植物赤霉素相关研究进展.doc

植物赤霉素相关研究进展摘要：植物的生长发育受激素调节，同时受环境因素如光照、胁迫的影响。最近， 在植物激素的合成、所参与的信号转导路径、降解路径、调控部位及其对激素响应的时间方面获得了重要进展。研究人员成功地揭示了拟南芥中植物激素是如何调节干细胞系统的维持、子代干细胞的迁移和分化，以及环境因素是如何通过调控激素水平和应答来改变植物生长发育的机制。今后，在信号细胞和器官水平上来研究激素作用和相互间的影响，可以大大提高我们理解植物生长发育是如何适应内源以及外源环境条件的改变。关键字：赤霉素，代谢途径，调控机制赤霉素(gibberellin ,GA)是一类四环双萜类的植物激素，具有生物活性的赤霉素在高等植物的整个生命周期中都发挥着重要的作用，它可以促进种子萌发、茎和根的伸长、叶片伸展、表皮毛发育、花粉管伸长、花和果实的发育等，而且植物也可以通过调节内源赤霉素的生物合成来介导自身对环境因子的应答( Hedden and Phillips, 2000; Olszewski et al., 2002)。到目前为止，在植物、真菌和细菌中已经发现 126 种的赤霉素分子（MacMillan, 2002）。然而，仅有少部分的赤霉素，例如赤霉素 GA1、GA3 和 GA4 是具有生物活性的，其余的都是合成前体，例如 GA9，GA12 和 GA20，或者是降解产物，例如 GA8，GA34。有活性的GAs，包括GA1，GA3，GA4，GA7，在3号碳上有一个羟基基团，6号碳上有一个羧基基团，4号碳和10号碳之间有内酯结构。3号位的羟基基团可以在2号或3号位上被其他的功能基团代替，例如GA5和GA6。GA1在很多植物中都有发现，这表明它是广泛存在的有活性的植物激素。然而，GA4同样存在于多种植物中，它被认为是拟南芥和一些葫芦科植物中主要的活性赤霉素。植物生长发育最重要的赤霉素是GA1和GA4，他们之间的差别在于C-13上是否有羟基基团。1. 赤霉素的代谢途径 赤霉素的合成是从牻牛儿牻牛儿焦磷酸（geranylggeranyl diphpsphate GGDP）开始，发生在三个不同的部位，分别是质体、内质网和细胞溶质，有三种不同的酶参与活性赤霉素的代谢，它们分别是萜烯合成酶 (TPSs), 细胞色素P450单加氧酶 (P450s)和2-氧化戊二酸依赖的双加氧酶(2ODDs)。 首先在质体中GGDP通过内根-柯巴焦磷酸合成酶（ent-copalyl diphosphate synthase，CPS）环化成内根-柯巴焦磷酸（ent-copalyl diphosphate，CDP） ，CDP被内根-贝壳杉烯合成酶（ent-kaurene synthase，KS）进一步环化成内根-贝壳杉烯（ent-kaurene） 。然后内根-贝壳杉烯在内质网中通过依赖NADPH的两个细胞色素P450单加氧酶）内根-贝壳杉烯氧化酶（ent-kaurene oxidase，KO）和内根-贝壳杉烯酸氧化酶（ent-kuarenoic acid oxidase, KAO）转化为GA12-醛。最后一步在细胞溶质中由两个可溶性的氧化酶参与完成。GA12-醛和它的13羟基化产物GA53通过GA20氧化酶（gibberellin 20-oxidase,GA20ox）在GA12和GA53的C20部位上进行三次连续氧化，使C-20生成CO2，从而失去一个C，形成内酯，生成GA9和GA20。GA3氧化酶（gibberellin 3-oxidase, GA3ox） 介导一个3羟基基团到GA9和GA20上， 生成有有生物活性的GAs， GA1和GA4。 在GA2氧化酶（gibberellin 2-oxidase, GA2ox）的介导下，在活性赤霉素的C-2位置添加一个羟基基团生成没有活性的GA8和GA34。GA20ox、GA3ox和GA2ox都属于2酮戊二酸依赖的双加氧酶（2oxoglutarat e-dependent dioxygenase, 2ODD）。在高等植物中，他们一般以小家族的形式存在。2. 赤霉素合成的位点 了解GA合成的位点对于了解激素是如何调控生长和发育是很关键的。研究表明AtCPS (GA1)-GUS主要在快速生长的组织表达，这表明它的表达与GA响应的位点相关（Silverstone et al., 1997）。这个结果与ent-kaurene的合成发生在小麦生长组织的质体中一致(Aach et al., 1997)。草中的一个GA3ox，Nty在活跃的分裂和延伸细胞中表达，包括分生组织，发育期的花和根尖中(Itoh et al., 1999)；水稻中GA20ox2和GA3ox2在快速延伸和分裂组织中表达(Kaneko et al., 2003)。 在谷物发芽后的生长阶段，GA在胚中合成，然后输送到糊粉层细胞。Kaneko研究小组在水稻中发现了两类不同时空表达的GA合成基因，OsGA20ox1和OsGA20ox2，GA3ox1和GA3ox2。转录水平上OsGA20ox1和OsGA3ox1仅在上皮组织和盾片中表达，然而OsGA20ox2和OsGA3ox2在生长的芽和上皮组织中都有表达。3. 赤霉素的失活途径 激素失活对于调控植物体内激素的浓度是很重要的。研究最清楚的是通过 GA2-oxidases (GA2oxs)来催化 2-羟基化反应。