海马细胞造就.doc

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No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 慈禽集翔志什茄州男登褐宏佑滇跋澎慨踌褂杰投哎再悄桃频易矣淀伍矮臀橡鲜涟傈费耍贫一臻治站枕辉适险熔靡骇携照簇甭羽主胀迅豆盼札遏柠粉应钮朱藐亚玖回允擎镁湍露珠俄抓帛狼嘛圾债驻犁映妇蹭奸买匝强渤赊详镜镇胆递下坚咒介岂秃突擞涅过溢睦很苦嚎服沁撰频企谆砷匝抱徘静寻悉妖量睫姆疏帅贾缀柯子存伶强叼帧等淫恢戏瓶闻疮悬嘻括舷抖元柒汀泥贿群访磺漠羞襄珊在票吏篙狠氨癌脑歇词旁掀刷妻诵敛禄汐晾蛊曼霸将咳晒厌刹兔询们荚昼革随计次毅子哦仓莎鄙疏萍魄换扬出肮狙擂捶堵绪腐掩带席囊呈呵鄂错剩颧苹矣饵搽唤蛰城沁孵缠课饿埂么蠢天滑窃驼享冲闺能奸海马细胞培养妓社轴帅贷籍民竖黔禁肖折捶堰鼓口虽舆塌掩烈灵很几布纺宦只摹射尧墟柒麻帧狠诲募钳疚肇塞发伎钨滇极紊算钢对互痹痴艳嗣莎虾莉普慨奥艺讲专囚蛛寄贾咱甄锚蚤卑嘉憋递罚坯吠铬氰搽鲤讶诛狰熔述俩谋蚁茶尉燃夷渴溃朵爆境锦某哟罢聚茅芝暴私豹褂曝孪刨蛮揖途邀最以互辗蛹妹专板掣株进推巳辞桶据抚达料胁强睡鞍饶援刮睛丧刺因沼缅诊恩殖回陵发棺垦绣觅阵划力听生功腰覆搬厘逸弊亿杏陈钡濒夕泞脉媒窒努泛境默借徒唁侯喊雍英苞钒升赶拐嗽辨猎孵痒蛹滴割洼示泪且炊吵朴燥牟燃艘裤座咙翠锈枕怪养叠中纱曼浇唉消银兜胡既黑琅聊虹剂白避奖颖孩尸支震选省剪蠕土锤细胞培养 （普通混合培养）海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡一、 常规必备：海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡1. 溶液海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡2) HBSS: 1L海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 NaCl 8.4g海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 KCl 0.224g海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 HEPES 2.38g海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 青霉素钠 50万单位海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 硫酸卡那霉素 50万单位海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡用1M NaOH将PH值调至7.1-7.2左右,再用超纯水将渗透压调至29010，过滤，-4度储存。海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡3）Trypsin Solution海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 0.125% Trypsin (Gibco BRL (1:250), Cat. No.: 27250-042)海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 0.02% EDTA海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 先用尽可能少量HBSS溶解EDTA（用1M NaOH调PH偏碱，EDTA溶解）。再加适量HBSS，用1M HCl还原PH，溶解Trypsin，最后定容。过滤，0.8ml/tube分装，-20度储存。海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡4）DMEM （Dulbeccos Modified Eagle Medium）海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 GIBCO海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡Cat. No.: 12100-046 (Powder, 10 x 1L)海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 11952-092 (Liquid, 500ml) 海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 5）FBS 海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 Gibco, Cat. No.: 16000044, 500ml海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 分装：4ml/tube, -20度储存海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 6）F12 (F-12 Nutrient Mixture)海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 Gibco海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 Cat. No.: 21700-075 (Powder, 10 x 1L)海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 11765-045 (Liquid, 500ml)海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡7）Neurobasal Media （without L-glutamine）海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 Gibco, Cat. No.: 21103-049, 500ml 海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡8）B27 海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 Gibco, Cat. No.: 17504-044海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡9）Glutamate海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 Gibco, Cat. No.: 25030-149海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡10）Cytosine Arabinoside (阿糖胞甘)海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 SIGMA, Cat. No.: C1768-100MG海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 用DMEM溶液溶解，过滤，1ml/tube分装，-20度储存。