CD3200中文手册-e第三单元.doc

操作说明书 第3单元概述CELL DYN 3200用于测量、计数和计算血液学参数的原理,在本单元“样本分析循环概述”和“介绍流式细胞计数”中论述。随后的内容讨论了针对白细胞、红细胞、血小板、和HGB的测量步骤。在最后的子单元“操作信息与数据报警”中，讨论了由于所测得的参数超出先前限定的范围之外、样本变态、测量过程中发生干扰、或者探测到变态成分时由设备生成的报警。质量控制方法在第11单元“质量控制”中论述。网织红细胞与网织红细胞报警在第14单元“网织红细胞程序包”中论述。在CELL DYN 3200中所使用的两个独立的测量通道是： 用于测定白细胞、NOC、和红细胞 / 血小板数据的光学通道。 用于测定HGB的血红蛋白通道在每一次设备循环过程中，在测量每个参数之前，样本都经过吸样、稀释和混合的步骤。 注意：在R红细胞和F白细胞模式中会发生报警增多的现象。吸样在CELL DYN 3200上有两种模式的全血吸样。操作人员从RUN（运行）屏幕中选择吸样模式。Open Sampler Mode（开放式进样装置模式）用于从一个已经打开的并置于开放式吸样针下的收集管中吸样。Closed Sampler Mode（封闭式进样装置模式）用于通过穿刺试管管塞的方式直接从一个闭合的收集管内吸入血液样本。吸样剂量为：开放式模式 150 L 10%封闭式模式(CS) 240 L 10%自动进样装置(SL) 240 L 10%一旦选定了吸样模式，凭借真空 / 压力作用全血样本被吸入至分液阀。位于分液阀上流端的一个超声波传感器会在血样进入分液阀之前检查其完整性。位于分液阀下流端的一个发光二极管传感器会检查血样以确保正确剂量的血样被传送通过分液阀。样本分析循环概述注意：本文中列出的样本和试剂剂量表示象征性的数值。设备间微小的差异可能引起这些剂量会随之改变。这些差异由出厂设置的内部稀释因素所弥补。吸样以开放式模式或者封闭式模式吸样并将其传送至分液阀。开放式模式中的样本剂量为150 L。封闭式模式中的样本剂量为240 L。样本片断为了分离三份剂量的吸入全血样本旋转分液阀。三份剂量为：20 L 用于白细胞稀释1.67 L 用于红细胞/血小板 稀释12 L 用于血红蛋白 稀释红细胞/血小板 分析 1.稀释液 / 鞘状注射器将2.79 mL的稀释液分配至分液阀，穿过分液阀与1.67 L剂量的红细胞/血小板一起被转移至红细胞混合装置内。2.然后将片断和稀释液传送至红细胞 / 血小板混合装置，在那里以漩涡作用混合稀释液。最终稀释液的比例为1:1675。3.样本转移泵将红细胞 / 血小板稀释液从红细胞 / 血小板混合装置中转移至光学流动池样本入口喷嘴处。4.以恒定压力下在鞘液池内将稀释液 / 鞘液试剂引入激光流式细胞仪。5.随后，样本测定注射器将24 L的红细胞 / 血小板稀释液注入流动池内，其注射压力（和速度）低于稀释液 / 鞘液试剂的压力（和速度）。6.围绕在红细胞 / 血小板稀释液周围的鞘液速度越高，汇集红细胞 / 血小板稀释液的流动池的特定几何学意义越明显，因此即可以逐个计数个体流动池。7.一束激光聚焦在流动池上。当样本流截断激光束时，在0度、10度和90度处测量被分散的光束用于红细胞，在0度、10度处测量用于血小板。血红蛋白分析1.稀释液 / 鞘状针管将1.7 mL的稀释液分配至分液阀，穿过分液阀与12 L剂量的HGB一起被转移至HGB流动池内。2.在稀释液将HGB液样转移至HGB流动池后，HGB溶解针管将0.9 mL 的HGB 溶解产物分配至行内。HGB溶解产物的入口点位于分液阀和HGB流动池之间。3.将片断、溶解产物和稀释液传送至HGB流动池，在那里以漩涡作用混合稀释液。最终稀释液的比例为1:218。4.将一个低能量发光二极管连在HGB流动池上以测量555纳米处的光吸收值。该吸收值与样本的HGB浓度成比例。白细胞 分析按照下列方法视觉分析白细胞：1.白细胞溶解针管将0.973 mL 的白细胞溶解试剂分配至分液阀，穿过分液阀与20 L的 白细胞液样一起被转移至白细胞 混合装置。2.然后将片断和试剂传送至白细胞，在那里以漩涡作用混合稀释液。最终稀释液的比例为1：50。经稀释的样本在混合舱内停留14秒钟以供红血球溶解。3.样本转移泵将白细胞从白细胞混合装置内转移至激光流式细胞仪样本入口喷嘴处。4.以恒定压力下在鞘液池内将稀释液 / 鞘液试剂引入激光流式细胞仪。5.随后，样本测定注射器将46.5 L的白细胞稀释液注入流动池内，其注射压力（和速度）低于稀释液 / 鞘液试剂的压力（和速度）。