植物细胞有丝分裂的制片和观察.ppt

植物细胞有丝分裂的制片与观察 一 实验目的 1 掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术2 观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态特征 二 实验原理 1 植物根尖 茎尖等分生区细胞能进行有丝分裂2 在有丝分裂过程中 染色体发生规律性动态变化3 染色体可被碱性染料着色 便于观察4 根据显微镜下观察到的染色体特点可识别有丝分裂不同时期 三 实验仪器和药品 1 仪器 显微镜 恒温箱 水浴锅 计时器 烧杯 载玻片 盖玻片 剪刀 镊子 滴管 刀片 玻璃皿2 材料 大蒜3 药品 诺卡氏固定液1mol L的HCl作为解离液 卡宝品红作为染色液 四 实验流程 1 大蒜根尖培养及固定 实验前3 4d 将大蒜掰成蒜瓣摆在铺有四层纱布的托盘里放入温度为25 一定湿度的培养箱中培养 每天换水两次待根长到1 2cm将根剪下用吸水纸吸干水分 将其放入诺卡氏固定液 乙醇 冰醋酸 3 1 固定4 24小时 固定的作用 杀死细胞 固定细胞形态 维持染色体的完整性 提高染色效果 四 实验流程 1 大蒜根尖培养及固定 2 装片制作 1 解离 目的 使组织中的细胞分离开 操作 先用95 的酒精漂洗 在HCL中60 水浴5min左右 c 解离时 细胞已死亡 a 解离充分是实验成功的必备条件 注意 b 解离过度 细胞结构被破坏 解离液 1mol L的HCl 四 实验流程 1 大蒜根尖培养及固定 2 装片制作 漂洗液 清水 先置于清水中浸泡2min左右 目的 洗去解离液 便于染色 次数 2 3次 注意 若不漂洗 解离过度 HCl作用 影响染色 HCl与碱性染料反应 1 解离 2 漂洗 备注 将漂洗好的根尖放入盛有清水的培养皿中 四 实验流程 1 大蒜根尖培养及固定 2 装片制作 1 解离 2 漂洗 3 取材 部位 根尖2 3mm 注意 要去除根尖乳白色根冠 根尖分生区 成熟区 伸长区 分生区 根冠 根尖的结构 四 实验流程 1 大蒜根尖培养及固定 2 装片制作 1 解离 3 取材 2 漂洗 4 染色 操作 用镊子尖把大蒜根尖弄碎 或者将根尖均匀切成三份 用卡宝品红染色 6 8分钟后 盖上盖玻片 再盖上一个载玻片 用拇指轻压载玻片 随即用一次性筷子进行敲片 目的 使细胞分散开 有利于观察 注意 染色时敲片的力度要适中 染色剂 卡宝品红染液 时间 6 8min 使染色体 质 着色 染色时间过长 细胞全被染色 无法观察 染色时间过短 染色体颜色过浅 影响观察 四 实验流程 1 大蒜根尖培养及固定 2 装片制作 解离 漂洗 取材 染色 3 观察 1 低倍镜观察 找到分生区细胞 特点 细胞呈矩形 排列紧密 有分裂细胞 2 高倍镜观察 在低倍镜的基础上换用高倍镜 3 仔细观察 先找中期 再找其余各时期 注意染色体特点 4 移动观察 慢慢移动装片 完整观察各个时期 四 实验流程 1 大蒜根尖培养及固定 2 装片制作 解离 漂洗 取材 染色 3 观察 低倍镜观察 高倍镜观察 仔细观察 移动观察 注意 a 观察时应先找到呈矩形的分生区细胞 在一个视野里观察时 要注意边观察边移动装片 观察有丝分裂各个时期 b 显微镜下观察到的都是死细胞 不能看到细胞分裂的动态变化 c 在显微镜下观察到间期细胞的数目最多 操作要点 1 解离 培养好的根尖先用95 的酒精漂洗再放入1mol L的HCl中60 水浴5min左右2 漂洗 先在清水中浸置2min 再用清水洗去解离液2 3次 最后置于盛有清水的培养皿中3 取材 用刀片切取根尖2 3mm处的分生区 并切去乳白色的根冠4 染色 用镊子尖把大蒜根尖弄碎 或者用刀片将根尖均匀切成三份 用卡宝品红染色 6 8min后 盖上盖玻片 再盖上一个载玻片 用拇指轻压载玻片随即用一次性筷子进行敲片 5 观察 首先在低倍镜进行观察 再到高倍镜下观察 五 实验结果对比图 间期 前期 中期 后期 末期 后期与末期的过渡期 六 实验结果展示 前期 中期 后期 末期 六 实验结果展示 间期 后期 中期 末期 1 盐酸的作用是什么 盐酸起解离的作用 杀死根尖细胞 溶解细胞间质 破坏胞间连丝 使细胞容易发生分离 2 清水漂洗的作用目的是什么 清水漂洗的作用即洗去材料中的解离液 便于染色 作用是使细胞中的染色体着色 因为染色体很容易被这样的碱性染料染色 3 卡宝品红的作用是什么 4 装片制作完成 轻轻按压的作用是什么 使细胞相互分离 在载玻片上平铺成一层 便于观察 思考 七 作业 1 实验