研究表明 GA2ox 利用 C-19的赤霉素作为底物，包括有活性的和它们的直接前体，GA9 和 GA20 (Thomas et al., 1999)。近些年一种新类型的 GA2ox被报道，它可以接受 20-C的赤霉素作为底物（Lee et al., 2005; Schomburg et al., 2003）。 通过对隐性水稻突变体 eui 的研究发现了一条新的 GA 失活机制 (Zhu et al., 2006)：EUI 是一种 P450，命名为 CYP14D1（Nelson et al., 2004），它可使非 13-羟基化的 GA的 16 号和 17 号碳之间的双键环氧化。在水稻上层的节间处，EUI/CYP714D1 是主要的失活酶，这是因为突变体积聚了大量活性的 GA。水稻中过量表达 EUI，在体内或体外纯化过程中都能够检测到 16，17-环氧化物的水化反应，在其它物种中也发现了这种反应。这些结果说明活性 GA的 16，17-环氧化反应是一个普遍的失活机制。 最近的研究表明拟南芥中 GAMT1 和 GAMT2 编码一种赤霉素甲基化转移酶，这种酶可以利用 S-腺苷-L-甲硫氨酸作为甲基的供体，催化 C-6 羧基的甲基化反应。GAMT1和 GAMT2 可以利用各种各样的 GA，包括活性的 GA和它们的前体作为底物，产生相应的甲基化产物。在拟南芥、烟草、矮牵牛花中表达 GAMT1 或 GAMT2 可以产生 GA 缺陷型的矮化植株。GAMT1 和 GAMT2主要在发育的种子中表达。gamt1 和 gmat2 的双突变体，活性 GA 的含量显著升高，而且它们对于 GA合成抑制剂有更强的抵抗力。 这些结果表明 GAMT 基因在赤霉素失活方面发挥着重要的作用。但是 GAs 的甲基化是否是一种普遍的失活机制还有待研究(Varbanova et al., 2007)。 4. 赤霉素代谢平衡 活性赤霉素的含量主要通过正反馈调节和负反馈调节来维持。研究表明，植物主要通过转录水平上调节编码 2ODDs 的基因表达来维持 GA 的代谢平衡。例如，在 GA 缺陷型的背景下，拟南芥 GA 合成过程中的的关键基因，AtGA20ox1 和 AtGA3ox1 的表达量显著提高，然而在外源施加 GA 的情况下，这些基因的表达量下调。相反，在外源施加 GA 后，GA分解代谢相关的基因，AtGA2ox1和AtGA2ox2 表达上调。尽管代谢平衡的分子机制还没搞清楚，但是 GA信号途径中的关键组分参与了 GA 的应答，包括可溶性的 GA 受体 GID1，DELLA蛋白和 F-box 蛋白 SLEEPY 1(SLY1)(拟南芥)/GID2(水稻)。例如，水稻突变体 gid1和 gid2 中，GA20ox2（SD1）的表达上调，活性 GA1 含量上升。相反，即使在 GA 缺陷的背景下，拟南芥缺失突变体 della 中 AtGA3ox1 的转录水平下降。RSG(REPRESSION OF SHOOT GROWTH)是烟草中的一个转录激活因子，它可以促进 KO和GA20ox 的表达来调控 GA 的含量。5. 赤霉素代谢途径中关键酶编码基因的研究进展 多数与 GA 代谢相关的酶的编码基因都已经被克隆和研究。在拟南芥和水稻中，催化 GA 合成前期的酶由一个或两个基因编码。在拟南芥中，CPS，KS 和 KO都是被单基因编码，这些基因的功能缺失突变体（ga1/ga2/ga3）表现出 GA 严重缺陷的矮化表型。但是，由于赤霉素代谢平衡在植物中过量表达这些基因并不会影响植物的高度(Fleet et al., 2003)。有趣的是，水稻基因组含有两个有功能的 CPS 基因，但是仅有一个参与 GA合成，另外一个参与植物抗毒素的合成。在拟南芥中有两个 KAO基因，这两个基因在所有的组织中都有表达(Helliwell et al., 2001a)。 与早期的合成酶相比， GA合成下游的两类双加氧酶 （GA20ox,GA3ox） 都由小基因家族编码，这些基因在不同的组织器官中表达(Hedden and Phillips, 2000),而且这些基因的突变会引起半矮化的表型，说明这些基因的功能冗余，然而过量表达这些基因会引起植株高度增加，活性赤霉素含量升高(Oikawa et al., 2004)。越来越多的证据表明这些多基因家族的成员受到发育和环境因素不同程度的调控。 例如， 反向遗传学表明拟南芥中编码GA3ox的四个基因中AtGA3ox1 和 AtGA3ox2在营养生长阶段发挥着不同但又重叠的功能。 最近在水稻中发现了一种赤霉素缺陷的突变体gdd1, 研究表明GDD1可以结合赤霉素代谢途径中关键基因 KO的启动子（Li et al., 2011）。 转基因拟南芥中过量表达 GA20ox 引起 GA 含量的增加和 GA 过量的表型。相反，尽管在拟南芥中过量表达 CPS 引起内根-贝壳杉烯（ent-kaurene）， 内根-贝壳杉烯酸（ent-kaurenoic acid），和 GA12 的增加，但是对于活性 GA的含量和植物表型没有影响。 5.1 赤霉素 20-氧化酶和赤霉素 3-氧化酶研究表明在拟南芥中过量表达 GA20ox1、GA20ox1 和 GA20ox3，会引起下胚轴的延伸，芽变高，早花现象以及活性 GA1 或 GA4 含量的增加。相反，GA20ox 的沉默会引起植株的矮化和 GA4 含量的减少(Coles et al., 1999)。