6.围绕在白细胞稀释液周围的鞘液速度越高，汇集白细胞稀释液流的流动池的特定几何学意义越明显，因此即可以计数个体流动池。7.一束激光聚焦在流动池上。当样本流截断激光束时，在分别位于前向（0度和10度）以及测向（90度和90度直角）位置上的四个不同的探测器测量由流动池分散的光束。脆性与阻溶性红细胞当在正常的患者模式下运行样本时，如果显示F白细胞报警时操作人员可能怀疑出现了脆性，或者如果显示R红细胞和N红细胞报警时操作人员可能怀疑出现了阻溶性红细胞。在样本中含有脆性或者阻溶性红细胞的情况下，一种替代方法可以用于测量白细胞。这种方法的结果被称为核光学计数（NOC）。NOC测量来源于HGB稀释液，如下文所述。附加说明请参考本单元后面段落中的“核光学计数”和“阻溶性红细胞”中的内容。在标本类型屏幕上有两个不同的关键标签，一个用于脆性，另一个用于阻溶性红细胞。有关可应用的标本类型讨论请参考运行菜单软键，子单元：第5单元“操作说明”中的标本类型。当选择了脆性标本类型时，在数据记录器中会同时报告NOC和WOC。NOC数值会在运行屏幕和实验室工作表上白细胞的形式报告。当选择了阻溶性红细胞标本类型时，在数据记录器中会同时报告NOC和WOC。NOC或者WOC会在运行屏幕和实验室工作表上白细胞的形式（取决于算法化决策）报告。注意：当选择了QC标本类型时，在数据记录器中会同时报告NOC和WOC。NOC或者WOC会在运行屏幕和实验室工作表上白细胞的形式（取决于算法化决策）报告。针对脆性和阻溶性红细胞所作的分析具体如下：1.在测量HGB样本之后（参考本单元前面所述的血红蛋白分析），样本转移泵将经过稀释的溶液从HGB流动池中转移至激光流式细胞仪样本入口喷嘴处。2.以恒定压力下在鞘液池内将稀释液 / 鞘液试剂引入激光流式细胞仪。3.随后，样本测定注射器将140 L的HGB稀释液注入流动池内。4.围绕在HGB稀释液周围的鞘液速度越高，汇集白细胞稀释液流的流动池的特定几何学意义越明显，因此即可以计数个体流动池。5.一束激光聚焦在流动池上。当样本流截断激光束时，使用0度探测器测量被流动池分散的光束。计数溶解细胞的核子作为NOC结果。6.脆性和QC标本类型中的白细胞分析步骤如同本单元前面所述的白细胞分析中的内容。7.阻溶性红细胞模式中的白细胞分析步骤如同上文白细胞分析中所述，但是不同之处在于经稀释的白细胞片断在白细胞混合装置内另外溶解15秒钟。所显示的结果所有数据被传送至数据模块用于分析。结果参数的结果经计算后显示在运行屏幕上。同时结果还被储存在称作数据记录器的记录模式中。冲洗设备1. 吸样步骤中残留的样本片断被冲洗入2号废物舱内。2. 白细胞和红细胞混合装置内的残留的片断被冲洗入3号废物舱内。3. 送至激光流式细胞仪的片断被冲洗入1号废物舱内。漂洗设备1. 使用稀释液 / 鞘液从内部和外部漂洗开放式吸样探针。2. 在关闭式模式中，使用稀释液 / 鞘液从内部和外部漂洗针头。3. 使用稀释液 / 鞘液漂洗白细胞和红细胞/血小板混合装置。4. 使用稀释液 / 鞘液漂洗激光流式细胞仪和样本行试管。5. 使用稀释液 / 鞘液漂洗HGB流动池。 流式细胞计数 介绍流式细胞计数CELL-DYN 3200运用了流式细胞计数的技术分析红细胞/血小板、白细胞、和NOC总数。本单元对流式细胞计数的原理进行了简要介绍。流式细胞计数是一个步骤，其中在一个单一纵列内由一条液流产生的个体细胞和其他生物微粒穿过一道光束。一个或数个传感器通过测量光束的丢失或者分散从而获得细胞或者微粒的物理或化学特点。流式细胞计数能够对大数量的细胞进行快速筛选并且在单一细胞水平上提供定量细胞分析。流式细胞计数的基本成分包括：一个样本收集器和传送器一个流动系统以汇集样本流向一个光源和聚焦光学器件光束收集器、信号探测器、和偏光器数据收集和储存数据显示和分析 1 直角（90和90D）分散光探测器2 激光管3 前倾角（0和10）光探测器4 激光流式细胞仪5 激光图3.1 光工作台使用光工作台探测光工作台组件包括构成流式细胞计数的成分。描述见图3.1。光工作台的主要目的是当光束穿过流动池时探测被流动池分散的光束。探测步骤在本单元中论述。光源是一束垂直偏振的10mW 氦氖激光，其波长为632.8 nm。该激光束穿过一个圆柱形镜头后，其形状由圆形改变为椭圆形。然后该光束被引导并穿过一个125 m 的裂缝，该裂缝将光束较微弱的外缘阻挡。这一过程产生了一个波长大约为80m、强度均匀的光束，使池流可以轻度徘徊在流动池内但是仍然暴露在相同的光照强度下。一个成像镜头将聚焦激光束集中在石英流动池上。