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文档简介
第36讲细胞工程题组一植物细胞工程1.(2013广州质量检测)下面四个选项中,没有采用植物组织培养技术的是()a采用花药离体培养得到单倍体植株b用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株c人工种子的培育过程d运用细胞工程培育“番茄马铃薯”杂种植株2.(2013金华模拟)下列有关植物体细胞杂交的叙述,不正确的是()a用酶解法去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体b诱导两种植物的原生质体融合,进而形成杂种细胞c植物体细胞杂交的最终目的是获得细胞代谢产物d植物体细胞杂交技术可以克服不同种间远缘杂交不亲和的障碍3.(2013江苏卷)某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植,可应用多种技术获得大量优质苗,下列技术中不能选用的是()a利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗b采用花粉粒组织培养获得单倍体苗c采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上d采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养4.(2013太原市高三年级模拟试题)下图所示为培育农作物新品种的过程示意图。请回答:(1)图示育种过程涉及的生物工程技术有_、_、_等。(2)图中分别表示一个已插入外源dna片段的重组ti质粒载体的_、_和_。(3)图中从愈伤组织到形成完整的新品种植株的途径有两条,具体通过哪条途径主要取决于培养基中的的种类及其浓度配比。(4)若仅用二倍体植物甲的未成熟花粉培养完整植株,称为_植株,说明未成熟花粉具有_;这些植株只有通过_才能结实。(5)若要从大量培养的紫草愈伤组织中提取紫草素,则条件是不需要的。a消毒灭菌 b充足光照c适宜温度 d适宜养料和激素(6)用植物组织培养制作的人工种子,可解决有些作物品种的_等问题(至少答出两点)。(7)图示育种方法与传统杂交育种相比,主要优点是。5.(2013天津卷)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。据图回答下列问题:(1)过程所需的酶是_。(2)过程后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的_存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压,其作用是_。原生质体经过_再生,进而分裂和脱分化形成愈伤组织。(4)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和_植株的根尖,通过_、_、染色和制片等过程制成装片,然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。(5)采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组dna进行pcr扩增,得到两亲本的差异性条带,可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株14进行pcr扩增的结果。据图判断,再生植株14中一定是杂种植株的有_。(6)对杂种植株进行_接种实验,可筛选出具有高抗性的杂种植株。题组二动物细胞工程6.下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是()a培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞b克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变c二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的d恶性细胞系的细胞可进行传代培养7.(2013长沙市月考)动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于()a培养基不同b动物细胞培养不需要在无菌条件下进行c动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能d动物细胞能够大量培养,而植物细胞不能8.在克隆羊多利的过程中,下列哪项技术没有运用到()a细胞培养技术 b细胞核移植技术c胚胎移植技术 d基因工程技术9.下列关于单克隆抗体制备过程的叙述,正确的是()a制备过程中不需要动物细胞培养技术b杂交瘤细胞具有浆细胞与癌细胞的所有特点c经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产d单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂 10.人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为rna病毒,该病毒表面的a蛋白为主要抗原,且疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图:(1)过程代表的是_。(2)过程构建a基因重组载体时,必须使用_和_两种工具酶。(3)过程采用的实验技术是_,获得的x是_。(4)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的_所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可以从疑似患者体内分离出病毒,与已知病毒进行_比较;或用图中的_进行特异性结合检测。 11.(2013海南卷)单纯疱疹病毒型(hsv)可引起水疱性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗hsv的单克隆抗体可快速检测hsv。回答下列问题:(1)在制备抗hsv的单克隆抗体的过程中,先给小鼠注射一种纯化的hsv蛋白,一段时间后,若小鼠血清_中抗的抗体检测呈阳性,说明小鼠体内产生了_反应,再从小鼠的_中获取b淋巴细胞。将该b淋巴细胞与小鼠的_细胞融合,再经过筛选、检测,最终可获得所需的杂交瘤细胞,该细胞具有的特点是_。