这些结果说明可以通过调控 GA20ox 的活性来调节植物的生长发育，同时也为植物育种开辟了一条途径：利用生物技术通过改变GA代谢来改造植物。 Eriksson 等(2000)研究发现在白杨中过量表达拟南芥的 GA20ox1 可以提高活性 GA 的含量，同时促进了白杨的生长发育，转基因的白杨生物量得到提高，木质部纤维变长变多，而这种期望的品质是生产纸的时候所需要的。 在不同的物种中，GA20ox 过表达和下调表达改变了活性 GA 含量，同时伴随着植株高度的增加或减少，这表明 GA20ox在 GA 代谢过程中发挥着重要的作用。 生化和分子方面的证据表明 GA20ox转录水平由一个负反馈机制和外界环境因子调节(Kamiya et al., 1999; Vidal et al., 2003)。研究发现一些转录因子调控 GA20ox基因的表达。例如，在许多物种的根尖分生组织中KNOX的I类蛋白抑制GA20ox基因的表达 （Hay et al., 2004），然而在拟南芥中转录因子 FUS3 下调了 GA3ox 的表达(Curaba et al., 2004; Gazzarrini et al., 2004)。5.2 赤霉素 2-氧化酶 GA生物合成相关基因比GA分解代谢的基因受到了更多的关注， 但近期对GA分解代谢相关酶基因GA2ox的克隆和功能研究表明分解代谢相关的基因在调控GA含量方面同样重要(Reid et al., 1992; Ross et al., 1995; Thomas et al., 1999; Sakamoto et al., 2001)。GA2ox在拟南芥和豌豆中是由小基因家族编码，但在水稻中仅有一个GA2ox基因被克隆。 编码 GA2ox的基因已经在多种物种中被克隆出来，例如，红花菜豆，拟南芥(Thomas et al., 1999; Hedden and Phillips, 2000; Wang et al., 2004)，豌豆(Lester et al., 1999; Martin et al., 1999)，水稻(Sakamoto et al., 2001; Sakai et al., 2003; Sakamoto et al., 2004)， 白杨(Busov et al., 2003)，菠菜(Lee and Zeevaart, 2002)和生菜。系统进化分析表明 GA2ox 家族根据核苷酸序列和蛋白序列可以分为三类。I 和 II 类 GA2ox 可以分别使 C19-GAs（GA1 和 GA4）和 C19-GAs 的前体（GA20 和 GA9)失活，III 类可以使 C20-GAs（GA12 和 GA53)2-羟基化，这类氧化酶的编码基因包括 SoGA2ox3、AtGA2ox7和AtGA2ox8，其中AtGA2ox7和AtGA2ox8在拟南芥和烟草中的过量表达会产生矮化表型（Schomburg et al., 2003)。研究发现来源于菠菜的 SoGA2ox1 具有催化19-C 和20-C赤霉素的双重活性(Lee and Zeevaart, 2002)。 由于GA2ox通过羟基化反应参与活性GA降解， 因此在拟南芥中过量表达GA2ox降低了GA含量，使植株出现矮化表型，花粉管的减少，开花时间延长,种子的不育(Schomburg et al., 2003; Wang et al., 2004; Zhao et al., 2007)。另外在小麦(Hedden and Phillips, 2000)，水稻(Sakamoto et al., 2001)，烟草(Schomburg et al., 2003; Biemelt et al., 2004)，百喜草(Agharkar et al., 2007)和茄属植物中(Dijkstra et al., 2008)异源表达 AtGA2ox可以降低高度，延长开花时间。通过 GA2ox 的表达来降低内源活性赤霉素浓度不但可以产生植物矮化，延长种子休眠的时间，而且还可以改变叶绿素的浓度(Dijkstra et al., 2008)。 6. GA 信号转导的分子机制 研究发现拟南芥、水稻(Oryza sativa)、大麦(Hordeum vulgare)和番茄(Solanum lycopersicum)的 GA 信号分子机制是高度保守的。为了探究 GA 信号的分子机制，在水稻中筛选出了几个 gid突变体并且确定了它们的位点。 GID1(GA-INSENSITIVE DWARF1)蛋白是可溶性的 GA受体，DELLA蛋白是 GA 信号途径中的一个负调控因子，在 N 末端的调控区域有一个保守的 DELLA 和VHYNP序列，DELLA 指的是保守的氨基酸序列 Asp-Glu-Leu-Leu-Ala (D-E-L-L-A)，在 C 末端有保守的 GRAS （GAI、RGA和 SCARECROW）结构域。DELLA基因家族是转录因子 GRAS 家族的一个分支。在拟南芥中有五个 DELLA基因，它们之间部分功能重叠，这表现在每一个 della 突变体都表现出抑制 gal-3 的GA 合成缺陷型表型。DELLAs RGA(REPRESSOR OF GA1-3)和 GAI（GA-INSENSITIVE)是抑制茎延伸的DELLA蛋白(Dill and Sun, 2001)，RGA、RGL2和RGL1能够抑制开花和繁殖(Cheng et al., 2004)。