样品转运注射器将不同的样本稀释液注入激光流式细胞仪内的鞘液流中。以液体流动学的方式将样本聚焦于直径大约为30 m的小液流中。这一经过聚焦的液流使经过稀释的池排列成单一的纵列穿过光束，这样就可以在探测器的传感区域内一次一个地探测细胞。由于小池的平均直径小于经过聚焦的光束，所以小池不会过多分散激光束。如果残留的未经分散的光束可以达到0和10 （前倾）探测器，那么它将使电子饱和。因此，一个遮蔽条阻挡了0 1 前倾未经分散的光束。前倾的分散角被引入一个穿孔镜。0（1 3） 分散光穿过镜子达到0硅光敏二极管探测器。10（7 10 或者更窄的角度）分散光经镜子折射偏离到达10硅光敏二极管探测器。直角分散光被引入至一个700 m的裂缝，该裂缝阻挡了来自于流动池壁的分散光。然后，一个光束分离器将直角分散光分成两份。一份光被引入至90 PMT。剩余部分被引入穿越一个水平偏振器。只有改变了偏振作用（去偏光）的光方可穿过偏光器到达90D PMT（使用PMT是因为相对于此角度没有光线分散）。每个探测器收集的光信号被转化为电子信号或者脉冲。这些脉冲根据强度进行数字化处理后被分类为256个通道供每个角度的光束测量之用。如果一个脉冲超出了0 和10探测器的硬件阈值区间，那么池计数器会计数该脉冲并储存以供进一步评估之用。低于该阈值区间的脉冲不包括在计数之内。来自于每个探测器上的信息以列表模式被收集。这种格式储存了来自于每个通道的四维信息。然后，该数据用于测定WOC鉴别和红细胞、血小板、以及NOC计数。以列表模式的格式存储在软盘上的数据可以随时被修改为分散点图或者经修改后以不同的运算法则分析。 激光流式细胞仪在流式细胞计数中，细胞悬浮液经由一个样本试管从混合装置内被转移至一个特殊的带有小型开启顶端的流动舱内。然后，悬浮液被注入一股快速移动、不含细胞的液体（鞘液）中。由于不同的液体流动速率不同，因此它们彼此不会混合。流动细胞的特定几何学以及鞘液的流速迫使细胞进入单一的纵列中。这一过程叫做流体动力学聚焦。（激光流式细胞仪见图3.2）当细胞进入视野剂量（特定的观测区域）时，它们截断了激光束。不同类型的细胞以不同的角度分散光束，从而生成有关细胞大小、内部结构、粒度和表面形态学方面的信息。由细胞产生的光学信号经过探测后被传送至电子脉冲，后者被计算机储存并分析。流式细胞计数通常测量两个分散角度。前倾角光分散测量细胞的大小。侧角（直角）光分散测量细胞表面和内部结构，但是最主要地还是测量内部粒度。结合来自于这两种分散测量方法的信息所获得的细胞种属间的鉴别要比单一地使用其中任何一种方法更加精确。（图3.3为CELL-DYN 3200测量的光分散举例）1 进样口2 鞘液流3 样本流4 聚焦激光束5 不同角度的分散光 图3.2 激光流式细胞仪白细胞测量概述光学通道用于测定白细胞数据。在样本吸收过程中，20 L 的样本在分液阀中被分割以供白细胞测量。白细胞针管将0.973Ml的白细胞溶解产物分配至分液阀。然后将样本和溶解产物转移至白细胞混合装置内，在那里以漩涡作用混合稀释液，结果稀释液比例为1:50。样本转移泵将白细胞稀释液从混合装置中转移至激光流式细胞仪内的样本入口喷嘴处。同时，以恒定压力下在鞘液池内将鞘液试剂引入激光流式细胞仪内的进鞘液口处并且注入池内。在此同一时刻，样本测定注射器将46.5 L的白细胞稀释液注射入鞘液流中。然后样本流以流体动力学的方式聚焦细胞，使其排列成单一的纵列穿过光学流动池，后者是一个在光学上清澈透明的石英舱。一束垂直偏振的氦氖激光作为光源。设备测量： 两种类型的前倾角光分散（1 至 3，参考为0，7至11，参考为10或更窄的角度） 两种类型的直角（侧）光分散（70至110，参考为90，70至110去极化，参考为90D）本方法参考MAPSS（针对多角度偏振分散分离）技术。这四种测量方法的不同组合可以用于分类白细胞亚群并提供形态学报警。 1. 聚焦激光束2. 0 分散3 .10 分散4. 90 分散5 .90D 分散图3.3 白细胞光分散图3.3举例说明了在白细胞光学测量步骤中分散光的测量。通过列举0 通道内超过硬件阈值范围发生数目从而测定白细胞计数。来自于所有四个测量方法中的信息用于将白细胞分成五个亚群：嗜中性粒细胞淋巴细胞单核细胞嗜曙红细胞嗜碱性粒细胞按照分散点状图以图像的形势呈现白细胞数据。按照操作人员的要求，还可以两种柱状图的形式呈现白细胞数据。白细胞试剂与CELL-DYN 3200设备一同使用的白细胞试剂是CELL-DYN 白细胞 溶解产物。它是白细胞分析的完整部分之一。