体外培育牛黄2010版药典.doc

体外培育牛黄Tiwai Peiyu NiuhuangBOVIS CALCULUS SATIVUS 本品以牛科动物牛Bos taurus domesticus Gmelin的新鲜胆汁作母液，加入去氧胆酸、胆酸、复合胆红素钙等制成。 【性状】 本品呈球形或类球形，直径0.53cm。表面光滑，呈黄红色至棕黄色。体轻，质松脆，断面有同心层纹。气香，味苦而后甘，有清凉感，嚼之易碎，不粘牙。 【鉴别】 (1)取本品粉末少量，用清水调和，涂于指甲上，能将指甲染成黄色。 (2)取本品粉末少许，用水合氯醛试液装片，不加热，置显微镜下观察：不规则团块由多数黄棕色或棕红色小颗粒集成，稍放置，色素迅速溶解，并显鲜明金黄色，久置后变绿色。 (3)取本品粉末少量，加三氯甲烷1ml，摇匀，再加硫酸与浓过氧化氢溶液(30%)各2滴，振摇，溶液即显绿色。 (4)取本品粉末0.lg，加盐酸1ml和三氯甲烷lOml，充分振摇，混匀，三氯甲烷液呈黄褐色，分取三氯甲烷液，加氢氧化钡试液5ml，振摇，即生成黄褐色沉淀。分离除去水层和沉淀，取三氯甲烷液约1ml，加醋酐1ml与硫酸2滴，摇匀，放置，溶液呈绿色。 (5)取本品粉末lOmg，加三氯甲烷20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸于，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取胆酸对照品、去氧胆酸对照品，加乙醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录B)试验，吸取上述两种溶液各2l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异辛烷一乙酸乙酯一冰醋酸(15：7：5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 【检查】 水分 不得过9.0%（附录H第一法）。 游离胆红素 取本品细粉lOmg，精密称定，置5ml量瓶中，加三氯甲烷4ml，微温，放冷，加三氯甲烷至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，照紫外一可见分光光度法(附录V A)，在453nm波长处测定吸光度。吸光度不得过0.70。 【含量测定】 胆酸 取本品细粉0. 2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液25ml，蒸干，残渣加20%氢氧化钠溶液lOml，加热回流2小时，冷却，加稀盐酸19ml调节pH值至酸性，用乙酸乙酯提取4次(25ml、25ml、20ml、20ml)，乙酸乙酯液均用同一铺有少量无水硫酸钠的脱脂棉滤过，滤液合并，回收溶剂至干，残渣用甲醇溶解，转移至lOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取胆酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.48mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录B)试验，精密吸取供试品溶液2l、对照品溶液1l与3l，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以异辛烷乙酸丁酯冰醋酸一甲酸(8：4：2：1)为展开剂，展距1417cm，取出，晾干，喷以30%硫酸乙醇溶液，在105加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法（附录 B薄层色谱扫描法）进行扫描，波长：入s=380nm，入R=650nm，测量供试品吸光度积分值与对照品吸光度积分值，计算，即得。 本品按干燥品计算，含胆酸(C24H4005)不得少于6.0%。 胆红素 对照品溶液的制备 取胆红素对照品lOmg，精密称定，置100ml棕色量瓶中，用三氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得(每1ml中含胆红素lOg)。 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，分别置具塞试管中，加乙醇至9ml，各精密加入重氮化溶液（甲液：取对氨基苯磺酸0.lg，加盐酸1.5ml与水适量使成lOOml。乙液：取亚硝酸钠0.5g，用水溶解并稀释至lOOml，置冰箱内保存。临用时取甲液lOml与乙液0.3ml，混匀）1ml，摇匀，在1520的暗处放置1小时，以相应的试剂为空白，照紫外一可见分光光度法(附录V A)，在533nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线。 测定法取本品细粉约lOmg，精密称定，置锥形瓶中，加三氯甲烷一乙醇(7：3)的混合溶液60ml、盐酸l滴，摇匀，置水浴上加热回流30分钟，放冷，转移至lOOml棕色量瓶中，容器用少量上述混合溶液洗涤，洗液并入同一量瓶中，加上述混合溶液至刻度，摇匀。精密量取上清液lOml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀。精密量取3ml，置具塞试管中，照标准陆线的制各项下的方法，自“加乙醇至9ml”起，依法测定吸光度，从标准蓝线上读出供试品溶液中含胆红素的重量(mg)，计算，即得。 本品按干燥品计算，含胆红素(C33H36N406)不得少于35.0%。 