尽管DELLAs RGA、GAI和RGL3都可以抑制种子的发芽 (Cao et al., 2005; Piskurewicz and Lopez-Molina, 2009)，但是 RGL2 是种子发芽的主要抑制因子(Lee et al., 2002; Peng and Harberd, 2002; Ariizumi and Steber, 2007)。当DELLA蛋白与GA-GID1形成复合体后，DELLA蛋白对于GA生理活性的抑制作用被解除。目前，通过对这些蛋白进行物理及生物化学的分析，已经构建出了GA信号转导途径的模型(Silverstone et al. 2001; Ueguchi-Tanaka et al. 2007; Sun 2010)。最新研究表明，水稻DELLA蛋白SLR1的GRAS结构域能够与Gid1结合以确保蛋白质复合体的稳定，但是这种结合只有在DELLA和VHYNP两个结构域与Gid1结合以后才能发生(Hirano et al. 2010)。DELLA蛋白是受多种植物生长激素调节的生长抑制因子，与生长素、乙烯和光敏色素具有相互作用。DELLA蛋白还能够与水杨酸 ZIM 区域蛋白产生相互作用(Hou et al. 2010)。最新研究发现OsGid1蛋白质的一个环状结构对其与DELLA蛋白的结合具有重要作用(Yamamoto et al. 2010)。一旦 GA 结合受体 GID1 被激活，然后以一种未知的机制降解 DELLA蛋白；同时 GA 和 GA受体结合可以使F-box的蛋白被招募，形成E3-连接酶形式的复合物SKP1CULLINF-box (SCF)，然后通过多泛素化的形式降解 DELLA蛋白，从而解除 DELLA的抑制作用。SCF 复合物由 ASK（拟南芥的 Skp1），Cullin的同源物，Rbx1 的同源物和 F-box 组成。GA促进SCFSLY1结合DELLA蛋白，从而导致 SCFSLY1 SCF 催化 DELLA的多泛素化降解。GA-GID1 诱导的 DELLA蛋白降解可以引起 GA 响应的基因转录重组。在2008 年，Tai-ping Sun 和Toshio Hakoshima 研究小组通过解析GA-GID1 和 GA-GID1-DELLA复合物的晶体结构，破译了识别 DELLA蛋白的机制。 与动物相比，植物能进行持续性的停止、重新生长的重复，这在植物体和生长模式中是灵活多变的。它们持续调控植物来响应外源生长条件的改变。植物通过时刻监控环境条件的信号转导，刺激植物分泌激素来调控内源生长的进程。激素在各自的信号转导途径中，也有协同作用、额外作用和相反的效应。目前，尽管用实验证据来证实激素作用模式仍受到限制，目前已经获得很多初级及次级激素响应信息和它们是如何相互影响。随着研究的深入，我们将对激素如何调控植物生长发育有着更深层次的了解。参考文献Aach H, Bode H, Robinson DG, Graebe JE(1997). ent-Kaurene synthetase is located in proplastids of meristematic shoot tissues. Planta 202:21119 Agharkar M., P. Lomba, F Altpeter., H.N. Zhang., K Kenworthy and T Lange(2007). Stable expression of AtGA2ox1 in a low-input turfgrass (Paspalum notatum Flugge) reduces bioactive gibberellin levels and improves turf quality under field conditions. Plant Biotechnology Journal 5(6): 791-801. Ariizumi T, Steber CM (2007) Seed germination of GA-insensitive sleepy1 mutants does not require RGL2 protein disappearance in Arabidopsis. Plant Cell 19: 791804. Biemelt S, Tschiersch H, Sonnewald U (2004) Impact of altered gibberellin metabolism on biomass accumulation, lignin biosynthesis, and photosynthesis in transgenic tobacco plants. Plant Physiol 135:254265. Sean M. Bulley, Fiona M. Wilson, Peter Hedden, Andrew L. Phillips, Stephen J. Croker and David J. James (2005) Modification of gibberellin biosynthesis in the grafted apple scion allows control of tree height independent of the rootstock. Plant Biotechnology Journal 3: 215223.Busov, V. B. (2003) Activation