稀释于试剂中的白细胞包含接近于其自然状态下的细胞完整性。由于嗜碱性颗粒的吸湿特点嗜碱性结构会有轻度改变。该试剂同样可以改变红细胞。红细胞的渗透压高于该试剂的渗透压。因此，红细胞中的血红蛋白从细胞中弥散出来，而试剂中的水分弥散入细胞内。细胞膜仍保持完整，但是现在红细胞具有与鞘液相同的折射指数，所以使其在激光下无法辨认。白细胞 鉴别光分散信息以绘图的形式呈现在分散点状图表格中。（还可以按照要求，以柱状图的形式呈现数据。）每一个经过分析的细胞以点的形式呈现在分散点状图中。通过在指定的X和Y轴的通道信息交会部位描绘出测定时刻的点。例如：如果一个细胞落在X轴的通道50上和Y轴的通道50上，那么该点即为这两个通道的交会点。可以不同的结合方式描绘分散信息以产生不同的信息。CELL-DYN 3200 使用了分散点状图以将白细胞鉴别为五个亚群：嗜中性粒细胞嗜曙红细胞淋巴细胞嗜碱性粒细胞单核细胞 图3.4 单核 分叶核分散单核 白细胞的光散射分离分散信息描绘在Y轴的90分散和X轴的10分散之内。（90/10分散点状图显示在图3.4中。）两种细胞被清晰地显示出来。单核细胞落在分散点状图左下角群落中，而分叶核细胞落在该群落的上方和右侧。该设备使用了一种动态阈值以测定两种种群间的最佳分离。然后每个细胞被鉴别为单核或者分叶核。一旦每个细胞经过鉴别后，无论其出现在其他分散点状图的任何部位，它都将保留其分类。图3.5 嗜中性粒细胞 嗜曙红细胞分散 嗜中性粒细胞 嗜曙红细胞分离分散信息描绘在Y轴90D分散和X轴90分散上。（90D/90 分散点状图显示在图3.5中）只有分叶核细胞被描绘在这张分散点状图中。单核细胞已经被鉴别出来，因此不会干扰分叶核细胞的进一步分类。分叶核细胞的两个亚群被清晰地显示出来。嗜中性粒细胞落在两个群落的靠下方位上。嗜曙红细胞落在群落较上方的位置。该设备使用了动力学阈值以测定两个亚群间最佳的分离。然后每个细胞被分类为嗜中性或者嗜伊红。所有细胞分散特定数量的90D光。嗜曙红细胞比其他细胞分散更多的90D光，因为它们所包含的颗粒具有独特的特点。嗜曙红细胞的这一特性用于对其地阳性确认，并且因此将其明确地与嗜碱性粒细胞群鉴别开来。 单核分离分散信息描绘在Y轴0分散和X轴10分散上。（0/10 分散点状图显示在图3.6中）单核细胞被描绘在这张分散点状图中。运算法则同时运用了嗜中性粒细胞群落的定向以协助分类单核细胞。三个种群的单核细胞被清晰显示出来。由于嗜碱性粒细胞包括在单核群落中，因此有三种类种群的单核细胞。从特点上看，嗜碱性粒细胞是颗粒状细胞，因此比单核细胞更加复杂。但是，嗜碱性颗粒溶于水，并溶解在白细胞溶解试剂中。因此，失去颗粒的嗜碱性粒细胞的复杂性降低并落入单核细胞群落中。淋巴细胞落在下方较大的群落中。（淋巴细胞下方的小型细胞群落包含微粒，它们不大可能是白细胞）嗜碱性粒细胞落在群落的上方并且略微靠近淋巴细胞的右侧。单核细胞落在淋巴细胞和嗜碱性粒细胞群落的上方。该设备使用了动力学阈值以测定这三种主要种群之间的最佳分离。然后，每个细胞被分类为淋巴细胞、单核细胞或者嗜碱性粒细胞。最后，设备评估位于淋巴细胞群落下方但是高于硬件阈值（通道23）之间的区域。任何落在这个区域内的微粒经由动力学阈值从淋巴细胞中分离出来。下列细胞类型可能呈现在这个区域内：N红细胞未溶解的红细胞巨大血小板血小板 丛此区域内的所有微粒都被排除在白细胞和鉴别群之外。其他分散点状图90/0 分散信息被描绘在Y轴90分散和X轴0分散上。90D/0 分散信息被描绘在Y轴90D 分散和X轴0分散上。90D/10 分散信息被描绘在Y轴90D 分散和X轴10分散上。所有分散点状图都可以根据操作人员的要求显示和打印。核光学计数由于在测量过程中细胞快速衰退，因此包含脆弱白细胞的样本很难被精确测量。为了获得精确的白细胞计数，一种应用HGB片断（不是白细胞片断）的替代方法被用于测量包含脆弱白细胞的样本。HGB样本片断在HGB流动池内经过测量之后被转移至光学流动池，而不是按照正常的患者周期被送至废物舱。在HGB流动池内，HGB试剂溶解白细胞的胞质膜，但是允许单核细胞膜完好无损。这样使样本中的白细胞稳定性更高。HGB片断在被送至激光流式细胞仪之前被溶解大约15秒钟。当HGB片断穿过激光流式细胞仪时，计数细胞的核子。这种测量方法的结果被储存在数据记录器中，名为NOC。阻溶性红细胞当在常规患者模式中运行含有阻溶性红细胞的标本时，白细胞溶解试剂中的细胞溶酶剂可能在计数白细胞的所定时间内不够用于溶解“阻溶性”细胞。因此，未溶解的红细胞可能错误地包括在白细胞计数之内，并导致一个虚假的评估数值。