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Ezrin在卵巢癌中的表达【关键词】 Ezrin,卵巢癌,转移【摘要】 目的 Ezrin是一种细胞骨架连接蛋白,参与调节肿瘤细胞的生长和转移。本研究通过检测Ezrin在卵巢癌组织中的表达情况，探讨其在肿瘤组织突破包膜及肿瘤转移中的意义。方法 采用免疫组织化学SP法检测23例卵巢恶性上皮性组织中Ezrin的表达。结果 Ezrin在9例包膜完整的卵巢癌组织中有8例异常表达（88.89%）,14例包膜不完整的卵巢癌组织中有8例异常表达(57.14%)。Ezrin在6例有转移的癌组织中有2例表达异常(33.33%)，17例无转移的癌组织中有14例表达异常(82.35%)。结论 Ezrin低表达促进了肿瘤细胞的浸润和转移，提示可以作为肿瘤组织包膜及肿瘤转移的分子标志物。【关键词】 Ezrin 卵巢癌 转移 卵巢癌是女性生殖系统第二大常见恶性肿瘤，多数卵巢癌患者在被诊断时已成为疾病晚期，至今缺少有效的早期诊断方法。埃兹蛋白（Ezrin）是埃兹蛋白、根蛋白和膜突蛋白（ERM）家族成员之一，主要参与上皮细胞中细胞骨架与胞膜之间的连接，具有维持细胞形态和运动、连接粘附分子及调节信号传导等功能。近年来的研究发现，埃兹蛋白在肿瘤细胞中的表达异常，提示其在肿瘤的浸润、转移机制中发挥重要作用。1 材料与方法11 材料来源 收集无锡市妇幼保健院20032004年卵巢存档蜡块,为手术切除及根治标本。标本经10%中性福尔马林固定，常规石蜡包埋。年龄3476岁，平均年龄50.5岁。23例上皮性卵巢癌组织中浆液性囊腺癌3例，粘液性囊腺癌6例，子宫内膜样癌7例，透明细胞癌3例，混合性癌4例；术前均未行化疗和放疗,术后经病理证实的高分化5例，中分化8例，低分化10例；临床分期（1988年FIGO）期15例，期8例。12 方法 采用免疫组织化学（IHC）S-P法，4m厚连续切片。S-P试剂盒购置福州迈新生物技术有限公司，Ezrin单克隆浓缩型抗体购置NeoMarkers公司（1200稀释）。用已知阳性切片做阳性对照，用PBS代替一抗做阴性对照。DAB显色,苏木素复染,中性树胶封片。13 结果判断 Ezrin阳性着色于卵巢癌细胞膜和胞质内，呈棕黄色颗粒，均一弥漫性分布。按染色强度和阳性表达细胞数，参考Mathew1等分级标准：-，无表达；+，50%细胞阳性表达或染色较浅；（+）50%阳性表达且深染。（+）称为强阳性。14 统计学方法 采用统计软件SPSS10.0进行统计学分析,采用2检验,P0.05表明差异有显著性。2 结果21 Ezrin在卵巢癌组织中的表达 Ezrin在部分卵巢癌组织中胞膜呈强阳性表达，如图1（见封四）,也有部分在胞质内呈弥漫性强染色，如图2（见封四）。Ezrin在卵巢癌中有16例强阳性（16/23，69.57%）。22 Ezrin与临床病理参数的关系 Ezrin在临床分期、癌组织是否突破包膜有明显差异性（两者P0.05）,在病理分级上无差异性。在6例有转移的癌组织中有2例强阳性(2/6,33.33%),而在17例无转移的癌组织中有14例强阳性(14/17,82.35%),2检验表明，Ezrin在无转移的癌组织中的异常表达明显高于有转移的癌组织,二者之间差异有明显显著性。见表1。表1 Ezrin与临床病理参数的关系（略）3 讨论侵袭和转移是恶性肿瘤的主要生物学特征，是一个极其复杂、多步骤的过程，包括癌细胞从原发部位脱落，首先涉及到起限制作用的基底膜的降解和穿透,然后侵袭至细胞外间质、血管及淋巴管并增殖形成转移灶。Ezrin属于ERM（Ezrin-radixin-moesin）家族成员之一，其编码基因为villin2，定位于染色体6q25.2-q26.0其C端的结构域与细胞骨架发生作用。在生理状态下，Ezrin参与细胞表面结构如伪造、微绒毛等的形成以及参与细胞间及细胞与基质之间的粘附，信号传导和细胞活动2。Ezrin在不同组织中表达情况不一样。在卵巢浆液性瘤Ezrin表达的丢失提示着预后差3，而在胰腺癌中有Ezrin的高表达上预后不好的表现4。Ezrin对卵巢癌细胞的浸润是必需的,Ezrin表达是卵巢癌浸润生长的独立危险因素，在SKOV-3细胞中用RNA干扰技术阻止Ezrin表达后，SKOV-3细胞的浸润性生长受到抑制5。体外细胞培养表明，Ezrin的缺失与肿瘤的运动能力和侵袭性增加有关，并可影响细胞表面的粘附分子而促进肿瘤的浸润转移6。本研究数据表明，Ezrin在包膜完整的卵巢癌组织高表达（88.89%）,低于包膜不完整的卵巢癌组织(57.14%),两者有明显的差异性。Ezrin在无转移的癌组织中的异常表达明显高于有转移的癌组织,二者之间差异有明显显著性。Ezrin低表达促进了肿瘤细胞的浸润和转移。与Kobel M等5报道的Ezrin表达水平较低时，肿瘤细胞的浸润受到抑制不符。可能是由于某些涉及到Ezrin的磷酸化激活机制的失调，最终导致了Ezrin功能增强，从而使肿瘤吞噬及转移能力增强，Laclef C等报道Rho因子-GTP磷酸酶在肿瘤转移过程中处于过表达状态7，而Rho因子-GTP磷酸酶是激活Ezrin的重要因子。因此，在肿瘤转移过程中，Ezrin不一定表达增加，但其功能会增强，这说明Ezrin在肿瘤转移过程中有着更复杂的作用，更多的研究将有助于澄清Ezrin在肿瘤转移过程中的角色。参考文献1 Mathew J，Hines JE，Obafunwa JO，et al.CD44 is expressed in hepatocellar carcinomas showing vascular invasionJ.J Pathol,1996,179(1):74-832 Martin TA，Harrison G，Mansel RE，et al.The role of the CD44/Ezrin complex in cancer metastasisJ.Crit Rew Oncol Hematol,2003,46:165-863 Moilanen J，Lassus H，Leminen A，et al.Ezrin immunoreactivity in relation to survival in serous ovarian carcinoma patientsJ.Gynecol Oncol,2003,90:2734 Akisawa N，Nishimori I，Iwamura T，et al.High levels of ezrin expressed by human pancreatic adenocarcinoma cell lines with high metastatic potentialJ.BiochemBiophys Res Commun,1999，258(2):395-4005 Kobel M，Gradhand E，Zeng K，et al.Ezrin promotes overian carcinoma cell invasion and its retained expression predicts poor prognosis in ovarian carcinomaJ.Int J Gynecol Pathol,2006,25(2):121-1306 卢航青，郑杰.埃兹蛋白：生物学特征及其在肿瘤转移中的作用J.细胞生物学杂志，2005，27：257-