(1).doc

第2讲克隆技术及生物技术的伦理问题2015备考最新考纲1植物的组织培养()。2.动物的细胞培养与体细胞克隆()。3.细胞融合与单克隆抗体()。4.生物技术中的伦理问题()。考点1植物细胞工程(5年8考)(2013课标卷、天津卷、江苏卷、重庆卷、课标卷)1细胞工程(1)操作水平：细胞水平或细胞器水平。(2)目的：按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品。2植物细胞的全能性(1)概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。(2)原因：细胞内含有本物种的全部遗传信息。(3)全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于离体状态，提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。3植物组织培养技术(1)原理：植物细胞具有全能性。(2)过程：4植物体细胞杂交技术观察植物体细胞杂交技术图示，完善相关问题(1)过程为去除细胞壁获得具有活力的原生质体，常用方法是酶解法，所用到的酶是纤维素酶和果胶酶。(2)过程是原生质体的融合，人工诱导的物理法包括离心、振动、电激等；化学法一般用聚乙二醇(peg)作诱导剂。(3)过程是原生质体融合后再生出细胞壁，这是原生质体融合成功的标志。(4)植物体细胞杂交的意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。5植物细胞工程的应用(2)作物新品种的培育：单倍体育种、突变体的利用。(3)细胞产物的工厂化生产：培养到愈伤组织阶段。思维激活判断正误(1)植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性()。(2)愈伤组织是外植体脱分化和再分化后形成的()。(3)幼嫩的组织脱分化较为容易，如茎尖、根尖、形成层细胞易脱分化，而植物的茎、叶和成熟的组织则较难()。(4)对外植体和接种用的每种器械都要彻底灭菌()。(5)脱分化形成愈伤组织的过程不需要光，再分化过程需要光，因为愈伤组织利用有机营养成分，而试管苗需要进行光合作用以自养()。(6)植物组织培养中不同培养阶段培养基含有的激素不同，因为培养的目的不同(生根或生芽)()。答案(1)(2)(3)(4)(5)(6)思考感悟植物组织培养的整个操作过程中，如何实现无菌环境？提示通过培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌)、外植体的消毒(酒精、氯化汞)、接种的无菌操作(酒精、酒精灯灼烧)、无菌箱中的培养、移栽到消过毒的环境中生存一段时间等操作实现无菌环境。植物组织培养技术1(2013重庆理综，5)某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉，其技术路线为“取材消毒愈伤组织培养出芽生根移栽”。下列有关叙述，错误的是()。a消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害b在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞c出芽是细胞再分化的结果，受基因选择性表达的调控d生根时，培养基通常应含萘乙酸等生长素类调节剂解析本题主要考查植物组织培养的相关知识。在愈伤组织中，因植物细胞含有细胞壁，阻碍了细胞融合，所以此时加入细胞融合的诱导剂，不能获得染色体加倍的细胞；消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害；愈伤组织出芽是细胞分化的结果，而细胞分化的实质是基因的选择性表达；生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，生根时，培养基通常含有萘乙酸等生长素调节剂。答案b题后归纳植物激素在组织培养中的作用在配制好的ms培养基中，常常需要添加植物激素其中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等，都会影响实验结果。(1)按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的实验结果。使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高(2)当同时使用这两类激素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。生长素与细胞分裂素的用量比值植物细胞的发育方向比值高有利于根的分化、抑制芽的形成比值低有利于芽的分化、抑制根的形成比值适中促进愈伤组织的形成植物体细胞杂交技术2(2013天津卷，9)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。据图回答下列问题：(1)过程所需的酶是_。