当发生这种情况时，必要数量的基质将被呈现在0/10 分散点状图白细胞动力学阈值下方的N1区域内。当在阻溶性红细胞模式下二次运行这些类型的标本时，在混合装置内白细胞样本的稀释时间要比常规患者模式长15秒钟。这一额外的溶解时间用于分解（溶解）阻溶性红细胞并防止它们干扰白细胞计数与鉴别。注意：在阻溶性红细胞标本类型下运行标本可能会出现较高的假阳性带报警的发生率。白细胞 柱状 图 图3.7 白细胞 柱状图The CELL-DYN 3200 能够以两种柱状图的方式呈现白细胞分散信息：N白细胞 LYM MONO（N-L-M） 和 Mono Poly（M-P）。NOC （核光学计数）数据也可以呈现为柱状图的形式。（参考图3.7） 这些柱状图可以根据操作人员的要求显示并打印。N白细胞 LYM MONO 柱状图分散信息被描绘在一个柱状图的格式中，其Y轴是相对细胞数目，X轴是N白细胞、淋巴细胞、单核细胞尺寸分布数据。MONO POLY 柱状图分散信息被描绘在一个柱状图的格式中，其Y轴是相对细胞数目，X轴是单核细胞和分叶核细胞尺寸分布数据。NOC 柱状图NOC数据被描绘在一个柱状图的格式中，其Y轴是相对核子数目，X轴是尺寸分布数据。白细胞参数 图 3.8 白细胞数据和分散点状图白细胞数据通常如图3.8中的描述显示。所有数字和图像数据都自动显示在选定模式中的运行屏幕上。当描绘完白细胞分散信息并且细胞已经被分类入五个亚群后，运算法则接下来测定白细胞和每个亚群中细胞百分数。一旦测定完白细胞计数后，每个亚群中细胞的绝对数字乘以白细胞计数的百分数。结果按下列方式表示：白细胞 # x K/LNEU # x K/L 和 %LYM # x K/L 和 %MONO # x K/L 和 %EOS # x K/L 和 %BASO # x K/L 和 %针对绝对数目和百分数，显示屏上的小数点后保留三位有效数字。 通过下列颜色进一步鉴别白细胞亚群：嗜中性粒细胞 黄色淋巴细胞 蓝色单核细胞 紫色嗜曙红细胞 绿色嗜碱性粒细胞 白色注意：嗜碱性粒细胞显示为白点，但是在彩色打印输出上显示为黑点。白细胞分散信息通常以如图3.8所示的两种分散点状图显示：尺寸 / 复杂性 尺寸（0分散）信息描绘在Y轴上，复杂性（10分散）描绘在X轴上。粒度 / 小叶性 粒度（90D 分散）信息描绘在Y轴上，复杂性（90 分散）信息描绘在X轴上。白细胞 报警白细胞报警信息请参考本单元中“操作信息与数据报警”子单元。红细胞/血小板 测量概述光学通道用于测定红细胞和血小板数据。在吸样过程中，1.67 L 的样本在分液阀处被分割用于红细胞 / 血小板 测量。稀释液 / 鞘液针管将2.79 mL 的稀释液分配至分液阀。然后样本和稀释液被转移至红细胞 / 血小板混合装置，在那里以漩涡作用混合，最终稀释液的比例为1:1,675。样本转移泵将红细胞 / 血小板 稀释液从混合装置转移至激光流式细胞仪内的进鞘液口处。样本测定注射器将24 L 的红细胞 / 血小板 稀释液注入鞘流中。然后样本流以流体动力学的方式聚焦细胞，使其排列成单一的纵列穿过激光流式细胞仪，后者是一个在光学上清澈透明的石英舱。一束垂直偏振的氦氖激光作为光源。共有256个尺寸通道用于每个参数，每个红细胞尺寸通道相等于1 Fl，每个血小板尺寸通道相等于0.137 fL。使用0、10、和90传感器数据计算红细胞 参数，使用0和10传感器数据计算血小板参数。红细胞 参数 图3.9 红细胞 数据与柱状图所有数字和频率尺寸分布数据自动显示在选定格式内的运行屏幕上。使用0数据以柱状图的形式显示针对于红细胞的尺寸分布数据。尺寸分布数据描绘在X轴上。细胞的相对数目经标准化后描绘在Y轴上。红细胞 数据显示在图3.9中。红细胞 计数直接测量红细胞计数，并以下列方式表达：红细胞 = # x M/L低于1.0 x M L 的计数显示为小数点后三位数。校准红细胞计数的重叠率和白细胞干扰。MCV平均细胞容积是个体红细胞的平均体积。MCV来自于0、10、和90柱状图上的红细胞尺寸分布数据，并以千万亿分之一公尺为单位表示。HCT红细胞比容是红细胞与血浆的比例，并以全血体积的百分数形式表示。HCT是按照下列公式从红细胞计数和平均细胞体积中计算而得：HCT = ( 红细胞 x MCV ) / 10MCH平均红细胞血红蛋白含量是红细胞中所包含的血红蛋白的平均数量，以微微克表示。MCH以下列公式从红细胞和HGB中计算而得：MCH = (HGB/红细胞) x 10MCHC平均红细胞血红蛋白浓度是血红蛋白重量与平均红细胞体积的比值，以克每分升表示。