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文档简介
1.工具酶:基因工程的操作,是在分子水平上的操作,依赖一些酶作为工具对基因进行人工切割,拼接和扩增等操作,所以把这些酶称之为“工具酶”。2.限制性核酸内切酶简称限制酶,是一类能识别双链DNA分子中特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。 3.平头末端:两条链断开的位置在识别序列的对称中心产生平末端 4.粘性末端:两条链上断开的位置是交错的对称地分布在识别序列中心位置两侧,产生粘性末端 5.同裂酶:来源不同,识别相同序列的限制酶6.同序同切酶:识别序列和切割位置都相同7.同序异切酶:识别序列相同,切割位点不同8.同尾酶:识别序列不同,但是产生相同的粘性末端的限制酶 9.II型限制性内切酶由于反应条件的改变,其限制酶的特异性发生松动,识别和切割序列发生改变,这一特性称为星号活性。 10.DNA连接酶:可使一段DNA的3 羟基末端和5磷酸末端形成3,5- 磷酸二酯键,把两个DNA片段连在一起,封闭DNA双链上切口的酶。 11. DNA聚合酶:在引物和模板存在下,把脱氧核糖单核苷酸连续的加到双链DNA分子引物链的3-OH端,催化核苷酸的聚合作用。 12.G 值:是指DNA 双链形成所需的自由能,该值反映了双链结构内部碱基对的相对稳定性,G值越大,则双链越稳定。13.平台期:PCR反应过程中,随着PCR产物的逐渐积累,被扩增的DNA 片段不再呈指数增加,而进入线性增长期或静止期, 即出现“停滞效应”。 14.绝对定量:测定目的基因在样本中的拷贝数(必须使用已知拷贝数的绝对标准品,必须做标准曲线) 15.相对定量:测定目的基因在样本中的含量的相对比例,不需要知道其拷贝数16.Ct值:每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数17.分子杂交:有一定同源性的两条核酸单链,在适宜的温度和离子浓度等条件下,通过碱基互补退火形成稳定的双链分子的过程 。 18.探针:核酸探针是指用放射性核素、生物素或其他活性物质标记的,能与特定的核酸序列发生特异性互补的已知DNA或RNA片段。19.印迹:将DNA、RNA或蛋白质固定到固体支持物上的过程。 20. DNA印迹:利用毛细管原理将DNA电泳带转移到膜上。也称Southern印迹。 21. RNA印迹:电泳转移的对象是RNA,也称Northern印迹。22. 膜上印迹杂交 :指将待测核酸序列片段结合到一定的固相支持物上,然后与存在于液相中标记的核酸探针进行杂交的过程,是目前最常用的一种核酸分子杂交方法。这种膜上印迹杂交的技术也称印迹技术。23.载体:携带外源目的基因或DNA片段进入宿主细胞进行复制和表达的工具称之为载体,其本质是DNA(少数为RNA)。24.多克隆位点:也称为多位点接头,是指载体上人工合成的一段很短的含有紧密排列的多种限制性核酸内切酶的酶切位点的DNA片段25. -互补:是指 lacZ 基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的 -半乳糖苷酶阴性的突变体之间实现互补 。26.非融合蛋白:不与细菌的任何蛋白或多肽融合在一起的表达蛋白 27.融合蛋白:指两个不同的基因或基因片段连接在一起,使用同一个启动子进行翻译,而且二者直接没有终止子,结果翻译后,两个不同的蛋白就连在一起,形成融合蛋白 28.融合表达:表达载体的多克隆位点上有一段融合表达标签(Tag),表达产物为融合蛋白,方便后继的纯化步骤或者检测 29.转化:重组质粒DNA分子通过与膜蛋白结合进入受体细胞,并在受体细胞内稳定维持和表达的过程 30.感受态细胞:处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态的细胞 31. 基因组的文库:某种生物基因组的全部遗传信息通过克隆载体储存于某一受体菌的群体中,这个群体就称为该生物基因组的文库32.亚克隆:对已经获得的目的DNA片段进行重新克隆。33.基因表达:是指基因所包含的遗传信息通过转录生成RNA,再经过翻译生成蛋白质的过程。这其中也包括以RNA为终产物的表达,如生成tRNA和rRNA的过程。34.基因表达调控:基因表达有其特定的规律,并受到机体各种因素的调节和控制。35.看家基因:基因在几乎所有细胞中持续地表达,其表达属于基础或组成型表达36.包涵体:在某些生长条件下,大肠杆菌能积累某种特殊的生物大分子,它们致密地集聚在细胞内,或被膜包裹或形成无膜裸露结构,这种水不溶性的结构称为包涵体。37.深层培养:指与表面培养相对应,使用固体或液体培养基在固定的容器内通入无菌空气进行培养发酵的方法,现在通常用的是液体深层发酵。38.补料分批培养:也叫流加培养,是在发酵反应器中接种培养一段时间后,间歇或连续地补加新鲜培养基,发酵结束前一段时间停止补料,发酵结束后一次性放料的培养方法。39.连续培养:将种子接入发酵反应器中,先培养一段时间,使菌体细胞浓度和产物浓度达到一定的要求。然后,以恒定的速度开始进料和出料,控制一定稀释率进行不间断的培养。40.透析培养:利用膜的半透性原理使代谢产物和培养基分离
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