(2)过程后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的_存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是_。原生质体经过_再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。(4)若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和_植株的根尖，通过_、_、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。(5)采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组dna进行pcr扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株14进行pcr扩增的结果。据图判断，再生植株14中一定是杂种植株的有_。(6)对杂种植株进行_接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。解析(1)过程是利用纤维素酶和果胶酶去除幼叶细胞和根细胞的细胞壁，制备相应原生质体；(2)过程在peg的作用下两个原生质体融合在一起，形成杂种细胞，来自幼叶的原生质体中有叶绿体存在，可以作为显微镜下初步筛选杂种细胞的标志；(3)原生质体及刚形成的杂种细胞因为没有了细胞壁的束缚作用，必须浸泡在适宜浓度且无毒害作用的等渗溶液中，以保持原生质体的完整性，原生质体经过细胞壁的再生后，才能进而分裂和脱分化形成愈伤组织。(4)若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和双亲植株的分生组织(如根尖)，通过解离、漂洗、染色和制片等过程制成装片，再在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。(5)识图可判断再生植株14中一定是杂种植株的有1、2、4；(6)对杂种植株进行黑腐病菌接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。答案(1)纤维素酶和果胶酶(2)叶绿体(3)保持原生质体完整性细胞壁(4)双亲(或花椰菜和黑芥)解离漂洗(5)1、2、4(6)黑腐病菌题后归纳植物组织培养和植物体细胞杂交的比较名称植物组织培养植物体细胞杂交原理细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性和细胞的全能性过程选材选取根尖、茎尖、形成层部位最容易诱导脱分化不同的植物细胞技术操作脱分化、再分化等除脱分化、再分化外，还要用酶解法去除细胞壁，用一定的方法诱导细胞融合关系植物组织培养是植物体细胞杂交的基础，植物体细胞杂交所用的技术更复杂考点2动物细胞工程(5年9考)(2013安徽卷、浙江卷、重庆卷、海南卷)1动物细胞培养过程：2动物细胞培养的条件(1)无菌、无毒：对培养液和所用培养用具无菌处理，添加抗生素；定期更换培养液以清除代谢产物。(2)营养：除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外通常还需加入血清血浆等天然成分。(3)适宜的温度和ph：温度为36.50.5_(哺乳动物)，ph为7.27.4。(4)气体环境95%空气5%co2(维持培养液的ph)3动物体细胞核移植及克隆技术引发的伦理问题(1)原理：动物细胞核具有全能性(2)核移植过程(以高产奶牛克隆为例)(3)克隆人的类型及其伦理问题类型治疗性克隆生殖性克隆区别目的治疗人类疾病用于生育，产生新个体水平细胞水平个体水平联系都属无性繁殖；产生新个体、新组织，遗传信息相同中国政府的态度中国政府的观点：不赞成，不允许，不支持，不接受任何生殖性克隆人的实验，不反对治疗性克隆4.单克隆抗体制备(1)诱导动物细胞融合的原理：细胞膜具有一定的流动性。(2)诱导动物细胞融合的方法：物理法离心、振动、电激等；化学法聚乙二醇；生物法灭活病毒。(3)单克隆抗体制备过程(4)单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高，可大量制备。(5)单克隆抗体的应用：作为诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物。5比较动物细胞培养、核移植与动物细胞融合比较动物细胞培养核移植动物细胞融合原理细胞增殖动物细胞核的全能性细胞膜的流动性过程结果相同分化程度的细胞群与供体基本相同的个体杂交细胞关键环节细胞增殖(分裂)、细胞癌变核融合、细胞分化人工诱导细胞膜融合应用生产生物制品基因工程检测有毒物质加速良种繁育保护濒危物种生产医用蛋白提供克隆器官、组织等获得杂种细胞，制备细胞产物如单克隆抗体思维激活判断正误(1)植物组织培养常用液体培养基，动物细胞培养常用固体培养基()。