MCHC以下列公式从HGB和HCT中计算而得：MCHC = (HGB/HCT) x 100RDW红细胞分布宽度是红细胞种群不同成分的一种测量方法。CELL-DYN 3200 报告的相对RDW 相等于以克每分升为单位的CV。RDW 来自于红细胞柱状图上第20个和第80个百分点。红细胞 报警红细胞报警信息请参考本单元的“操作信息与数据报警”子单元。血小板参数在漂浮阈值间计数的红细胞/血小板稀释液包括在血小板（血小板）数据中，该数据使用了0 和10 传感器收集。较低的阈值在1和3 fL之间浮动，较高的阈值在15 和35 fL 之间浮动。如果没有足够的数据用于测定血小板计数，那么较低和较高的阈值被分别设定在2 和 35 fL 处。一旦阈值已被测定，血小板计数随即来自于10 数据。数据可以两种格式显示。它可以显示为包括红细胞的分散点状图（0 / 10）。还可以显示为下列三个柱状图中的一种：血小板 仅使用10 数据血小板 和红细胞 使用0 数据血小板 和红细胞 使用10 数据在下图中显示了以10 数据的柱状图表示的血小板数据。在低于较低阈值区域内所计数的事件通常为光学干扰或者小微粒物质。在高于较高阈值区域内所计数的事件被计数为红细胞。如果任何一个阈值区域的干扰超过了先前设定的界限，那么相应对血小板参数做出报警。该报警在本单元后面的内容有所论述。血小板 计数血小板 计数以千每微升（K / L）表示。 图3.10 血小板数据与柱状图MPV平均血小板体积来自于血小板计数测定之后的血小板柱状图。MPV以千万亿分之一公尺表示。PCT血小板比积是血小板和MPV的产物，并且类似于红细胞比积。它以百分数表示并按照下列公式计算：PCT = (血小板 x MPV) / 10PDW血小板分布宽度是血小板种群不同成份的一种测量方法。它以几何学标准偏差表示。注意：PCT和PDW尚没有建立临床显著意义。因此，它们在美国不显示在报告单上。Platelet 报警有关报警信息请参考本单元“操作信息与数据报警”部分中的内容。血红蛋白测量概述HGB通道用于血红蛋白的比色测定。在吸样过程中，12 L的样本在分液阀处被分割用于HGB测量。在测量HGB之前，使用在HGB流动池内的CELL-DYN 3200稀释液 / 鞘液获得一个参考值。在稀释液上获取一个零或者空白读数，从而为样本信号提供一个可比较的参考值。在稀释液上留下五个分离的空白读数。去除最低值和最高值，剩下的三个数值取平均值即为最终HGB参考读数。稀释液 / 鞘液针管将1.7mL的稀释液 / 鞘液分配至分液阀，将HGB片断转移至HGB混合装置内。然后HGB溶解针管将0.9mL的HGB溶解诸如混合装置内。以漩涡作用混合混合液，得到最终的稀释液比例为1:218。HGB溶解试剂溶解红细胞，改变了由非氰化物化学过程所释放的血红蛋白。当溶解作用完成后，将HGB流动池内的一个低能量的发光二极管连接至混合装置，测量与HGB浓度成比例的吸收数量。波长为555纳米的发光二极管作为光源。一个光电探测器测量被传输的光线。每个样本上读取五个分离的HGB读数。去除最低值和最高值，剩下的三个取平均数作为最终HGB样本读数。完成血红蛋白读数后，用稀释液 / 鞘液（在正常运行模式下）冲洗HGB流动池。比较参考值和样本读数以测定样本的HGB浓度。HGB结果表示为血红蛋白克数每分升全血。低于10.0 g/dL的血红蛋白结果小数点后保留两位数字。HGB 参数直接测量血红蛋白并以表示为血红蛋白克数每分升全血。HGB 报警有关HGB报警信息请参考本单元“操作信息和数据报警”子单元中的内容。实验室工作表屏幕实验室工作表屏幕用于向实验室人员提供数据回顾和有效期方面的协助（参考图3.11）。该屏幕仅适用于实验室。此屏幕显示了5 部分鉴别和额外的参数。运行和数据记录器屏幕仅显示5 部分鉴别。两种格式的鉴别如表格3.1和3.2所示。注意：参数MON和LYM在标签后有一个“e”，表示这些数值为评估值。MONe代表单核负发射。LYMe代表所报告的淋巴细胞为负向变量的淋巴细胞。 图3.11 实验室工作表屏幕如要进入实验室工作表屏幕，请在显示运行菜单或者显示标本屏幕（在数据记录器菜单中）时按下键盘上的Page Down键。格式被固定并且不能更改。屏幕上所显示的标本是由屏幕左上角的标本ID号码和序列号作为识别。如要打印实验室工作表屏幕，按下PRINT软键或者键盘上的Print Screen键。按下RETURN 返回至运行菜单或者显示标本屏幕（在数据记录器菜单中），具体情况取决于哪一项菜单是先前用于进入工作表的。