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文档简介
选修1 考纲导学 1 微生物的分离和培养 2 某种微生物数量的测定 3 培养基对微生物的选择作用 专题2微生物的培养与应用 微知识小题练 微考点大讲堂 微考场大收获 微知识一微生物的实验室培养1 培养基 1 概念 人们按照微生物对 的不同需求 配制出供其生长繁殖的 营养物质 营养基质 固体培养基 2 无菌技术 1 含义 指在培养微生物的操作中 所有防止杂菌污染的方法 2 关键 3 措施 防止外来杂菌的入侵 煮沸 灼烧 高压蒸汽 灭菌 倒平板 单个细胞 平板划线法 稀释涂布平板法 固体斜面培养基 甘油瓶 稀释涂布平板法 培养基 c1酶 cx酶和葡萄糖苷酶 刚果红染色法 是否产生透明圈 纤维素 纤维素酶 1 消毒的原则是既杀死材料表面的微生物 又减少消毒剂对细胞的伤害 2 在配制培养基时 除满足营养需求外 还应考虑ph o2及特殊营养物质的需求 3 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素 4 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 若指示剂变蓝 则说明筛选到分解尿素的细菌 5 纤维素酶是一类酶 它是由c1酶 cx酶和葡萄糖苷酶组成的 6 在选择培养纤维素分解菌的实验中 选择培养的目的是增加纤维素分解菌的数量 1 培养基的种类 1 按物理状态分类 2 按功能分类 2 消毒和灭菌的比较 3 纯化微生物的接种方法 4 平板划线操作的注意事项 1 操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要进行火焰灼烧灭菌 划线操作结束时 仍需灼烧接种环 每次灼烧目的如下表 2 灼烧接种环 待其冷却后才能伸入菌液 以免温度太高杀死菌种 3 第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始 能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少 最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落 4 划线时最后一区不要与第一区相连 5 划线用力大小要适当 防止用力过大将培养基划破 例1 下列有关细菌培养的叙述 正确的是 a 在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌b 在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长c 向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长d 用固体培养基可对微生物进行分离 解析 单个菌落中只含有一种细菌 青霉素能抑制细菌生长 而对真菌没有影响 破伤风杆菌是厌氧型细菌 通入氧气会抑制其生长 答案 d 对点微练1下列无菌操作中 错误的是 a 无菌操作的目的是防止杂菌污染b 用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒c 实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行d 玻璃器皿 吸管 培养皿 可用酒精擦拭 解析 对操作者应用较温和的方法进行消毒 实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行 防止瓶口的微生物污染培养基 对无菌操作用到的玻璃器皿要用干热灭菌的方法彻底消灭其中的微生物 用酒精擦拭不能达到目的 答案 d 对点微练2某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物a 研究人员用化合物a 磷酸盐 镁盐以及微量元素配制的培养基 成功筛选到能高效降解化合物a的细菌 目的菌 实验的主要步骤如图所示 请分析回答下列问题 1 培养基中加入化合物a的目的是 这种培养基属于 培养基 筛选目的菌 选择 2 目的菌 生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的 实验需要振荡培养 由此推测 目的菌 的代谢类型是 3 在上述实验操作过程中 获得纯净 目的菌 的关键是 4 转为固体培养基时 常采用平板划线的方法进行接种 此过程中所用的接种工具是 操作时采用 灭菌的方法 5 实验结束后 使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉 这样做的目的是 化合物a 异养需氧型 防止外来杂菌污染 接种环 灼烧 防止造成环境污染 6 某同学计划统计污水池中 目的菌 的总数 他选用10 4 10 5 10 6稀释液进行平板划线 每种稀释液都设置了3个培养皿 从设计实验的角度看 还应设置的一组对照实验是 此对照实验的目的是 解析 1 该实验的目的是筛选 目的菌 故培养基中添加化合物a起选择作用 2 微生物正常生长需要碳源 氮源 无机盐等 由培养基中添加的物质种类知 化合物a应该给微生物生长提供碳源 氮源 培养过程需振荡 说明目的菌是需氧型微生物 6 统计污水池中的 目的菌 时应设置空白对照 以用于检验培养基是否灭菌严格 不接种的空白培养基 检验培养基制备过程中是否被杂菌污染 1 选择培养基的选择方法 1 在培养基中加入某种化学物质 例如 加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌 加入高浓度的食盐可以分离出金黄色葡萄球菌 注意 这里的加入是在主要营养成分完整的基础上加入 2 改变培养基中的营养成分 例如 缺乏氮源时可分离出固氮微生物 石油作为唯一碳源时可分离出消除石油污染的微生物 3 改变微生物的培养条件 例如 将培养基置于高温环境中培养 可得到耐高温的微生物 2 筛选分解尿素的细菌与分解纤维素的微生物的比较 例2 下列关于分离纤维素分解菌的实验操作有误的是 a 经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上b 选择培养这一步可省略 但得到的纤维素分解菌会较少c 可通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量d 对照组可用等量的纤维素分解菌培养液涂布到不含纤维素的培养基上 解析 经选择培养后 需经稀释后才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 答案 a 对点微练3用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时 可以用相同的培养基 都需要使用接种针进行接种 都需要在火焰旁进行接种 都可以用来计数活菌a b c d 解析 平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基 故 正确 平板划线法采用接种针进行操作 而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作 故 错误 纯化时 要进行无菌操作 需要在火焰旁接种 避免空气中的微生物混入培养基 故 正确 