【性味与归经】 甘，凉。归心、肝经。 【功能与主治】 清心，豁痰，开窍，凉肝，息风，解毒。用于热病神昏，中风痰迷，惊痫抽搐，癫痫发狂，咽喉肿痛，口舌生疮，痈肿疗疮。 【用法与用量】 0.150.35g，多入丸散用。外用适量，研末敷患处。 【注意】 孕妇慎用；偶有轻度消化遒不适。 【贮藏】 密闭，遮光，防潮，防压，室温保存。附：1去氧胆酸 本品由牛胆汁经提取、加工制成。 【性状】 本品为白色的结晶性粉末。气微，味微苦。 本品易溶于冰醋酸和乙醇，不溶于水。 【鉴别】 取本品lOmg，加乙醇Sml使溶解，作为供试品溶液。另取去氧胆酸对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录B)试验，吸取上述两种溶液各21，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异辛烷一乙酸乙酯一冰醋酸(15：7：5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 【检查】 干燥失重 取本品，在105干燥4小时，减失重量不得过0.5%(附录G)。 炽灼残渣 不得过0.2%（附录 J）。 【含量测定】 取本品约0.5g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）60ml，置水浴中加热使溶解，冷却，加酚酞指示液数滴及新沸过的冷水20ml，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定，近终点时加新沸过的冷水lOOml，继续滴定至终点。每1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于39.26mg的去氧胆酸(C24H4004)。 本品按干燥品计算，含去氧胆酸(C24H4004)不得少于95.0%。【用途】 体外培育牛黄的原料。【贮藏】 密封。2胆酸 本品由牛、羊胆汁或胆膏经提取、加工制成。 【性状】 本品为白色的结晶性粉末。气微，味苦。 【鉴别】 取本品lOmg，加乙醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取胆酸对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录B)试验，吸取上述两种溶液各2l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异辛烷一乙酸乙酯一冰醋酸(15：7：5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 【检查】 干燥失重 取本品，在105干燥4小时，减失重量不得过0.5%（附录G）。 炽灼残渣 不得过0.2%（附录J）。 【含量测定】 取本品约0.4g，精密称定，置250ml锥形瓶中，加水20ml和乙醇40ml，用表面皿覆盖，置水浴中缓缓加热使完全溶解，冷却，加酚酞指示液5滴，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)漓定。每Iml氢氧化钠滴定液(0.1molL)相当于40.86mg的胆酸(C24H4005)。 本品按干燥品计算，含胆酸(C24H4005)不得少于95.0%。 【用途】 体外培育牛黄的原料。 【贮藏】 密封。3复合胆红素钙 本品由牛胆汁、胆红素和饱和氢氧化钙溶液经加工制成。 【性状】 本品为棕红色或棕黄色的粉末。味微腥。 【鉴别】 取本品粉末5mg，加三氯甲烷15ml，加盐酸溶液(510)0.1ml，超声处理30分钟，加三氯甲烷35ml，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取胆红素对照品，加三氯甲烷制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录B)试验，吸取上述两种溶液各10l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯一乙酸乙酯一冰醋酸(10：1：0.5)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 【检查】 水分 不得过5.0%（附录H 第一法）。 【含量测定】 对照品溶液的制备 取胆红素对照品lOmg，精密称定，置lOOml棕色量瓶中，用三氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得(每1ml中含胆红素lOg)。 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液Iml、2ml、3ml、4ml、5ml，分别置具塞试管中，加乙醇至9ml，各精密加入重氮化溶液（甲液：取对氨基苯磺酸0.lg，加盐酸1.5ml与水适量使成lOOml。乙液：取亚硝酸钠0.5g，用水溶解并稀释至lOOml，置冰箱内保存。临用时，取甲液lOml与乙液0.3ml，混匀）Iml，摇匀，在1520的暗处放置1小时，以相应的试剂为空白，照紫外可见分光光度法(附录V A)，在533nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线。 测定法 取本品细粉，约lOmg，精密称定，置锥形瓶中，加三氯甲烷一乙醇(7：3)的混合溶液60ml、盐酸1滴，摇匀，置水浴上加热回流30分钟，放冷，转移至lOOml棕色量瓶中，