5 部分鉴别将白细胞分成5个成分：嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜曙红细胞、和嗜碱性粒细胞。额外参数进一步将嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞分成其各自的组成成分。嗜曙红细胞和嗜碱性粒细胞在两个表格内相同。表格3.1 5 部分鉴别参 数结 果（K / L） 表格3.2 5 部分鉴别加额外参数结 果（K / L）参 数 操作信息和数据报警介绍操作信息和数据报警出现在运行屏幕、打印出来的报告上，并且可以被传送至一个实验室计算机系统。CELL-DYN 3200 监测可能影响显示结果的设备情况和数据标准，并且这些信息和报警用于警告操作人员。所有报警、数字、分散和柱状图数据的解释说明应该结合实验室的工作步骤，并且用于决定是否需要采取进一步行动和 / 或回顾结果。信息被分为以下种类：设备信息：故障情况状态情况参数报警信息：离差数据报警可疑参数报警可疑种群报警解释性信息本单元中列出了每种信息的详细描述。设备故障和状态情况设备故障和状态情况在第10单元：“故障排除及诊断”；子单元：“故障排除指导”中表格10.1至表格10.4中论述。当设备在标本处理过程中探测到不恰当的情况时，会显示这些信息。在必要时，数据被抑制。当显示上述任何一条信息时，请参考故障排除指导以获取帮助。遵照所提供的说明并采取恰当的纠正措施。当问题得到纠正后，重复该样本。细胞种群与报警脆弱性 白细胞 从典型意义上讲，脆性是出现在慢性淋巴细胞白血病（CLL）中的异常淋巴细胞，并且在完成血涂片时显示为“缺陷细胞”。当以患者模式（在运行屏幕中患者被选定为标本类型）处理样本时，如果出现脆性，那么由于在运行循环中溶解试剂使这些脆弱性细胞的胞质膜逐渐塌陷，白细胞（WOC）计数可能异常降低。当显示F白细胞报警时，使用标本类型脆性重复标本。这项选择使用了含有完整白细胞核子的HGB样本稀释液。此核光学计数（NOC）在出现脆性时可提供更加精确的白细胞计数。溶解 阻溶性红细胞阻溶性红细胞是含有异常或者其胞膜被改变使其对溶解处理过程具有较强的阻溶性的红细胞。当在患者模式下运行样本时，如果出现溶解 阻溶性红细胞，那么在指定的白细胞计数期限内，白细胞溶解试剂的低渗透溶解能力通常不足以溶解任何溶解 阻溶性红细胞细胞。因此，未溶解的红细胞可能错误地涵盖在白细胞计数内，导致计数结果假性升高。在正常患者样本中，溶解 阻溶性红细胞或者缺乏或者其数目被忽略不计。在患者样本中的溶解 阻溶性红细胞数目有显著意义时，通常同时有显著意义数量的基质干扰出现在0 / 10分散点状图动力学WOC阈值下方的N1区域内。当怀疑有基质干扰并且其他情况符合时，即显示R红细胞（阻溶性红细胞）报警，警告使用者在阻溶性红细胞模式（阻溶性红细胞被选定为标本类型）下运行标本。白细胞溶解时间延长，以使溶解 阻溶性红细胞完全溶解从而获得一个精确的白细胞计数。对于那些可疑含有N红细胞或者阻溶性红细胞或者那些涂片回顾表明存在N红细胞 （例如：镰刀细胞或者靶细胞）的情况，在阻溶性红细胞标本类型下运行样本以检验白细胞计数。参数报警信息表格3.3 按照参数和种类总结了所有参数报警信息。表格3.3 参数报警信息MPV数值可能被抑制（没有显示或者打印）RBC 形态贫血红血球增多症小细胞RBC巨细胞RBC血红蛋白过少血红蛋白过多红血球大小不等症血小板减少症血小板增多症小细胞PLT巨细胞PLT同 WBC同 WBC嗜中性白血球减少症嗜中性白血球增多症淋巴球减少症淋巴球增多症单核细胞增多症嗜曙红细胞增多症嗜碱性粒细胞增多症同 WBC鉴别NEULYMMONOEOSBASO白血球减少白血球增多如果低于下限则结果显示为黄色如果高于上限则结果显示为紫色当超过界限时在图像打印输出上结果下面标有横线当超过界限时在空白薄纸单据上的结果下面标有横线当结果超出正常范围时，在预先印好的单据结果上标有星号（*）解释性信息可疑种群标记可疑参数标记离差数据报警参数 离差数据报警通过将数字界限输入六个患者界限装置内（具体解释参见第5单元：操作说明；子单元：设定说明）或者取出设备先前设定的线性界限的方式即可触发这些警告。如果一项参数的结果超过了这些界限，那么它们就会被报警在屏幕和报告上。分散警告按照下列方式显示或者打印：屏幕显示： 结果低于下限显示为黄色结果高于上限显示为紫色超过线性： 结果显示为 图像报告： 超出界限的结果下标横线空白薄纸打印单据： 超出界限的结果下标横线预先印好的单据： 超出界限的结果标有星号结果超出线性界限的标本应该根据实验室步骤使用稀释液 / 鞘液稀释然后重复操作。