(2)具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞是生物克隆的重要条件之一()。(3)一般血清中的抗体是一群识别不同抗原部位的抗体混合物，单抗则识别抗原分子的特殊部位，具专一性()。(4)细胞克隆的基本要求是：必须保证分离出来的细胞是一个而不是多个()。(5)在培养瓶中要定期用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液()。(6)二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的()。(7)核移植过程中供体理论上是提供细胞核，但操作过程中可以把整个体细胞注入去核的卵母细胞中去()。答案(1)(2)(3)(4)(5)(6)(7)思考与填空仔细阅读图示及相关内容辨析并填充其含义从a、b到c的过程可以表示不同的含义(如图所示)：若a、b为动物细胞，则该过程表示细胞融合；若b为精子，a为卵细胞，则该过程表示受精；若a为除去细胞核的卵母细胞，b为细胞核，则该过程表示核移植。动物细胞培养技术1(2013浙江理综，6)实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如图所示。下列叙述错误的是()。a甲过程需要对实验小鼠进行消毒b乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化c丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型d丁过程得到的细胞具有异质性解析取小鼠皮肤组织进行培养时需对实验小鼠进行消毒；通过胰蛋白酶消化皮肤组织可获得皮肤细胞；丙过程为最初的传代培养，得到的细胞大多具有正常二倍体核型；来源于多个细胞的非克隆培养所得到的细胞系具有异质性，该实验小鼠皮肤细胞属于非克隆培养，丁过程得到的细胞具有异质性。答案c题后归纳(1)动物细胞培养时选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养的原因：幼龄动物组织或胚胎的细胞分化程度低，增殖能力很强，更易于培养。(2)在动物细胞培养过程中两次用到胰蛋白酶：第一次是将剪碎的组织分散成单个细胞；第二次是将贴壁细胞从瓶壁上分离下来，目的是避免动物细胞的接触抑制现象。(3)细胞贴壁和接触抑制悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。(4)原代培养与传代培养原代培养：细胞悬液第一次在瓶中培养，没有分瓶培养之前的细胞培养。传代培养：原代培养的细胞生长、繁殖一定时间后，由于空间不足或细胞密度过大导致营养枯竭，影响细胞的生长，因此需要重新用胰蛋白酶等处理，进行分瓶扩大培养，即传代培养。单克隆抗体的制备过程及选择培养基的制备2下图为反射弧中神经肌肉接头的结构及其生理变化示意图。(1)发生反射时，神经中枢产生的兴奋沿_神经传到突触前膜，导致突触小泡与前膜_，释放神经递质(ach)；ach与ach受体结合后，肌膜发生_，引起肌肉收缩。(2)重症肌无力是自身免疫病，其病因是患者免疫系统把ach受体当作抗原，使_被激活而增殖、分化，产生ach受体抗体。ach受体抗体与ach受体特异性结合，造成ach不能与ach受体正常结合，导致_信号转换过程受阻。(3)临床上治疗重症肌无力的重度患者，可采用胸腺切除法，目的是抑制_发育成t细胞，不能产生淋巴因子，从而抑制_免疫的应答。解析(1)分析题中的示意图，神经中枢产生的兴奋应沿传出神经传到突触前膜，使突触小泡与前膜融合并释放神经递质，电信号化学信号；ach与ach受体结合后，化学信号电信号，肌膜产生电位变化，进而引起肌肉收缩。(2)重症肌无力患者的b细胞，在ach受体(抗原)的刺激下增殖、分化，产生ach受体的抗体，其与肌膜上的ach受体结合，导致化学信号电信号的过程受阻。(3)切除胸腺可抑制造血干细胞发育成t细胞，造成淋巴因子缺乏，进而影响b细胞的增殖、分化过程，从而抑制了体液免疫的应答。答案(1)传出融合电位变化(2)b细胞化学信号向电(3)造血干细胞体液题后归纳(1)血清抗体与单克隆抗体名称产生特点血清抗体由浆细胞分泌一般从血清中分离，产量低、纯度低、特异性差单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌特异性强，灵敏度高，能大量制备(2)比较制备单克隆抗体过程中的几种细胞细胞特点浆细胞能产生单一抗体，但不能无限增殖骨髓瘤细胞能无限增殖，但不能产生抗体杂交瘤细胞即能产生单一抗体，又能在体外培养条件下无限增殖(3)单克隆抗体制备过程中两次筛选的比较项目第一次筛选第二次筛选筛选原因诱导融合后得到多种杂交细胞，另外还有未融合的细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞筛选方法用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“bb”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“b瘤”细胞)才能生长用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群筛选目的得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞(4)选择培养基的制备依据筛选目标，制备选择培养基时应“只让杂交瘤细胞”存活，其余细胞(包括未融合的b细胞，未融合的骨髓瘤细胞及融合的bb细胞，瘤瘤细胞)均不能存活。