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文档简介
专题2 微生物的培养与应用 课题1微生物的实验室培养培养基 1 概念 营养物质 人们按照微生物对 的不同需求 配制出供其生长繁殖的营养基质 2 营养构成 碳源 特殊营养物质 1 一般都含有水 氮源 无机盐 2 还要满足微生物生长对ph 以及o2的要求 3 分类 1 液体培养基 配制成的液体状态的基质 2 固体培养基 配制成的固体状态的基质 在液体培养基中加入凝固剂 如琼脂 制成琼脂固体培养基 无菌技术 1 消毒 温和 巴氏 1 特点 使用较为 的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部的部分微生物 不包括芽孢和孢子 2 常用方法 煮沸消毒法 消毒法 化学药剂消毒法 2 灭菌 强烈 灼烧 1 特点 使用 的理化因素杀死物体内外所有的微生物 2 常用方法 灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 微生物培养的基本技术 1 配制培养基 称量 混合 溶化 调ph 分装 包扎2 灭菌 加水 加培养基 密封 排冷气 维持压力 取出倒平板 或搁置斜面 3 接种 稀释涂布平板 1 接种过程 洗净双手 点燃酒精灯 接种 贴标签 2 接种工具 包括 涂布器 接种环 3 接种方法 平板划线法 法 4 注意事项 整个操作过程要在 旁完成 4 培养 酒精灯火焰 接种后的培养皿放入恒温箱内培养 菌种保藏 1 临时保藏 固体斜面 4 1 操作 采用 培养基 菌落长成后 放入 冰箱中保藏 以后每3 6个月 转移一次新的培养基 2 缺点 保存时间不长 菌种易被污染或产生变异 2 长期保存法 甘油管藏 采用 法 放入 20 的冷冻箱中保存 微生物的营养要素 1 微生物的营养物质及功能 2 不同微生物对营养物质的需求 培养基的种类 续表 关于微生物培养实验的注意事项 1 配制培养基时 按照每个培养基消耗15 20ml的量 来估算总用量 2 灭菌后 培养基冷却到55 后应及时进行倒平板操作 如果不能及时操作 需要将培养基放到55 左右的电热箱中保温 以防止琼脂凝固 3 平板划线操作时每次灼烧的目的如下表 4 实验后 所有用过的培养基 培养液等都需要统一进行 高压蒸汽灭菌后再丢弃 否则将会造成环境污染 微生物所需的营养要素 例1 下列关于微生物营养的说法 正确的是 a 同一种物质不可能既作碳源又作氮源b 凡是碳源都能提供能量c 除水以外的无机物仅提供无机盐d 无机氮源也能提供能量 名师点拨 不同的微生物 所需营养物质有较大差别 要针对微生物的具体情况分析 对于a b选项 它的表达是不完整的 有的碳源只能是碳源 如二氧化碳 有的碳源可同时是氮源 如nh4hco3 有的碳源同时是能源 如葡萄糖 有的碳源同时是氮源和能源 如蛋白胨 对于c选项 除水以外的无机物种类繁多 功能也多样 如二氧化碳可作为自养型微生物的碳源 nahco3可作为自养型微生物的碳源和无机盐 而nacl则只能提供无机盐 对于d选项 无机氮源提供能量的情况还是存在的 如nh3可为硝化细菌提供能量和氮源 答案 d 配对练习1 下列有关碳源的叙述不正确的是 a 碳源主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物b 某些碳源可以作为微生物的主要能源物质c 蛋白质一定不能做碳源d 不同种类的微生物的碳源可能不同解析 蛋白质也能做碳源 答案 c 培养基的种类 例2 下列有关培养基的叙述正确的是 a 培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质b 培养基只有两类 液体培养基和固体培养基c 固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基d 微生物在固体培养基上生长时 可以形成肉眼可见的单个细菌 名师点拨 培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 培养基根据物理形态分为液体培养基 半固体培养基和固体培养基 根据实验目的不同 可以分为普通培养基和选择培养基 因此按照不同的分类标准 种类也不同 固体培养基是因为加入了凝固剂琼脂造成的 不是因为水的多少 微生物在固体培养基上生长时 可以形成肉眼可见的单个菌落 单个细菌用肉眼看不到 答案 a 配对练习2 关于配制培养基的叙述中 正确的是 a 制作固体培养基必须加入琼脂b 加入青霉素可得到放线菌c 培养自生固氮菌不需氮源d 发酵工程一般用半固体培养基解析 固体培养基需加入凝固剂 琼脂是常用的 但不是唯一的 青霉素可抑制细菌和放线菌的生长 发酵工程一般用液体培养基 自生固氮菌能够将空气中的氮还原成氨 故培养基配制时不需加氮源 答案 c 微生物培养的要点 例3 下列操作与灭菌无关的是 a 接种前用火焰灼烧接种环b 接种前用酒精擦拭双手c 接种在酒精灯火焰旁完成d 将平板倒置 放入培养箱中培养 名师点拨 无菌操作是微生物培养的必要前提 学生必须树立 无菌概念 前三项都是无菌操作的规范要求 第四项将平板倒置
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