tagging of a dominant gibberellin catabolism gene (GA 2-oxidase) from Poplar that regulates tree stature. Plant Physiology 132(3): 1283-1291. Cao D, Hussain A, Cheng H, Peng J (2005) Loss of function of four DELLA genes leads to light- and gibberellin-independent seed germination in Arabidopsis. Planta 223: 105113.Cheng H, Qin L, Lee S, Fu X, Richards DE, Cao D, Luo D, Harberd NP, Peng J (2004) Gibberellin regulates Arabidopsis oral development via suppression of DELLA protein function. Development 131: 10551064 Coles JP, Phillips AL, Croker SJ, Garcia-Lepe R, Lewis MJ, Hedden P (1999) Modication of gibberellin production and plant development in Arabidopsis by sense and antisense expression of gibberellin 20-oxidase genes. The Plant Journal17, 547556. Curaba J, Moritz T et al(2004) AtGA3ox2, a key gene responsible for bioactive gibberellins biosynthesis, is regulated during embryogenesis by LEAFY COTYLEDON2 and FUSCA3 in Arabidopsis Plant Physiol 136: 36603669.Dill A, Sun T (2001) Synergistic derepression of gibberellin signaling by removing RGA and GAI function in Arabidopsis thaliana. Genetics 159:777785. Dijkstra C, Adams E, Bhattacharya A, Page AF, Anthony P, Kourmpetli., Power JB, Lowe KC, Thomas SG, Hedden P, AL, Davey MR (2008) Over-expression of a gibberellin 2-oxidase gene from Phaseolus coccineus L. enhances gibberellins inactivation and induces dwarfism in Solanum species. Plant Cell Rep 27:463470 Eriksson, M.E., Israelsson, M., Olsson, O and Moritz, T. (2000) Increased gibberellin biosynthesis in transgenic trees promotes growth, biomass production and xylem ber length. Nat.Biotech., 18, 784788. Fleet, C.M., Yamaguchi, S et al (2003). Overexpression of AtCPS and AtKS in Arabidopsis confers increased ent-kaurene production but no increase in bioactive gibberellins. Plant Physiol. 132: 830-839. Gazzarrini S, Tsuchiya Y, Lumba S, Okamoto M, McCourt P (2004) The transcription factor FUSCA3 controls developmental timing in Arabidopsis through the hormones gibberellin and abscisic acid. Dev Cell 7:373385.Hay A, Craft J, Tsiantis M (2004). Plant hormones and homeoboxes: bridging the gap? Bioessays 26: 395404 Hedden, P and Phillips, A.L (2000). Gibberellin metabolism: new insights revealed by the genes. Trends Plant Sci. 5: 523-530. Helliwell, C.A., Chandler, P.M., Poole, A., Olive, M.R., Dennis, E.S and Peacock, W.J. (2001a). The CYP88A cytochrome P450, ent-kaurenoic acid oxidase, catalyzes three steps of the gibberellin biosynthesis pathway. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98, 2065-2070. Hirano, K., K. Asano, H. Tsuji et al., (2010). Characterization of the Molecular Mechanism Underlying Gibberellin Perception Complex Formation in Rice. Plant Cell 22(8): 2680-2696.Hou, X. L., L. Y. C. Lee, K. F. Xia et al., (2010). DELLAs Modulate Jasmonate Signaling via Competitive Binding to JAZs. Developmental Cell 19(6): 884-894.Itoh H, Tanaka-Ueguchi M, Kawaide H, Chen XB, Kamiya Y, Matsuoka M. (1999). The gene encoding tobacco gibberellin 3-hydroxylase is expressed at the site of GA action during stem elongation and ower organ development. Plant J. 20:1524Kamiya Y, Garcia-Martinez JL(1999) Regulation or gibberellins biosynthesis by light. Current Opinion in Plant Biology 2, 398403. Kaneko M, Itoh H, Inukai Y, Sakamoto T, Ueguchi-Tanaka M, et al (2003) Where do gibberellin biosynthesis and gibberellin signaling occur in rice plants? Plant J. 35:10415 Lee, D. J. (2005). Molecular cloning of GA 2-Oxidase3 from spinach and its ectopic expression in Nicotiana sylvestris. Plant Physiology 138(1): 243-254. Lee DJ, Zeevaart JAD (2002) Differential regulation of RNA levels of gibberellin dioxygenases by photoperiod in spinach. Plant Physiol 130: 20852094. Lee S, Cheng H, King KE, Wang W, He Y, Hussain A, Lo J, Harberd NP, Peng J (2002) Gibberellin regulates Arabidopsis seed germination via RGL2, a GAI/RGA-like gene whose expression is up-regulated following imbibition. Genes Dev 16: 646658. Lester, D.R., Ross, J.J.et al(1999). Gibberellin 2-oxidation and the SLN gene of Pisum sativum. Plant J. 19: 65-73. Li, J., J. Jiang, et al. (2011). Mutation of rice BC12/GDD1, which encodes a kinesin-like protein that binds to a GA biosynthesis gene promoter, leads to dwarfism with impaired cell elongation. The Plant Cell Online 23(2): 628-640. MacMillan J.（2002）. Occurrence of gibberellins in vascular plants, fungi, and bacteria. J. Plant Growth Regul. 20:387442Martin, D.N., Proebsting, W.M., and Hedden, P. (1999). The SLENDER gene of pea encodes a gibberellin 2-oxidase. Plant Physiol. 