生物技术伦理问题3(2013南通中学调研)有关“治疗性克隆”的说法错误的是()。a可解决临床上供体器官不足和器官移植后免疫排斥问题b其核心技术是胚胎干细胞培养技术c胚胎干细胞可以克隆出不同组织细胞的根本原因是基因的选择性表达d中国政府既反对生殖性克隆人，也反对治疗性克隆解析用患者自身的胚胎干细胞克隆器官，可以克服供体器官不足，器官移植后又不会发生免疫排斥反应；治疗性克隆的核心是胚胎干细胞的培养；胚胎干细胞克隆出不同组织细胞属于细胞分化，细胞分化是基因的选择性表达；中国政府禁止生殖性克隆人，但不反对治疗性克隆。答案d题后反思(1)克隆技术形成重组细胞发育成一个新个体，体现了细胞核的全能性而非动物细胞的全能性。(2)克隆属于无性繁殖，产生新个体的性别、绝大多数性状与供核亲本一致。(3)核移植技术获得的动物与供核动物性状不完全相同：克隆动物绝大部分dna来自于供体细胞核，但其核外线粒体中的dna主要来自于受体卵细胞。性状是基因与环境共同作用的结果。供核动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同，其性状也不可能和供核动物完全相同。在个体发育过程中有可能发生基因突变，产生供核动物没有的性状。1(2013重庆理综，2)下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是 ()。a是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应t淋巴细胞b中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成c同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性d是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群解析本题主要考查单克隆抗体制备的相关知识。是从已免疫的小鼠脾脏中获得的浆细胞；中使用聚乙二醇或灭活的病毒等，有利于杂交瘤细胞的形成；同时具有浆细胞和骨髓瘤细胞的特性；是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群。故d项正确。答案d2(2013全国课标卷，40)甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分a，乙含有效成分b。某研究小组拟培育同时含有a和b的新型药用植物。回答下列问题：(1)为了培育该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用_酶和_酶去除细胞壁，获得具有活力的_，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成_组织，然后经过_形成完整的杂种植株。这种培育技术称为_。(2)上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指_。假设甲与乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是_。(3)这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的_等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。解析(1)该新型药用植物是通过植物体细胞杂交技术获得的。要获得有活力的原生质体才能进行体细胞杂交，因此首先用纤维素酶和果胶酶去掉植物的细胞壁，然后用peg化学诱导剂(物理方法：离心、振动等)诱导二者的原生质体融合。然后采用植物组织培养技术获得杂种植株，植物组织培养的主要过程是：先脱分化形成愈伤组织，然后再分化形成植物体，利用了植物细胞的全能性。(2)如果植物甲、乙是两个物种，二者不能通过有性杂交产生可育后代，原因是甲、乙有性杂交所产生的后代在减数分裂过程中同源染色体联会异常，也就是存在着生殖隔离。但植物甲、乙通过植物体细胞杂交技术产生的后代却是可育的，因为在减数分裂过程中同源染色体能完成正常的联会，产生正常的配子。由于甲、乙都是二倍体，因此，植物体细胞杂交得到的后代是异源多倍体(四倍体)。(3)人工种子生产不受气候、季节和地域等因素限制，而且可以避免后代发生性状分离等优点，因此，植物细胞工程重要的应用之一是制备人工种子，用到的核心技术是植物组织培养技术。