生物学分析与测试实验(植物生理学).doc

实验3植物组织水势的测定（小液流法）一、原理：植物组织与外界溶液之间发生水分交换由其水势差决定。w细内w细外时，水分外流，外液稀释，比重变轻，小液流上升。w细内7.1），各取15粒玉米、小麦吸胀种子插入培养皿中种胚向下，在30恒温箱中赔养1h后，观察，计算发芽率。四、纸上荧沟法：1、 原理：种子中含有荧光物质，死种子荧光物质可透出，利用对荧光物质的不同透性来区分种子的死活，方法简单，特别是对十字花科植物的种子，尤为适用。2、 材料：油菜种子（十字花科）3、 步骤：放1张湿润滤纸于培养皿中，取30粒吸胀种子放在打格的滤纸上，处理完毕,放在实验桌上,1h后，在紫外光下检测。五、计算：六、分析：实验14不良环境对植物的伤害一、原理：植物组织在逆境胁迫下，原生质膜往往是一个重要的伤害位点，根据膜透性变化的大小可反映组织受害的程度。二、材料：白菜叶片(或水稻,小麦幼苗)三、操作步骤：1、 用打孔器在干净无病害的白菜叶片上打圆孔60片，分为三组，每组20片，(或取水稻幼苗,尽量不要伤害根系,用镊子除去幼苗上残留的胚乳,用蒸馏水漂洗数次,以除去伤口上的物质,然后以10棵为一组,共三组)分别放入盛有20ml去离子水的三个烧杯中，并分别测电导率。2、 将一杯摆入40恒温箱中，一杯放入0-2的冰箱中，一杯放在实验桌上。3、 1h后测定电导率4、 另外各取0.5ml处理液于试管中加2ml蒽酮试剂在热水浴中15min，观察。四、结果：五、分析：实验16植物缺水程度的测量定一、原理磺基水杨酸能专一地提取脯氨酸，脯氨酸与茚三酮在酸性条件下加热反应生成红色物质，颜色深浅与脯氨酸含量成正比二、材料：鹅观草（野燕麦或水稻叶片）三、操作步骤：1、 游离脯氨酸的提取：称0.1g烘干叶片剪碎放入10ml试管中加5ml3磺基水杨酸溶液，加盖沸水水浴提取15min取出用自来水冷却，摇动半分钟为脯氨酸提取液。2、 显色：取2ml提取液于10ml试管，加入冰醋酸2ml，2.5%茚三酮2ml，于沸水中水浴20min，取出来冷却至室温。3、 甲苯萃取与比色：在上述试管中加入4ml甲苯摇匀，静置20min，分层，用吸管吸取上层（红色）甲苯液于比色杯中，在520nm下测定OD值，以3%磺基水杨酸液作参比（取2ml 3%磺基水杨酸，2.5%茚三酮试剂2ml，摇匀后在沸水中水浴20min, 取出冷却至室温，加4ml甲苯摇匀，静置20分钟分层，吸取上液于比色皿中做参比）。(比色皿要清洁,内壁不能有水珠,加样前宜用甲苯润洗).（5c106）样品干重四、计算：从标准曲线上查出样品液中Pro的浓度，然后计算Pro的含量。Pro(%) 100(c为样品中Pro浓度，单位ug/ml)。五、分析：实验17丙二醛的含量测定一、原理：植物器官衰老或在逆境下，细胞内清除超氧自由基的能力降低，积累的超氧自由基使质膜的脂质双分子层中不饱和键氧化分解，生成丙二醛物质、丙二醛与膜上蛋白质大分子结合成交联物，使细胞透性加大，最终导致细胞伤害或死亡。本实验利用丙二醛与硫代巴比妥酸反应生成粉红色物质，经比色分析测定，可知丙二醛相对含量。二、材料：白菜叶片三、操作步骤：1、 称1g叶片，用预冷的0.05mol磷酸缓冲液5.0ml研磨成匀桨倒入5ml试管中。2、 用每分钟4000转离心20min,取上清液1.5ml于10ml试管中,加入0.5%硫代巴比妥酸溶液2.5ml,混合置沸水中加热15min后迅速冷却，再倒入5ml试管中，用每分钟4000转离心10min。3、 取上清液在分光光度计上分别用532nm和 600nm两个波长处测定OD值，以0.5%硫代巴比妥酸溶液作参比