课题l微生物的实验室培养.doc

课题l微生物的实验室培养【基础巩固题】1D 解析：本题考查微生物的相关知识。硝化细菌能够进行化能合成作用，把NH3转化成硝态氮，并能利用化学反应中释放的化学能，A项正确；红螺菌在没有有机物的情况下，能够利用光能，固定CO2合成有机物，B项正确；生长因子是微生物生长不可缺少的微量有机物，因此某些细菌的生长过程中需要额外提供生长因子，C项正确；利用含伊红和美蓝试剂的培养基可以鉴别乳制品和饮用水中的大肠杆菌，D项错误。2C3B解析：该微生物以CO2为唯一碳源，但CO2不能为微生物提供能量，不属于能源物质。4A 解析：乙、丙、丁三种致病菌不会产生抗生素，否则靠近乙、丙、丁的甲菌落不能生长。从网B来看，乙菌的生长被抑制，最可能的原因是甲菌产生了抗生素，此种抗生素只能抑制乙菌的生长，而对丙、丁两种细菌没有影响。正确。5C 6C 7C 8D 9D l0D【强化提高题】1C 2A 解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。待培养基冷却至50左右，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态，即可倒平板。平板冷却几分钟后还需倒置。3C 解析：培养基搁置斜面其实是增大接种面积，是在无菌处理后进行的步骤，与杀灭细菌无关。4A 解析：在进行涂布平板操作时，将浸在体积分数为70的酒精中的涂布器取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，需冷却810 S，此时的涂布器就可以进行菌液的平板涂布，要注意将菌液均匀地涂布在培养基表面，并可转动培养基，使涂布均匀。5(1)高压蒸汽灭菌液体 (2)系列稀释(或梯度稀释)淀粉倒置未接种的空白培养基(或接种等量无菌水的培养基) (3)出现透明圈 分泌淀粉酶使淀粉发生水解 (平板)划线6(1)碳源 氮源 (2)数量 (3)平板划线法 稀释涂布平板法(稀释混合平板法) 灭菌解析：将抗菌蛋白加入金黄色葡萄球菌培养基后，可根据菌落多少来判断其抗菌效果。【课外延伸题】1(1)苯酚 A 平板菌落汁数(活菌汁数或菌落计数) (2)含除苯酚外的其他碳源，以苯酚为唯一碳源平板分离(稀释涂布平板或平板划线分离)避免培养过程产生的水分影响微生物的生长。 (3)用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，测定培养液中苯酚含量。 (4)培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程中进行无菌操作。解析：本题考查细菌的分离技术。题目中所筛选的细菌“只能”降解苯酚，故可采用以苯酚为唯一碳源的选择培养基筛选，含除苯酚外的其他碳源的培养基作为对照。培养液中苯酚浓度下降的速度可反映该菌对苯酚的降解能力。严格灭菌、无菌操作可有效防止实验过程中的杂菌污染。2C 解析：将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基可作为对照。对照实验应遵循的原则之一是单一变量原则，所以应与选择培养基一样接种、培养。3(1)酸碱度 渗透压 (2)灭菌 消毒 损伤DNA的结构 (3)比例合适 (4)形状、大小、颜色(答对其中2个即可) (5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生 (6)灭菌4(1)海滩等高盐 河底污泥、沼气池等无氧环境 (2)加盐 以淀粉为唯一碳源 高温 (3)蛋向质和核酸变性高压蒸汽 (4)稀释涂布平板法 平板划线法【高考链接题】1BD 解析：病毒营寄生生活，不能用培养基进行培养。2C 解析：只有适窟浓度的菌液才可在培养基表面形成单个的菌落，如果浓度太高，则形成重叠的现象。3(1)琼脂 葡萄糖 尿素 选择 异养型 (2)群体生长 菌体数日往往非常大，且变化率也很高，以菌体数目的对数为纵坐标有利于作图 对数 稳定 解析：(1)该培养基中，琼脂为凝同剂，葡萄糖为碳源，尿素为氮源；由于只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，可以用来选择出能够合成脲酶的细菌，在功能上称为选择培养基；由于其化学成分明确，故又称为合成培养基；由于该培养基中存在着有机碳源葡萄糖，故可推测从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于异养型。(2)在恒定容积的液体培养基中培养微生物，定期取样，然后以时间为横坐标，以细菌数日的对数为纵坐标，所得的曲线称为微生物的群体生长曲线，以菌体数日的对数作为纵坐标的原因是菌体数目往往非常大，且变化率也很高，直接以菌体数日为纵坐标不利于作图。实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在对数期取材；在生产中，常收集培养至稳定期的细菌用于次级代谢产物的提取。 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数【基础巩固题】1(1)稀释涂布平板法 显微镜直接计数 (2)稀释度 细菌 30300 显微镜2D3A 解析：自养型微生物能够利用二氧化碳和水生成有机物，不利用现成的含碳有机物；而异养型微生物只能利用现成的含碳有机物。