平板划线法一般用于分离而不是计数 故 错误 答案 c 对点微练4 2014 四川卷 有机农药苯磺隆是一种除草剂 长期使用会污染环境 研究发现 苯磺隆能被土壤中某些微生物降解 分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲 乙所示 1 微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源 水 四类 该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源 其原因是 2 与微生物培养基相比 植物组织培养的培养基常需添加生长素和 这些植物激素一般需要事先单独配制成 保存备用 3 纯化菌株时 通常使用的划线工具是 划线的某个平板培养后 第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌 第二划线区域所划的第一条线上无菌落 其他划线上有菌落 造成划线无菌落可能的操作失误有 4 为探究苯磺隆的降解机制 将该菌种的培养液过滤离心 取上清液做图乙所示实验 该实验的假设是 该实验设计是否合理 为什么 氮源和无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖 细胞分裂素 母液 接种环 接种环灼烧后未冷却 划线未从第一区域末端开始 目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质 不合理 缺少空白对照 解析 1 微生物生长所需要的主要营养物质包括 碳源 氮源 水和无机盐 使用选择培养基是因为它是允许特定的微生物生长和增殖 同时又能抑制或阻止其他微生物生长和增殖的培养基 该实验所用培养基只有能利用苯磺隆的微生物才能正常生长和增殖 2 植物组织培养常需要添加的植物激素有生长素和细胞分裂素 调整二者的比例可以诱导脱分化和再分化 ms培养基的成分一般先分别配制成母液备用 3 平板划线法接种时常使用接种环划线 第二区域只有第一条线无菌落 而其他的划线却有菌落 很可能是因为接种环在灼烧后未冷却 第一次划线时将菌种烫死 而后接种环冷却 能正常划线 也可能是第一次划线时划线未从第一区域末端开始 使接种环上无菌种 4 题中实验将取得的菌种培养液过滤后离心 上清液加入蛋白酶处理后 测得其对苯磺隆的降解率 意为假设菌种能产生降解苯磺隆的蛋白质类酶 若用蛋白酶处理后 可使该酶分解 苯磺隆降解率下降 则假设成立 但由于缺乏空白对照 不能比较蛋白酶处理是否降低苯磺隆降解率 该实验不能得出相应结论 1 2014 天津理综 mrsa菌是一种引起皮肤感染的 超级细菌 对青霉素等多种抗生素有抗性 为研究人母乳中新发现的蛋白质h与青霉素组合使用对mrsa菌生长的影响 某兴趣小组的实验设计及结果如下表 下列说法正确的是 a 细菌死亡与否是通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定的b 第2组和第3组对比表明 使用低浓度的青霉素即可杀死mrsa菌c 实验还需设计用2 g ml青霉素做处理的对照组d 蛋白质h有很强的杀菌作用 是一种新型抗生素 解析 细菌是原核细胞 无细胞核 a错误 第2组和第3组对比说明使用低浓度青霉素和高浓度蛋白质h可杀死mrsa菌 b错误 本实验缺少2 g ml的对照组 c正确 抗生素是由微生物产生的具有抗菌作用的物质 而蛋白质h是乳腺细胞产生 不属于抗生素 d错误 答案 c 2 2014 全国卷 为了调查某河流的水质状况 某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量 并进行了细菌分离等工作 回答下列问题 1 该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量 在涂布接种前 随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间 这样做的目的是 然后 将1ml水样稀释100倍 在3个平板上用涂布法分别接入0 1ml稀释液 经适当培养后 3个平板上的菌落数分别为39 38和37 据此可得出每升水样中的活菌数为 2 该小组采用平板划线法分离水样中的细菌 操作时 接种环通过 灭菌 在第二次及以后的划线时 总是从上一次划线的末端开始划线 这样做的目的是 检测培养基平板灭菌是否合格 3 8 107 灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 3 示意图a和b中 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果 4 该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀 一部分进行静置培养 另一部分进行振荡培养 结果发现 振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快 分析其原因是 振荡培养能提高培养液中 的含量 同时可使菌体与培养液充分接触 提高 的利用率 b 溶解氧 营养物质 3 2014 新课标 卷 植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解 回答下列问题 1 分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶 该酶是由3种组分组成的复合酶 其中的葡萄糖苷酶可将 分解成 2 在含纤维素的培养基中加入刚果红 cr 时 cr可与纤维素形成 色复合物 用含有cr的该种培养基培养纤维素分解菌时 培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 纤维二糖 葡萄糖 红色 透明圈 3 为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落 某同学设计了甲 乙两种培养基 成分见下表 注 表示有 表示无 据表判断 培养基甲 填 能 或 不能 用于分离和鉴别纤维素分解菌 原因是 培养基乙 填 能 或 不能 用于分离和鉴别纤维素分解菌 原因是 不能 液体培养基不能分离单菌落 不能 乙培养基中没有纤维素 不会形成cr 纤维素红色复合物 即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌 4 2014 江苏高考节选 为了获得 胡萝卜素产品 某小组开展了产 胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验 请回答下列问题 1 实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是 为了减少灭菌后器皿被污染 灭菌前应该 2 为了筛选出酵母菌 培养基中添加了青霉素 其目的是 干热灭菌和湿热灭菌 高压蒸汽灭菌 用牛皮纸 报纸 包扎器皿 抑制细菌 放线菌 的生长 3 右图是灭菌锅及其局部剖面示意图 图中甲 乙 丙指示的依次是 填序号 安全阀 放气阀 压力表 放气阀 安全阀 压力表 安全阀 放气阀 温度表 放气阀 安全阀 温度表 4 为了将分离到的菌株纯化
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