将植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽、腋芽等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。答案(1)纤维素果胶原生质体愈伤再分化(分化)植物体细胞杂交技术(2)体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体在减数分裂过程中，前者同源染色体联会异常，而后者同源染色体联会正常(3)胚状体、不定芽、顶芽、腋芽3(2013安徽理综，29)近年来，有关肿瘤细胞特定分子的靶向治疗研究进展迅速。研究发现，蛋白x是细胞膜上的一种受体，由原癌基因x编码。在一些肿瘤细胞中，原癌基因x过量表达会持续激活细胞内的信号传导，启动细胞dna的复制，导致细胞异常增殖，利用动物细胞融合技术制备的单克隆抗体，可用于诊断和治疗原癌基因x过量表达的肿瘤。请回答下列问题。(1)同一个体各种体细胞来源于受精卵的分裂与分化。正常情况下，体细胞核遗传信息相同的原因是_。(2)通过检测原癌基因x的_和_可判断其是否转录和翻译。检测成人多种正常组织后，发现原癌基因x只在乳腺、呼吸道等上皮细胞中有微弱表达，这说明_。(3)根据以上信息，可推测原癌基因的主要功能是_。(4)制备该单克隆抗体时，免疫动物的抗原可以是_。b淋巴细胞识别抗原并与之结合，之后在适当的信号作用下增殖分化为_和_。(5)用该单克隆抗体处理原癌基因x过量表达的某肿瘤细胞株，发现其增殖能力明显下降。这是因为_。解析本题考查细胞癌变与单克隆抗体的制备与应用。(1)体细胞通过有丝分裂进行增殖，保持了核基因组的完整性。(2)转录是合成信使rna的过程，而翻译是合成蛋白质的过程；虽然各种体细胞中都有原癌基因，但只有某些细胞才表达，这说明原癌基因x的表达具有(组织)特异性。(3)通过题目信息可知，原癌基因是通过控制受体蛋白的合成来控制细胞内信号传导，从而启动dna的复制，导致细胞异常增殖，即原癌基因x能维持细胞周期，控制细胞生长和分裂的进程。(4)b淋巴细胞受到抗原(蛋白x)刺激后能分化产生记忆细胞和浆细胞。(5)由于抗体能与抗原(蛋白x)结合，而蛋白x为细胞膜上的受体，从而阻断了信号传导。答案(1)亲代细胞通过有丝分裂将复制后的核dna平均分配到两个子细胞中(2)mrna蛋白质原癌基因x的表达具有(组织)特异性(3)维持细胞周期，控制细胞生长和分裂的进程(4)蛋白x浆细胞记忆细胞(5)该单克隆抗体与肿瘤细胞表面的蛋白x特异性结合，从而阻断蛋白x介导的信号传导(时间：30分钟)一、选择题1(2013台州模拟)进行生物工程设计时，下表各组所选择的常用实验材料与实验目的配置错误的是 ()。选项实验目的实验材料材料特点a获得克隆动物卵(母)细胞细胞大，细胞质能有效调控核发育b植物的体细胞诱变育种愈伤组织细胞分裂能力强，突变率高c获得表达生长激素的转基因动物乳腺细胞分泌乳汁产生生长激素d烧伤患者移植皮肤自体干细胞分裂能力强，且不会引起免疫排斥解析获得表达目的基因的转基因动物需将外源基因转入到受精卵中，再经胚胎早期培养及胚胎移植方可达到目的。答案c2下列关于植物体细胞杂交技术的叙述，不正确的是 ()。a植物体细胞杂交必须先制备原生质体b科学家利用植物体细胞杂交技术培育出了“白菜甘蓝”杂种植株c诱导植物原生质体融合可用聚乙二醇作为诱导剂d用于培养的植物器官或组织先要进行灭菌处理解析组织培养过程要先将植物组织或者细胞进行表面消毒处理，这样不会破坏细胞的活性，灭菌是在高温高压下进行的，植物细胞会被杀死，d项错误。答案d3(2013重庆一中二诊)下面的简式表示植物组织培养的大致过程，据此判断不正确的是 ()。a若是来自不同植物体细胞融合的杂种细胞，则可能出现不同植物的遗传特性b若是二倍体植株的花粉，则是单倍体植株，经染色体加倍后可得到稳定遗传的品种c若是人参细胞，对进行扩大培养可提高细胞产物人参皂甙的产量d若是具有杂种优势的农作物细胞，则用进行繁育会发生性状分离解析选项d中用繁育属无性繁殖，所以不会发生性状分离。答案d4以下为植物体细胞杂交技术流程图，其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞，所含有的染色体组分别是aa和bb。据图分析不正确的是 ()。a图中过程发生的化学变化是纤维素和果胶水解b经过和过程形成的c细胞只有aabb这一种类型c过程一般使用聚乙二醇作为诱导剂d过程和分别是脱分化和再分化解析将若干a和b等量混合后转移到培养基上培养，经过细胞融合，c的细胞类型包括没有融合的细胞、相同细胞的融合和不同细胞的融合，即aa、bb、aaaa、bbbb、aabb。答案b5在动物细胞培养过程中，下列处理不恰当的是 ()。a培养液和培养用具要进行无菌处理b提供种类齐全的营养物质c提供纯氧以保证细胞的呼吸作用d保证适宜的温度和ph解析动物细胞培养的条件是无毒、无菌的环境，营养充足，温度和ph以及气体环境适宜。所需的主要气体除氧气外，还有二氧化碳，二氧化碳的主要作用是维持培养液的ph。答案c6某实验室做了如图所示的实验研究，下列与实验相关的叙述正确的是 ()。