所以它们的主要区别是碳源不同。4D 解析：当培养基中葡萄糖的浓度过高时，会导致培养液的渗透压升高，从而导致细胞发生质壁分离。5D 解析：本题考查用菌落计数法测定微生物的数目的方法。注意是计算不同稀释度的平均菌落数。首先选择平均菌落数在30300之间的，当只有一个稀释倍数的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数除以涂布平板时所用稀释液体积(0.1 mL)，再乘稀释倍数作为该样品的细菌总数；若有两个稀释倍数的平均菌落数均在30300之间，则按两者菌落总数之比值来决定，若比值小于2应采取两者的平均数，若大于2，则取其中较小的菌落总数。本题295、46在30300之间，46l04与295103比值为1.6，应取二者的平均数进行计算。6C 解析：唾液中含唾液淀粉酶，在适宜条件下可将淀粉分解。唾液淀粉酶的最适pH为中性，最适温度为37，故新鲜唾液与盐酸混合或煮沸后，唾液淀粉酶将失去活性，不能分解淀粉，淀粉遇碘呈蓝黑色。实验装置中，中含唾液淀粉酶且有活性，可将淀粉分解，加碘液，呈棕黄色，中加碘液后呈棕黄色，故面包霉能分泌淀粉酶，中加一定浓度的蔗糖溶液，不影响淀粉与碘液反应，呈蓝黑色。7A 解析：细菌个体非常小，不易直接观察。不同细菌菌落的形态特征不同，而且可以用肉眼观察，因此常作为鉴定菌种的依据。8A9B 解析：尿素被细菌分解形成碱性物质氨，在碱性环境下，酚红指示剂变红。10B 解析：尿素分解细菌的特点是可以产生脲酶，能把尿素分解为氨，而氨溶解于水后使溶液呈碱性，所以可以用酚红遇碱变为红色的颜色反应来检测分解尿素细菌的存在。11D【强化提高题】1C 解析：基础培养基是含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基，例如牛肉膏蛋白胨培养基；加富培养基一般用来培养营养要求比较苛刻的异养型微生物；鉴别培养基是在培养基中加入某种特殊的化学物质，微生物的代谢产物与特殊化学物质发生特定化学反应，产生明显特征变化；选择培养基是在培养基中加入特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。2A 解析：土壤中的分解尿素的细菌能合成脲酶，能分解尿素，细菌为异养型生物，故培养基中加入了葡萄糖，这样尿素细菌就能在这种选择培养基上正常生长繁殖；破伤风杆菌是一种厌氧型细菌，人体表皮擦伤部位是有氧的环境，因此，破伤风杆菌不能正常生长繁殖；酵母菌是一种异养型生物，缺少有机碳不能正常生长繁殖；病毒只能寄生生活，寄生在活细胞中才能正常生长增殖。3A 解析：不同土样的理化性质不同，因此土样中微生物种类、数目不同。培养基灭菌不彻底或者没严格按无菌操作要求进行接种，都会导致杂菌污染，从而影响实验结果；稀释操作失误也会使实验结果不真实。对照实验只是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度，不会干扰实验组的结果。 上述问题可通过设置对照实验进行确定或排除。如其他同学用A同学的土样进行实验，确定是甭是土样不同的原因；将A同学配制的培养基不加土样液，作为空白对照进行培养，确定是否是培养基受到了污染。4(1)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示刹，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，pH升高，使酚红指示剂变为红色 (2)目的菌 选择 (3)尿素葡萄糖为目的菌提供氧气 (4)稀释涂布平板法(或平板划线法) (5)灭菌 解析：尿素是培养基中的唯一氮源因此原则上只有能够利用尿素的微生物才能够在此培养基上生长。由于细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，pH升高，故以尿素为唯一氮源的培养基中加入的酚红指示剂将变成红色；这种培养基属于选择培养基，可筛选目的菌；其生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的尿素和葡萄糖；振荡培养的目的是提供氧气；固体培养基培养时的接种方法常用稀释涂布平板法或平板划线法；最后，倒掉培养基之前应对其进行灭菌处理。【课外延伸题】1C2C 解析：厌氧型微生物的生长繁殖不仅需要厌氧环境，同时还需要生存所必需的各种营养物质，如碳源、氮源、水、无机盐等。真空环境只能提供无氧环境，却不能提供其他营养物质。3(3)分别在A、B培养基上接种等量的混合的微生物34 (4)无氮 含青霉素的 选择 pH要适宜 分离得到纯度较高的圆褐同氮菌和酵母菌 圆褐固氮菌无成形的细胞核，而酵母菌有 细菌细胞壁和真菌细胞壁的化学组成不同 解析：本题综合考查微生物培养、分离以及有关的实验设计问题，圆褐同氮菌是自生同氮菌，在无氮源的培养基上可以生长，但是可以被青霉素杀灭；酵母菌是单细胞真菌，在无氮源培养基上不能生长，但是青霉素不能杀灭酵母菌，所以使用无氮源的培养基和加入青霉素的培养基可以把它们分别分离出来。