121: 775-781. Nelson DR, Schuler MA, Paquette SM, Werck-Reichhart D, Bak S. (2004). Comparative genomics of rice and Arabidopsis. Analysis of 727 cytochrome P450 genes and pseudogenes from a monocot and a dicot. Plant Physiol. 135:75672 Oikawa, T., Koshioka, M., Kojima, K., Yoshida, H., and Kawata, M.(2004). A role of OsGA20ox1, encoding an isoform of gibberellin 20-oxidase, for regulation of plant stature in rice. Plant Mol. Biol. 55: 687-700. Olszewski N, Sun T-p, Gubler F (2002) Gibberellin signaling: biosynthesis, catabolism, and response pathways. Plant Cell 14:S61S80. Peng J, Harberd NP (2002) The role of GA-mediated signalling in the control of seed germination. Curr Opin Plant Biol 5: 376381 Piskurewicz U, Lopez-Molina L (2009) The GA-signaling repressor RGL3 represses testa rupture in response to changes in GA and ABA levels.Plant Signal Behav 4: 6365.Reid JB, Ross JJ, Swain SM (1992) Internode length in Pisum: a new, slender mutant with elevated levels of C19 gibberellins. Planta 188: 462467.Ross JJ, Reid JB, Swain SM, Hasan O, Poole AT, Hedden P, Willis CL(1995) Genetic regulation of gibberellin deactivation in Pisum. Plant J 17:241250. Sakai, M., Sakamoto, T. et al (2003). Expression of novel rice gibberellin 2-oxidase gene is under homeostatic regulation by biologically active gibberellins. J. Plant Res. 116: 161-164. Sakamoto, T., Kobayashi, M.et al (2001). Expression of a gibberellin 2-oxidase gene around the shoot apex is related to phase transition in rice. Plant Physiol. 125: 1508-1516. Sakamoto, T., Miura, K.et al(2004). An overview of gibberellin metabolism enzyme genes and their related mutants in rice. Plant Physiol. 134: 1642-1653. Schomburg,F.M.,Bizzell, C.M.,Lee, D.J.,Zeevaart, J.A.,and Amasino,R.M.(2003). Overexpression of a novel class of gibberellin 2-oxidases decreases gibberellin levels and creates dwarf plants. Plant Cell 15: 151-163. Silverstone A.L., Chang C, Krol E, Sun TP (1997) Developmental regulation of the gibberellin biosynthetic gene GA1 in Arabidopsis thaliana. Plant J. 12:919.Silverstone, A. L., H. S. Jung, A. Dill et al., (2001). Repressing a repressor: Gibberellin-induced rapid reduction of the RGA protein in Arabidopsis. Plant Cell 13(7): 1555-1565.Sun, T. P. (2010). Gibberel