a过程诱导基因使成纤维母细胞发生基因突变b过程属于动物细胞培养过程中的原代培养c丙细胞既能持续分裂又能分泌单一的抗体d过程、所用的培养基都含有聚乙二醇解析是将高度分化的成纤维母细胞诱导形成干细胞，属于基因重组，a项错误；过程的实质是基因的选择性表达，属于细胞分化，b项错误；丙细胞是由浆细胞和瘤细胞融合后形成的，它同时具备了浆细胞和瘤细胞的特点，既能无限增殖，又能分泌特异性抗体，c项正确；是动物细胞融合，需使用聚乙二醇作诱导剂，是动物细胞培养制备单克隆抗体的过程，不需要聚乙二醇，d项错误。答案c7(2013江苏南通调研)下列有关单克隆抗体制备的叙述，正确的是 ()。a先利用特定的抗原蛋白饲喂小鼠，再从小鼠脾脏中分离b淋巴细胞b为避免病毒感染，应用聚乙二醇诱导骨髓瘤细胞和b淋巴细胞融合c体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清和抗生素d经过选择培养基初次筛选的杂交瘤细胞即可进行体内或体外培养解析应用特定的抗原蛋白注射小鼠，不能饲喂，否则抗原会被分解，a项错误；可选用灭活的病毒诱导细胞融合，b项错误；初次筛选后还需经第二次筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞后，再进行体内或体外培养，d项错误。答案c8(2013珠海质检)如图示哺乳动物生殖过程。其中b为卵细胞，c为体细胞。下列叙述不正确的是 ()。a形成动物的过程分别属于有性生殖和无性生殖b产生动物的过程中可发生基因突变、基因重组等c动物的产生表明动物细胞的细胞核具有全能性dabc细胞的形成过程，仅c细胞为有丝分裂解析动物通过受精作用形成，属于有性生殖，动物通过细胞核移植技术形成，利用的原理是动物细胞的细胞核具有全能性，形成动物的过程属于无性生殖，a、c正确。a、b细胞分别是精原细胞和卵原细胞通过减数分裂形成的，c细胞是体细胞，通过有丝分裂形成，d正确。产生动物的过程中并没有发生基因重组，故b错误。答案b二、非选择题9(2013长春四模)红豆杉，又名紫杉，可从其树皮中分离出高抗癌活性的紫杉醇。下面是某同学设计的有关紫杉醇抗肿瘤实验的研究流程，请分析并回答：(1)酶x是_酶，其主要作用是_。(2)物质y是_，乙组的作用是_。(3)为清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，应采取的措施是_。(4)实验结果：若甲组_，说明紫杉醇有抗肿瘤作用。(5)为了解决紫杉醇的药源问题，理论上可用_技术把离体的红豆杉细胞经过_培养成愈伤组织，从中提取紫杉醇，进行加工生产。解析(1)据图可知，酶x是指胰蛋白酶或胶原蛋白酶，其主要作用是使肿瘤细胞分散开。(2)y是生理盐水，乙组为对照组。(3)定期更换培养液的目的是清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。(4)高抗癌活性的紫杉醇能抑制肿瘤细胞的繁殖，所以甲组肿瘤细胞的数目应少于乙组。(5)为了解决紫杉醇的药源问题，理论上可用植物组织培养技术将离体的红豆杉细胞经过脱分化培养为愈伤组织，从中提取紫杉醇进行加工生产。答案(1)胰蛋白(胶原蛋白)使肿瘤细胞分散开(2)生理盐水作为对照组(与紫杉醇形成对照)(3)(定期)更换培养液(4)肿瘤细胞的数目少于乙组(5)植物组织培养 脱分化10(2013临沂二模)红细胞生成素(epo)是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。目前临床使用的是重组人红细胞生成素(rhepo)，其简易生产流程如图。请回答：(1)图中所指的物质是_，所指的物质是_。(2)基因表达载体导入中国仓鼠卵巢细胞系(cho)最常采用的方法是_，它的启动子是_的识别和结合部位。(3)cho是仓鼠的卵巢细胞经过细胞培养过程中的_培养获得的无限增殖细胞。重组cho细胞培养需要_的环境，及营养、温度、ph和气体环境适宜的条件。(4)检测rhepo的体外活性需用抗rhepo的单克隆抗体。单克隆抗体的优点是_，并可大量制备，它是由小鼠的骨髓瘤细胞与其特定b淋巴细胞通过_技术获得的杂交瘤细胞分泌的。答案(1)mrnarhepo(2)显微注射技术rna聚合酶(3)原代培养和传代无菌、无毒(4)特异性强、灵敏度高动物细胞融合11(2013日照模拟)如图是克隆羊的培育流程图，根据所学知识回答下列问题。(1)培育克隆羊时用到的卵母细胞可以从屠宰场收集，并在体外培养到_。(2)从供体羊中取上皮细胞，用_处理，然后进行分散培养。培养过程一般在_(填仪器)中进行，整个过程必须保证细胞处于_的环境中，所需营养物质要与体内基本相同。(3)通过显微操作吸出卵母细胞中的细胞核，此过程中除了可以吸出细胞核，往往还可以将_一并吸出。(4)去核的卵母细胞与供体细胞通过电刺激后融合，_进入受体卵母细胞，构建成重组胚胎。融合后的重组细胞，需要用物理或化学的方法进行激活，使其完成减数分裂和发育进程。(5)将重组胚胎发育到一定阶段，移植到同种的、_相同的其他雌性动物体内，使之继续发育，最后形成克隆羊。移入的胚胎能够存活，是因为受体并不