氮测定法标准操作规程.doc

中国3000万经理人首选培训网站氮测定法标准操作规程目的： 是建立氮测定操作规程。 2. 依据：中华人民共和国药典（2000年版二部）附录。3. 范围： 适用于含氮有机物中氮含量的测定。 4. 职责： QC检验员对本标准的实施负责。5. 程序：5.1. 定义：5.1.1. 本法系将供试品在硫酸及催化剂作用下，经强热分解使有机氮转化为硫酸铵，再经强碱碱化使氨馏出并吸收于硼酸液，最后用硫酸滴定液滴定，求出氮含量。简述为消化、蒸馏及滴定三步。5.1.2. 氮测定法分第一法与第二法，应按中国药典各该品种项下的规定选用。5.2. 仪器与试药；5.2.1. 仪器：5.2.1.1. 常量定氮仪由500ml凯氏烧瓶、氮气球和冷凝管组成。5.2.1.2. 半微量定氮仪由1000ml圆底烧瓶、连有氮气球的蒸馏器和直形冷凝管等组成。5.2.1.3. 天平 万分之一天平，适用于精密称取0.1mg以上者；十万分之一天平， 适用于精密称量0.1mg以下者。5.2.1.4. 消化与蒸馏可用电炉加热。5.2.1.5. 蒸馏连接用的乳胶管或橡胶管，应用氢氧化钠试液煮20分钟，洗去碱液后用水煮沸，洗净，晾干。5.2.2. 试药：5.2.2.1. 试剂均为化学纯。5.2.2.2. 滴定液的配制和标定应符合中国药典附录规定。硫酸液（0.005mol/L）用硫酸液（0.05mol/L）定量稀释制成，或直接标定。5.2.2.3. 试液、指示液的配制均应符合中国药典附录规定。5.2.2.4. 硫酸铜用作消化催化剂，硫酸钾用以提高硫酸的沸点，也可将硫酸钾与硫酸铜按10:1比例混合研匀使用。5.3. 操作方法：5.3.1. 常量法（第一法）：5.3.1.1. 称样 取供试品适量（约相当于含氮量2530mg），精密称定，置干燥的500ml凯氏烧瓶中。供试品如为固体或半固体，可用定量滤纸包裹加入，也可直接称入。5.3.1.2. 消化 在凯氏烧瓶中依次加入硫酸钾10g和硫酸铜0.5g，沿瓶壁缓缓加入硫酸20ml；若瓶颈上有少量供试品粘附，可用硫酸冲下。加23粒玻璃珠或沸石，在瓶口置一小漏斗，并使烧瓶成45斜置，用直火（加热部位保持在液面之下）缓缓加热，使溶液的温度保持在沸点以下，等泡沸停止，消化液黑色渐变棕色时，强热至沸，俟溶液成澄清的绿色时，继续加热30分钟，放冷，沿瓶壁缓缓加水250ml，摇匀，放冷。5.3.1.3. 蒸馏 沿瓶壁加40%氢氧化钠溶液75ml，使流至瓶底自成一液层，加锌粒数粒，用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接（氮气球可防止碱液溅入硼酸吸收液）。另取2%硼酸溶液50ml，置500ml锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿指示液10滴，将冷凝管尖端浸入硼酸溶液的液面下；轻轻摇动凯氏烧瓶，摇匀（防止温度骤然变化引起硼酸接受液倒吸），加热蒸馏，蒸至接受液的总体积约为250ml时，将冷凝管尖端提出液面，使蒸汽冲洗约1分钟，用水淋洗尖端，停止蒸馏。5.3.1.4. 滴定 馏出液用硫酸液（0.05mol/L）滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的硫酸液（0.05mol/L）相当于1.401mg的N。5.3.2. 半微量法（第二法）：5.3.2.1. 称样 取供试品适量（约相当于含氮量1.02.0mg），精密称定，置干燥的3050ml凯氏烧瓶中。5.3.2.2. 消化 在烧瓶中加硫酸钾 0.3g与30% 硫酸铜溶液5滴，再沿瓶壁用吸管滴加硫酸2.0ml，在凯氏烧瓶口放一小漏斗，并使烧瓶成45斜置，用小火缓缓加热使溶液保持在沸点以下，等泡沸停止，溶液由黑色变为棕黄色时，强热至沸，俟溶液成澄明绿色后，除另有规定外，继续加热10分钟，放冷，加水2ml。5.3.2.3. 蒸馏 按药典附图连接蒸馏装置，A瓶中加水适量与甲基红指示液数滴，加稀硫酸使成酸性，加玻璃珠或沸石数粒，将连有氮气球的蒸馏器和直形冷凝管用水加热用蒸气淋洗，并使水自冷凝管尖端反复冲洗2-3次，从加样品口淋洗1次，洗涤液排出蒸馏管。取2%硼酸溶液10ml，置100ml锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液5滴，将冷凝管尖端浸入液面下，将凯氏烧瓶中已消化的内容物经漏斗移入连有氮气球的蒸馏器中，用水少量淋洗漏斗数次，再加入40%氢氧化钠溶液10ml，用少量水再洗漏斗数次，关闭漏斗（加少量水封闭出口），进行蒸馏（蒸馏时不宜泡沸过高，以免溅至氮气球），至硼酸液由酒红色变为蓝绿色起，继续蒸馏约10分钟，将100ml锥形瓶下移至冷凝管尖端提出液面，使蒸气继续冲洗约1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏。5.3.2.4. 滴定 馏出液用硫酸液（0.005mol/L）滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色，并将滴定的结果用空白试验（空白馏出液的容积应与供试品所得馏出液的容积基本相等）校正。每1ml的硫酸液（0.005mol/L）相当于0.1401mg的N。5.4. 注意事项：5.4.1. 蒸馏装置连接后应严密。5.4.2. 消化时，若发现瓶壁上有黑点，可适当转动烧瓶，使硫酸回流时将黑点洗下，以保证消化完全。5.4.3. 消化液应放冷后，再沿瓶壁缓缓加水，防止供试液局部过热爆沸冲出瓶外。5.4.4. 蒸馏过程中若无黑色CuO析出，说明加入碱量不足，应补足碱量或重新实验。5.4.5. 配制40%氢氧化钠溶液时，宜边加边振摇，避免未溶解部分沉积于容器底部而难于溶解。5.4.6. 约80%以上的氨在最初 12分钟内蒸出，所以初蒸速度不宜太快，以免氨蒸出后未能及时被吸收而逸失。5.4.7. 锥形瓶加入硼酸溶液和指示剂后应显酒红色，如显绿色，说明锥形瓶有碱性物质污染。蒸馏出的氨接受液应尽快滴定，避免放置时间过长，影响测定结果。5.5. 记录与计算：5.5.1. 记录 应记录天平型号及室温和相对湿度，供试品与试药的名称、规格及取用量，滴定液的名称（也可用盐酸液）、F值及消耗量（ml）。5.5.2. 计算： 含氮量X%=TF（VSVO）100% W 式中： T为滴定度（mg/ml）； VS与VO分别为供试品与空白滴定时消耗硫酸滴定液的体积（ml）； F为滴定液浓度的校正因子； W为供试