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Lumitein TM 蛋白凝胶染料Lumitein 蛋白凝胶染料是专为 SDS-PAGE 实验中聚丙烯酰胺凝胶内蛋白检测而设计的一种发光染料。该染料具备很多SYPRO Ruby 所拥有的良好特性,例如:可检测低至 1ng 或更少的蛋白,同时兼容紫外和可见光激发,优越的光稳定性和至少三个数量级的检测线性范围。此外,Lumitein 还有很多优于 SYPRO Ruby 和其他商业化凝胶染料的特性。使用 Lumitein 进行的蛋白染色远比使用 SYPRO Ruby 快速方便。使用 Lumitein 时,蛋白的固定和染色被整合到一步 90 分钟的孵育过程中。另外,使用 Lumitein 进行凝胶染色的背景通常比使用 SYPRO Ruby 时低。最后,Lumitein 以 5 储液形式提供,降低了运费并更加方便储存和操作。 Lumitein 蛋白凝胶染料兼容各种下游分析,包括质谱分析和基于 Edman 降解的序列分析。图 1. 上图:Precision Plus 标准分子量蛋白(Bio-Rad)2 倍梯度稀释后用SDS-PAGE 分离并按照厂商提供的操作步骤用 LumitentTM 染色90分钟。图象用配有 532nm 激发和 610BP30 发射滤片的 Typhoon Trio(GE)获得。下图:在 2-D凝胶中用 LumiteinTM 染色的人肝脏蛋白样品。选取三个圈出来的点通过 AppliedBiomics 公司( Hayward, CA)进行质谱检测。实验结果确认,LumiteinTM 凝胶染色的结果和质谱分析的结果完全一致(结果未列出)图 2. Lumitein 的激发和发射光谱。紫外光和可见光均可以有效的激发该染料。图 3. Lumitein TM 对于 4 种不同蛋白的线性检测范围。不同量的每种蛋白通过 SDS-PAGE分离。凝胶图象用配有 532nm 激发和 610BP30 发射光滤片的 Typhoon Trio ( GE )获得。条带的强度用 ImageQuant 软件定量。将每种蛋白各条带发光强度的对数值( log )对蛋白量的对数值( log )作图。Lumitein Vs. Coomassie 图 4. UV紫外下使用lumitein(左)和考马斯亮蓝(右)检测PAGE凝胶电泳分离的蛋白(凝胶中由左到右的2倍梯度稀释),Lumitein(左)和考马斯亮蓝(右)总蛋白凝胶染色。使用装有EtBr过滤器(UVP)的UV检测配备
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