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文档简介

急性呼吸窘迫综合征 Acuterespiratorydistresssyndrome ARDS 中南大学基础医学院邹江 理论复习 ARDS的定义ARDS的病因 定义 多种原发病过程中 因急性肺损伤引起的急性呼吸衰竭 以进行性呼吸困难和顽固性低氧血症为特征 病因 直接肺损伤因素 严重肺部感染 肺挫伤 吸入有毒气体等间接肺损伤因素 肺外严重感染及脓毒症 严重胸外创伤 急重症胰腺炎等 实验目的 复制急性呼吸窘迫综合征的实验动物模型观察急性呼吸窘迫综合征家兔的表现 并探讨其发生机制 实验动物 家兔 性别 体重 实验分组 生理盐水组 0 2ml kg生理盐水 NS 经家兔耳缘静脉注入油酸组 0 2ml kg油酸 OA 经家兔耳缘静脉注入 1 称重2 固定 背部交叉仰卧位固定3 记录呼吸曲线 张力换能器BL 410系统 实验步骤 4 给药 耳缘静脉注入 油酸组 0 2ml kg油酸 缓慢 2分钟注射完 生理盐水组 0 2ml kg生理盐水 5 给药后记录家兔呼吸情况 1小时后处死家兔6 在甲状软骨下缘2 3cm行颈部正中切口 分离气管后夹闭并游离气管和食道 开胸 小心取出心脏和肺 细心剪去食管 心脏及肺门周围组织 观察肺外观 并称重计算肺系数肺系数 肺重 g 体重 kg 7 肺泡灌洗 bronchoalvagelavage BAL 方法 将橡皮管插入气管后用线固定 然后用注射器将10ml生理盐水正压缓慢注入肺内 反复抽吸三次 回收灌洗液 灌洗液于3000rpm min 离心15min 细胞沉淀用1ml生理盐水重悬8 取10ul重悬液抹片 染色 显微镜下观察细胞细胞种类 注意事项 油酸注射应平稳在2分钟注完 并保证全部注入静脉内 溢出或注入皮下组织均可造成模型复制失败切断气管前注意先夹闭 避免血液 组织液等进入影响实验结果分离肺脏时勿损伤肺表面 以免肺内水肿液外流 影响肺系数的准确性和肺泡灌洗液的收集 实验结果 生理盐水组 油酸组 呼吸幅度与频率 肺大体观颜色质量 支气管肺泡灌洗液细胞数目与分类 指标 分组 发绀 0 15 30 60 给药前 给药后 肺系数 推片 染色 显微镜下观察并描述涂片 低倍镜计数高倍镜分类 细胞涂片的制作与白细胞染色分类 推片 取一滴重悬细胞液置于载玻片的一端 左手持载玻片 右手以边缘平滑的推片的一端从悬液前方后移接触悬液 悬液即沿推片散开 然后按推片与载片夹角保持30 45度平稳地向前移动 载片上保留下一层薄膜 涂片制成后可手持玻片在空气中挥动 使细胞膜迅速干燥 以免细胞皱缩 染色 取几滴瑞士染色液加在涂片上 2分钟后 用自来水洗净 将玻片风干涂片观察 显微镜下观察涂片 对比描述细胞数目和细胞种类 正常大鼠的肺切片HE染色 油酸诱导的大鼠肺切片HE染色 讨论 本次试验制备的家兔急性呼吸窘迫综合征的实验动物模型是否成功 静脉注射油酸为什么会引起急性呼吸窘迫综合征 急性呼吸窘迫综合征的治疗措施有
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