因为圆褐固氮菌是细菌，所以没有真正的细胞核，其细胞壁成分是肽聚糖；酵母菌是真核细胞，有真正的细胞核，细胞壁的成分也和细菌不同，主要是葡聚糖，还有少量蛋白质和脂质。4(1)葡萄糖 尿素 (2)有选择作用。因为此配方中尿素是唯一氮源，因此，只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 解析：碳源是提供碳元素的物质，氮源是提供氮元索的物质。所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。绝大多数生物都能利用葡萄糖但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以这种培养基对微生物有选择作用。选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。【高考链接题】1(1)原油 选择 (2)平板划线 法稀释涂布平板法 (3)强 (4)干热灭菌法 高压蒸汽灭菌法 火焰 解析：(1)要筛选能分解原油的细菌，需要以原油为唯一碳源的同体培养基，从功能上讲，这种培养基足选择培养基。(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(3)能分解石油的细菌在以原油为唯一碳源的固体培养基生长，分解培养基中的石油，产生分解圈，分解圈大，说明该菌株的降解能力强。(4)实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法，无菌技术要求实验操作在酒精灯附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。2(1)纯种分离 感病昆虫 (2)选择 碳源 (3)平板划线法 稀释涂布平板法或稀释混合平板法 (4)灭菌 蛋白质和核酸 课题3分解纤维素的微生物的分离【基础巩固题】1cl酶 Cx酶 葡萄糖苷酶2纤维素酶 纤维素分解菌 透明圈3由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对较高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。4(1)是液体培养基配方，原因是配方中无琼脂。 (2)有选择作用，本配方中的碳源是纤维素，所以能分解纤维素的细菌可以大量繁殖，不能利用纤维素的微生物则难以生存。 (3)牛肉膏蛋白胨 对照5(1)滤纸条 (2)醋酸一醋簸钠 (3)纤维素酶 (4)纤维素酶有分解纤维素的作用6C 7B 8B 9D10C 解析：纤维素酶是一种复合酶，至少包括C1酶、cx酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖。第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维素酶属于蛋白质，含C、H、O、N等元素。植物细胞细胞壁的主要成分是纤维素，被纤维素酶处理后，细胞壁被去除，不能再发生质壁分离现象。11c 解析：常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红。【强化提高题】1C 解析：纤维素分解菌如果在所采集的土样中含呈少，稀释涂布在鉴别培养基上后形成的菌落数少不利于挑选所需菌落，通过选择培养可以增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。2D3D 解析：纤维素酶是一种可以把纤维素分解为葡萄糖的酶，它是一种复合酶，至少包括Cl酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种组分，前两种酶将纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。所以D项错。4B 解析：本题考查的是微生物的代谢类型，因为牛的胃中是缺氧的环境，因此能够在此生存的微生物应该是厌氧的，而这些微生物能够利用牛胃巾的有机养料纤维素作为其营养物质，所以属于异养生物。5D 解析：该培养基的有机营养成分里面含碳的营养物质是纤维素，不能分解利用纤维素的微生物不能在该培养基上生长。6.C 解析：分解纤维素的细菌能将纤维素分解，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。7A 8(l)刚果红溶液 (2)加入无菌水 (3)接种 (4)周围有透明圈的菌落【课外延伸题】1C 2D 3(1)C (2)选取未接种的培养基与接种样品的培养基，同时培养。如果在培养过程中接种样品的培养基上有菌落生长，而未接种的培养基上没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。 (3)当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 (4)温度 纤维素酶的量、纤维素酶的浓度、反应时间、pH(答对两个即可) 解析：(1)欲证明该培养基是否起到了选择作用可将碳源由纤维素粉换为葡萄糖