(2)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体,可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的_中使其增殖,再从_中提取、纯化获得。(3)通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种hsv蛋白,其原因是该抗体具有_和_等特性。第36讲细胞工程1b利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株属于多倍体育种,处理对象可自我生长,无需进行组织培养。2c去除植物细胞壁可以用纤维素酶和果胶酶;原生质体融合后再产生出细胞壁标志着杂种细胞的形成;植物体细胞杂交的目的是为了获得杂种植株;植物体细胞杂交不经过有性生殖过程,所以可以克服远缘杂交不亲和的障碍。3b茎段扦插、幼芽嫁接、植物组织培养都是无性繁殖,可以大量快速得到与原有性状相同的个体,a、c、d均可选用;采用花粉粒离体培养可获得单倍体幼苗,但由于花粉粒为雄配子,发育来的单倍体植株会发生性状分离,不能保持亲代的优良性状,b错误。4(1)植物体细胞杂交技术基因工程植物组织培养(2)启动子终止子标记基因(3)植物激素(4)单倍体全能性染色体数目加倍(5)b(6)多年不结种子、果实,杂种优势衰退,生产种子受到季节、气候和地域的影响,生产种子占用大量土地等(答出两点即可)(7)可以克服生物远缘杂交不亲和的障碍解析:(1)根据图示中新细胞获得的两个途径可以看出,涉及的技术有植物体细胞杂交技术和基因工程。从新细胞形成愈伤组织再到形成新品种,可以看出涉及植物组织培养。(2)根据表达载体构建需有四个组成部分,可以看出位于外源基因的两端,应为启动子和终止子。为标记基因。(3)愈伤组织再分化形成新植株的途径,受到植物激素的调控。可以改变植物激素的种类及浓度来进行调控。(4)花粉是减数分裂形成的,是正常体细胞染色体数的一半,经培养获得的植株为单倍体植株。这也是植物组织培养过程,遵循的原理是植物细胞的全能性。但是正常二倍体所产生的单倍体植株高度不育,因为体细胞内的染色体成单存在,只有通过染色体数目加倍,恢复成正常的二倍体才能正常结实。(5)培养紫草的愈伤组织提取紫草素,不需要光照。(6)人工种子相比传统的种子,可解决一些问题:多年不结种子、果实,杂种优势衰退,生产种子受到季节、气候和地域的影响,生产种子占用大量土地等。(7)传统的杂交育种须在同种生物之间进行,两个物种之间存在生殖隔离。图示的两种育种方法可以避免上述问题,可以克服生物远缘杂交不亲和的障碍。5(1)纤维素酶和果胶酶(2)叶绿体(3)保持原生质体完整性细胞壁(4)双亲(或花椰菜和黑芥)解离漂洗(5)1、2、4(6)黑腐病菌解析:(1)过程表示原生质体的制备,要用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁(2)用于融合的两个细胞,一个是黑芥苗的叶肉细胞,一个是花椰菜的根部细胞,其中供体细胞特有的结构是叶绿体,可通过观察叶绿体的有无作为初步筛选杂种细胞的标志。(3)原生质体没有细胞壁的保护,需要加入适宜浓度的甘露醇以保证渗透压的稳定,以避免原生质体吸水或失水破坏原生质体的完整性;原生质体通过细胞壁再生形成杂种细胞,进而形成愈伤组织。(4)分析再生植株染色体变异类型,需要将再生植株细胞染色体和黑芥苗与花椰菜细胞中的染色体制片观察进行比较,制片的基本程序是解离、漂洗、染色、制片。(5)根据图谱,花椰菜含有碱基对为300和600的dna片段,黑芥含有碱基对为1000、1300和1500的片段,再生植株3只含有长度为300和600的片段,与花椰菜一致,1、2、4既含有花椰菜dna片段,又含有黑芥dna片段,为杂种植株。(6)对杂种植株接种黑腐病菌,能正常生长的即为具有高抗性的杂种植株。6d本题主要考查细胞工程的有关知识,动物细胞培养可以分为原代培养和传代培养,原代培养到一定程度后要进行传代,因为细胞有接触抑制现象,当细胞接触时就会停止分裂(在细胞培养过程中进行的为有丝分裂,所以培养出来的多数细胞基因型相同),但是细胞在培养过程中,传代次数也是有限的,一般为50次就会死亡,留下来的细胞就是发生了癌变的细胞,遗传物质发生改变,具有不死性,不再保留接触抑制现象,仍能进行传代培养。7a动物细胞培养所用的培养基是液体培养基,其中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。而植物组织培养所用的培养基是固体培养基,通常含有水、矿质元素、激素、蔗糖、氨基酸、琼脂等。可见,动物细胞培养所用的培养基与植物组织培养的培养基是不相同的。8d克隆技术需利用核移植以产生重组细胞,重组细胞经细胞培养形成早期胚胎后,需移植到母体子宫内发育成个体。9d单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与浆细胞结合,经过选择培养基的筛选得到杂交瘤细胞并经专一抗体检测后,培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可得单克隆抗体,杂交瘤细胞能无限繁殖但不具有癌细胞的转移能力。10(1)逆转录(2)限制性核酸内切酶(或限制酶)dna连接酶(两空可以互换)(3)动物细胞融合技术杂交瘤细胞(4)a蛋白核酸序列(或基因序列或rna序列或核糖核苷酸序列)抗a蛋白的单克隆抗体解析:由图可知代表的是逆转录;构建a基因重组载体,必须使用限制性核酸内切酶和dna连接酶两种工具酶;过程采用的实验技术是动物细胞融合技术;可通过dna分子杂交技术,从疑似患者体内分离出病毒,与已知病毒进行核酸序列比较,或者用抗a蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测。11(1)hsv1蛋白体液免疫脾脏骨髓瘤既能无限增殖又能产生特异性抗体(2)腹腔腹水(3)灵敏度高特异性强解析:(1)由题意可知,单纯疱疹病毒型可引起水泡性口炎,病毒蛋白hsv可以作为一种抗原刺激机体通过免疫反应产生特异性抗体。在单克隆抗体的制备过程中,首先应注射纯化的hsv蛋白作为抗原,一段时间后对小鼠血清进行检测,如果抗hsv蛋白的抗体检测为阳性,说明小鼠体内通过体液免疫产生了特异性抗体。此时可以从小鼠的免疫器官中,如脾脏、骨髓、淋巴结等部位获取已免疫的b淋巴细胞,与小鼠的骨髓瘤细胞融合,经过筛选、检测获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。已免疫的b淋巴细胞具有产生特异性抗体的特点,而骨髓瘤细胞能无限增
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