糖类蛋白质脂肪的鉴定ppt课件.ppt

实验生物组织中糖类脂肪和蛋白质鉴定 1 思考题 1 糖类 脂肪 蛋白质鉴定的实验原理2 常见的还原糖有哪些 取材的要求3 斐林试剂的组成 使用时的注意事项4 双缩脲试剂的组成 使用时注意事项5 斐林试剂和双缩脲试剂的比较6 脂肪鉴定中酒精的用法和作用7 脂肪鉴定中能否直接观察颜色 借助什么来观察 8 如何鉴定淀粉 颜色反应如何 2 1 实验原理 化学试剂 有机化合物 特定的颜色 1 还原糖 斐林试剂水浴加热砖红色沉淀 2 脂肪 苏丹 橘黄色脂肪 苏丹 红色 3 蛋白质 双缩脲试剂 紫色 3 2 常见的还原糖有哪些 取材的要求还原糖 可被氧化充当还原剂的糖 常见的有 葡萄糖 果糖 麦芽糖 乳糖 半乳糖 注意 蔗糖不是还原糖3 斐林试剂的组成 使用时注意事项斐林试剂 甲液 0 1g mL的NaOH溶液乙液 0 05g mL的CuSO4溶液使用注意事项 等量混合 现配现用 NaOH CuSO4 4 1 点拨 还原糖 斐林试剂砖红色沉淀可溶性还原糖与斐林试剂发生作用 可生成砖红色的Cu2O沉淀 放在盛有50 65 温水的大烧杯 水浴加热 颜色变化 浅蓝色棕色砖红色 5 1步骤 样液制备 取材5g 加入石英砂和5ml水 1 取样液2ml于试管中 2 加入新配制的斐林试剂1ml 甲液和乙液等量混合均匀后再加入 盛有50 65 温水的大烧杯 3 水浴加热2min左右 4 观察颜色变化 浅蓝色 棕色 砖红色 6 注意事项 1 材料的选取 还原糖含量高 白色或近于白色 如苹果 梨 白萝卜 思考 西瓜 甘蔗 甜菜可以吗 为什么 2 试剂 斐林试剂 等量混合 现配现用 甲液 0 1g mL的NaOH溶液乙液 0 05g ml的CuSO4溶液 7 4 双缩脲试剂组成 使用时注意事项 8 双缩脲试剂组成 A液 0 1g mL的NaOH溶液B液 0 01g mL的CuSO4溶液 使用注意事项 先加A液1mL于样液中 再加B液4滴于样液中 1 蛋白质 双缩脲试剂 紫色 9 2步骤 1 试管中加样液2mL 2 加双缩脲试剂A液1mL 造成碱性环境 摇匀 3 加双缩脲试剂B液4滴 摇匀 4 观察颜色变化 紫色 注 样液浓度不宜过高 以免实验后黏住试管壁 洗不干净 B液不能过量 多余的B液会与A液反应成蓝色 而掩盖生成的紫色 10 5 比较斐林试剂和双缩脲试剂 0 1g mLNaOH 同甲液 0 01g mLCuSO4 0 05g mLCuSO4 还原性糖 蛋白质 等量混合后再加入 先加A液1mL 摇匀 再加B液4滴 50 65 水浴加热 砖红色沉淀 紫色络合物 不需加热 摇匀 11 6 脂肪鉴定中酒精的用法和作用7 脂肪鉴定中能否直接观察颜色 借助什么来观察 12 3 脂肪 苏丹 橘黄色脂肪 苏丹 红色 13 2 步骤材料的选取 含脂肪量高的组织 如花生的子叶 取材 取一粒浸泡过的花生种子 去掉种皮 切片 制片 切片越薄越好 将最薄的花生切片放在载玻片中央 染色 滴2 3滴苏丹 染液 染色3min 用吸水纸吸去染液 再滴体积分数50 的酒精洗去浮色 再用吸水纸吸去多余的酒精 苏丹 易溶于酒精中 避免影响实验结果 滴1 2滴清水于材料切片上 盖上盖玻片 镜检观察 光学显微镜对光 低倍镜寻找着色圆形小颗粒 高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒 14 8 如何鉴定淀粉 颜色反应如何 15 用试管取2mL待测组织样液 向试管内滴加1 2滴碘液 观察颜色变化 4 淀粉 碘 蓝色 加1 2滴碘液 16 1 鉴定生物组织中可溶性还原糖的试剂A 斐林试剂B 双缩脲试剂C 苏丹 染液D 苏丹 染液2 能与斐林试剂反应产生砖红色沉淀的是A 淀粉B 果糖C 蔗糖D 纤维素3 下列哪个实验用到显微镜 A可溶性还原糖的鉴定B 蛋白质的鉴定C 脂肪的鉴定D 淀粉的鉴定 A C B 17 4 用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时 溶液颜色的变化过程为 A 无色一砖红色 沉淀 B 浅蓝色一砖红色 沉淀 C 浅蓝色一蓝色一砖红色 沉淀 D 浅蓝色一棕色一砖红色 沉淀 5 下列物质中 能被苏丹IV染液染成红色的是 A马铃薯块茎B 浸软的蓖麻种子C 蛋清液D 苹果 D B 18 6 还原糖的实验中 加入斐林试剂时必须要A 先加入斐林试剂甲液 后加入乙液B 先加入斐林试剂乙液 后加入甲液C 将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后再加D 以上A B C三种操作方法都正确7 鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂正确做法是A 先加A液 混合后再加B液摇匀观察B 先加B液 混合后再加A液摇匀观察C A B液混合后加入 摇匀后观察D A B液同时加入样液 摇匀后观察 C A 19 即 还原糖中的醛基 CHO 被Cu OH 2氧化 Cu OH 2被还原成砖红色的Cu2O沉淀 还原糖的鉴定原理 20 5 比较斐林试剂和双缩脲试剂 0 1g mL的NaOH溶液 0 1g mL的NaOH溶液 0 01g mLCuSO4溶液 0 05g mL的CuSO4溶液 还原性糖 蛋白质 甲液和乙液等量混合均匀后再加入 先加双缩脲试剂A液1mL 摇匀 再加双缩脲试剂B液4滴 50 65 水浴加热 砖红色沉淀 紫色络合物 不需加热 摇匀即可 21 蛋白质的鉴定原理 蛋