（确保纠正了由所用的稀释液因子对结果产生的影响。）注意：MCV、MCH、MCHC和MPV不受稀释液影响并且不需要纠正。可疑参数报警这些报警在设备评估完所测量数据的一项特定参数或者一组参数之后而产生。由于干扰物质或者由于样本异常导致设备无法测量一个特定的参数，其结果可能不可信。 介绍白细胞报警有五个白细胞 参数报警：白细胞、DFLT（NLMEB）、DFLT（NE）、DFLT（LM）、和DFLT（B）。以下白细胞种群报警可能被显示：N白细胞、F白细胞、N红细胞、R红细胞、BAND、IG、BLAST、VAR LYM。如果显示了任何一个白细胞种群或者参数报警，那么在运行和实验室工作表屏幕上界限区域的右侧和下方会显示可疑的信息。该信息同时还会出现在打印输出上。白细胞 描述符白细胞描述符（WOC和NOC）包括在显示屏幕和打印输出上以提供有关所报告的白细胞数值的额外信息。如果在QC和阻溶性红细胞标本类型这两种结果之间的差异存在临床显著意义，那么设备将选定恰当的结果并白细胞数值旁的括号内显示一个描述符。注意：在脆性标本类型中，NOC数值始终被选定。数据报警表格3.4 标本模式回顾涂片中的血小板丛、巨大血小板或者低水平的NRBC，并遵照您的实验室回顾标准。如果没有出现其他可疑的参数，那么可以报告WBC和鉴别。1) 当基质干扰 1.5% 的分析事件时并且WOC动力学比例没有下滑趋势。2) 当基质干扰 2.5.% 时，在白血球减少症患者中设定NWBC。 NWBC回顾涂片中是否出现NRBC并遵照您的实验室回顾标准。当基质干扰 3.0% 的分析事件时并且WOC动力学比例没有下滑趋势，或者，当患者处于贫血中、基质干扰 0.9% 的分析事件时并且WOC动力学比例没有下滑趋势。 NRBC如果标记仍然存在，则回顾是否存在NRBC并验证淋巴阀门。通过替代方法确认WBC计数。基质干扰较高并且探测到WOC动力学比例的下滑趋势。在阻抗性RBC模式下重复操作。RRBCWBCDFLT (NLMEB)推 荐 行 动引 发描述符 / 标记NRBCWBCDFLT (NLMEB)FWBCVAR LYMPHWBCDFLT (NLMBEB)除以上标准外，如果经分析事件的数目较高或者暗示在WBC计数中可能存在干扰，那么WBC警告和DFLT NLMEB 标记将同时显示出来。基质干扰较低但是探测到WOC动力学比例的下滑趋势，或者基质干扰较低并且没有探测到WOC动力学比例的下滑趋势，但是WOC 8.0 K / uL 并且YM% 80%。在FWBC模式下重复操作。NOC结果将以WBC结果的形式报告。回顾涂片以确认淋巴细胞计数和脆弱性WBC的存在。回顾涂片中是否存在NRBC并遵照您的实验室回顾标准。通过替代方法确认WBC计数。患者、QC、阻抗性RBC 模式标记（当WOC与NOC相等同时） 表格3.4 标本模式（续） 回顾分散点状图以明确细胞群落分离清晰。回顾染色涂片以验证鉴别价值。括号中的文字表明怀疑哪一个WBC亚群或者哪一组亚种群。由于出现异常细胞丛使设备无法可靠地区别WBC亚种群，可能有DFLT标记。因此，选定了一个默认阈值。DFLT (NE)或者 DFLT (LM)或者 DFLT (B)或者 DFLT (LB)如果DFLT ( NLMEB ) 标记伴随FWBC标记，则在FWBC模式中重复操作。如果DFLT ( NLMEB ) 标记伴随RRBC标记，则在RRBC 模式中重复操作。回顾分散点状图以明确细胞群落分离清晰。回顾染色涂片以验证鉴别价值。推 荐 行 动 DFLT(NLMEB)描述符 / 标记引 发患者、QC、阻抗性RBC 模式标记（当WOC与NOC相等同时）下列情况中的一种或多种是真实的：1) 可能出现脆弱性细胞。（当FWBC标记被触发，DFLT ( NLMEB ) 标记始终被设定。）2) 细胞太少以至于无法计算鉴别。3) 单核 分叶种群分离不好。注意：有四种不同的DFLT 标记：（NLMEB）、（NE）、（LM）和（B）。（N = 嗜中性粒细胞，L = 淋巴细胞，M = 单核细胞, E = 嗜伊红细胞, B = 嗜碱性粒细胞） 表格3.4 标本模式（续）患者、QC、阻抗性RBC 模式标记（当WOC与NOC相等同时）描述符 / 标记BANDIG BLAST 下列参数中的一项或者多个超过预计界限：MCV 100 fLMCH 34 pgMCHC 37 g/dLRDW 18.5%RBC MORPHVAR LYM如果满足下列情况中的任意一种，则触发BLAST标记：设备探测到 1% 的WBC总计计数作为