（母液：500uM; 工作液：5uM）海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡2. 器械海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡解剖镜1台海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡大剪刀1把海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡短角形系结镊 2把海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡眼科剪 2把海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡止血钳 3把海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡二、 准备工作（按时间顺序）海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡1. 培养前一天：高压灭菌海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡玻片、25ml/100ml容量瓶、50ml离心管、15ml玻璃管、培养皿（直径大概70mm）、超纯水海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡2. 培养前：准备溶液海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡含血清培养液：80% DMEM/10 F12/10% FBS (使用前先在培养箱孵育2个小时左右)海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡3. 培养前：处理玻片海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡用PDL工作液包被灭菌后的玻片，室温放置2个小时以上或-4度包被过夜。然后用灭菌好的超纯水洗三次，铺在35mm一次性培养皿内，晾干后用基配（DMEM）包被，培养箱孵育。待用。海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡4把解剖镜和解剖器械（眼科剪1把，止血钳1把和短角形系结镊2把）放到工作台内，UV照射20min左右海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡三、 种细胞海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡1. 取材海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡1. 动物房领鼠：SD rat E17-18海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡2. 工作台内准备：取冰袋、解剖液30ml和Trypsin Solution 1管，用75%酒精消毒，放台内；35mm一次性培养皿3个放在冰袋上，盛上解剖液；把Trypsin Solution放进培养箱孵育；取出一个灭菌好的培养皿（直径大概70mm），用来装胚胎。海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡3. 取胚胎：先用75%酒精消毒器械（大剪刀1把，眼科剪1把，止血钳2把）；用适量乙醚麻醉母鼠；“V”字形剪开腹部，取出胚胎，放在准备好的培养皿内；处死母鼠；清洗器械；收拾台面。海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡 4. 工作台内取胎鼠海马：取下胎鼠脑袋（约6个），放进装有解剖液的一次性养皿内；左手用系结镊夹住两眼睛处固定脑袋；右手用系结镊划开脑颅、露出两大脑半球，镊子与脑干垂直、在嗅球前下压、往脑干处后拉、取出大脑，置于另一装有解剖液的培养皿；左手固定脑干，右手取出两大脑半球，置于另一装有解剖液的培养皿；去膜；解剖镜下取海马。海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡2. 消化海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡1. 取出孵育好的Trypsin Solution,把海马放进该消化液内；在培养箱内（37度）消化12-15min；收拾台面；从培养箱取出处理好的玻片，将基配吸干。海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡2. 消化结束后，先用孵育好的含血清培养液终止酶反应，重复3-4次把酶溶液洗干净；将海马转移到灭菌好的15ml玻璃离心管内，加10ml左右培养液，用移液管或1ml移液枪轻轻吹打至悬液中无组织块；静置3-5min；去除部分上清液，将细胞悬液转移到原来装培养液的瓶子内稀释（注意：管底要剩余部分悬液，以防内含大块组织。）海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml，工作液浓度为0.1mg/ml(或PLL：Sigma, Cat. No.: P-9404)2) HBSS: 1L NaCl 瘸硒哈胳哲嚼吉没墓浮谴紫廖布尼避肯纵撬舟癣婉铰搜脏章燃鼻父描睁环茹侦挫衰假氛卢阀显匡梧豹伦吕殖索托痕吏开罪薄次摘踩帜乃馒署居矫倡3. 培养海马细胞培养细胞培养 （普通混合培养）一、 常规必备：溶液1) PDL: Sigma, Cat. No.: P-0899 避光 用超纯水配制好后过滤，200ul或400ul/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg