高考历史总复习 专题一 微生物的培养与应用课件 新人教版选修1.ppt

专题一微生物的培养与应用 选修1 知识点一 微生物的分离与培养1 培养基 判断正误 1 据物理状态的不同 培养基只有液体培养基和固体培养基两种类型 2 培养基中一般都含有水 碳源 氮源和无机盐四种成分 3 在配制培养基时 除满足营养需求外 还应考虑ph o2及特殊营养物质的需求 2 无菌技术 连线 倒平板 灭菌 称量 2 纯化大肠杆菌的方法 常用的微生物接种方法有和 平板划线法 是通过在琼脂固体培养基表面操作 将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面 稀释涂布平板法 是将菌液进行一系列的 然后将不同稀释度的菌液分别到琼脂固体培养基的表面 平板划线法 稀释涂布平板法 接种环 连续划线 梯度稀释 涂布 1 微生物的营养 2 培养基的类型及作用 3 消毒与灭菌 1 消毒和灭菌的区别 用酒精消毒时 70 的酒精杀菌效果最好 原因是 浓度过高 使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜 乙醇分子不能渗入其中 浓度过低 杀菌力减弱 2 无菌技术主要操作要求 实验前应对操作空间 操作人员消毒 对所用器具和培养基灭菌 实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作 另外要避免已灭菌处理材料再次污染 解析 灭菌是指杀死物体内外所有的微生物 包括芽孢和孢子 而消毒仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物 不包括芽孢和孢子 答案 b 2 下列常用的无菌操作中错误的是 a 无菌操作的目的是防止杂菌污染b 用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒c 实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行d 玻璃器皿 吸管 培养皿 可用酒精擦拭解析 对操作者应用较温和的方法进行消毒 实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行 防止瓶口的微生物污染培养基 对无菌操作用到的玻璃器皿要用干热灭菌的方法彻底消灭其中的微生物 用酒精擦拭不能达到目的 答案 d 知识点二 土壤中分离尿素的细菌的分离与计数1 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 判断正误 1 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素 2 筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一碳源 3 统计样品中的活菌一般用平板划线法 4 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 若指示剂变蓝 则说明筛选到分解尿素的细菌 复合酶 c1酶 cx酶和葡萄糖苷酶 纤维二糖 2 筛选方法 方法 染色法 即通过是否产生来筛选纤维素分解菌 培养基 以为唯一碳源的选择培养基 刚果红 透明圈 纤维素 3 实验流程土壤取样 富含的环境 选择培养 用培养 以增加纤维素分解菌的数量 梯度稀释 纤维素 选择培养基 涂布平板 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 产生的菌落周围出现透明圈 纤维素酶 1 微生物的纯化培养一平板划线法与稀释涂布平板法 2 统计菌落数目的方法 1 显微镜直接计数法 原理 利用特定细菌计数板或血细胞计数板 在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量 方法 用计数板计数 缺点 不能区分死菌与活菌 2 间接计数法 活菌计数法 原理 当样品的稀释度足够高时 培养基表面生长的一个菌落 来源于样品稀释液中的一个活菌 通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中大约含有多少活菌 操作a 设置重复组 增强实验的说服力与准确性 b 为了保证结果准确 一般选择菌落数在30 300的平板进行计数 3 两种刚果红染色法的比较 1 选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度 确保能够从样品中分离到所需要的微生物 2 涉及到的微生物技术主要有 培养基的配制 无菌操作技术 稀释涂布平板法 选择培养基的作用 土壤取样等 3 可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是 a 以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂b 以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂c 以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹 试剂d 以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂 解析 在以尿素为唯一氮源的培养基中 不能分解尿素获得氮源的细菌不能生长 而分解尿素的细菌能利用尿素作氮源 将尿素分解为氨 使ph升高 若培养基中加入酚红指示剂 指示剂将变红 此培养基既属于选择培养基 又属于鉴别培养基 答案 a 4 如图是微生物平板划线示意图 划线的顺序为12345 下列操作方法正确的是 a 操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌b 划线操作须在火焰上进行c 在5区域中才可以得到所需菌落d 在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌 解析 本题考查平板划线操作方法 在每次划线前后都要对接种环进行灭菌 接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧 接种时划线操作是在火焰边进行 在5个区域中 只要有单个活细菌 通过培养即可获得所需菌落 答案 d 2012 北京高考 高中生物学实验中 在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是a 将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中b 将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上c 将转基因植物叶片接种到无菌培养基上d 将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上 解析 生产果酒和腐乳时对无菌的要求不是很高 接种不需要进行严格的无菌操作 土壤浸出液中含有多种杂菌 所以利用选择培养基筛选土壤浸出液中特定微生物时 不进行严格无菌操作也不会影响实验结果 植物组织培养技术成功的关键是无菌条件 若接种时不进行严格无菌操作将可能导致实验失败 故c项符合题意 答案 c 1 高温加热灭菌 其原理就是使细菌体内蛋白质变性 而达到杀灭细菌的作用 2 化学药剂的灭菌消毒方法 其作用原理是使细菌体内蛋白质变性 但是化学物质很难透过孢子或芽孢的坚硬外层进入细胞内 因此化学方法难以消灭孢子和芽孢 3 培养基的制作是否合格的验证 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1 2天后无菌落生长 说明培养基的制备是成功的 否则需要重新制备 4 平板冷凝后 皿盖上会凝结水珠 凝固后的培养基表面的温度也比较高 将平板倒置 既可以使培养基表面的水分更好地挥发 又可以防止皿盖上的水珠落入培养基 造成污染 5 菌种的保藏 短期保存 固体斜面培养基上4 保存 菌种易被污染或产生变异 长期保存 20 甘油管在冷冻箱中保藏 请回答 1 在配制培养基时 要加入尿素和酚红指示剂 这是因为hp含有 它能以尿素作为氮源 若有hp 则菌落周围会出现 色环带 2 下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是 灭菌 a 高压蒸汽b 紫外灯照射c 70 酒精浸泡d 过滤 3 步骤x表示 在无菌条件下操作时 先将菌液稀释 然后将菌液 到培养基平面上 菌液稀释的目的是为了获得 菌落 4 在培养时 需将培养皿倒置并放在 中 若不倒置培养 将导致 5 临床上用14c呼气试验检测人体是否感染hp 其基本原理是hp能将14c标记的 分解为nh3和14co 解析 1 幽门螺杆菌 hp 含有脲酶 能以尿素为氮源 在加入尿素和酚红指示剂的培养基中培养hp 由于尿素经脲酶的降解可产生碱性的nh3 nh3能使培养基中的酚红由红黄色变成红色 故菌落周围会出现红色环带 2 由于尿素加热会分解 对尿素溶液进行灭菌最好用g6玻璃砂漏斗过滤 3 微生物的分离和培养步骤是 配制培养基 灭菌 倒平板 接种 培养 为获得单菌落 接种操作前应先将菌液稀释 然后将菌液涂布到培养基平面上即可 4 微生物培养时需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中 若不倒置培养 则无法形成单菌落 5 幽门螺杆菌能将14c标记的尿素分解为nh3和14co2 故临床上常用14c呼气试验检测人体内幽门螺杆菌的存在 答案 1 脲酶红 2 d 3 接种涂布单 4 恒温培养箱无法形成单菌落 5 尿素 选择培养基及应用实例 1 选择培养基 在培养基中加入某种化学物质 以抑制不需要的微生物的生长 促进需要的微生物的生长 目的是从众多微生物中分离所需要的微生物 2 选择培养基应用实例 培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌 培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌 培养基中缺乏氮源时 可以分离固氮微生物 因为非固氮微生物不能在此培养基上生存 当培养基的某种营养成分为特定化学成分时 也具有分离效果 如石油是唯一碳源时 可以抑制不能利用石油的微生物的生长 使能够利用石油的微生物生存 达到分离能消除石油污染的微生物的目的 改变微生物的培养条件 也可以达到分离微生物的目的 如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物 1 2012 山东基本能力测试 除了高温加热以外 其它灭菌方法还有 a 紫外线照射b 真空包装c 用保鲜膜密闭d 添加防腐剂解析 灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物 包括芽孢和孢子 本题中真空包装 添加防腐剂 用保鲜膜密闭都起到了抑菌作用 紫外线照射使细菌的蛋白质变性 核酸受破坏 是灭菌方法 答案 a 2 2011 重庆高考 下列有关细菌培养的叙述 正确的是 a 在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌b 在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长c 向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长d 在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动解析 单个菌落中只含有一种细菌 青霉素能抑制细菌生长 而对真菌没有影响 破伤风杆菌是厌氧型细菌 通入氧气会抑制其生长 答案 d 3 2012 上海高考 回答下列关于微生物和酶的问题 高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性 研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌 其筛选过程如图所示 1 过程称为 过程是为了 2 i号培养基称为 按功能分 该培养基中除了加入淀粉外 还需加入另一种重要的营养成分 a 琼脂b 葡萄糖c 硝酸铵d 碳酸氢钠 3 一般对配制的培养基采用高压灭菌 其中 高压 是为了 在高温淀粉酶运用到工业生产前 需对该酶的最佳温度范围进行测定 图中的曲线 表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比 将酶在不同温度下保温足够长的时间 再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性 由此得到的数据为酶的热稳定性数据 即图中的曲线 4 根据图中的数据 判断该酶使用的最佳温度范围是 a 40 50 b 50 60 c 60 70 d 70 80 5 据图判断下列叙述错误的是 a 该酶只能在最佳温度范围内测出活性b 曲线 35 数据点是在80 时测得的c 曲线 表明80 是该酶活性最高的温度d 曲线 表明该酶的热稳定性在70 之后急剧下降 解析 欲培养和分离嗜热菌单个菌落可采用稀释涂布平板法 为稀释过程 为筛选过程 i号培养基为选择培养基 加入硝酸铵的目的主要是补充氮元素 高温灭菌的目的是杀死包括细菌芽孢等在内的全部生物 据图可知 工业生产中该酶的最佳温度范围为60 70 答案 1 稀释单个菌落的筛选 或筛选 2 选择培养基c 3 杀死培养基中的细菌芽孢 4 c 5 a 4 2011 山东高考 研究发现柚皮精油和乳酸菌素 小分子蛋白质 均有抑菌作用 两者的提取及应用如图所示 1 柚皮易焦糊 宜采用 法提取柚皮精油 该过程得到的糊状液体可通过 除去其中的固体杂质 2 筛选乳酸菌a时可选用平板划线法或 接种 对新配制的培养基灭菌时所用的设备是 实验前需对超净工作台进行 处理 3 培养基中的尿素可为乳酸菌a生长提供 电泳法纯化乳酸菌素时 若分离带电荷相同的蛋白质 则其分子量越大 电泳速度 4 抑菌实验时 在长满致病菌的平板上 会出现以抑菌物质为中心的透明圈 可通过测定透明圈的 来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果 解析 柚皮精油宜采用压榨法进行提取 要除去其中杂质可采用过滤法 培养基中的尿素可为乳酸菌提供氮源 电泳法分离蛋白质时分子量越大 电泳速度越慢 反之则越快 培养基菌落透明圈直径越大 说明柚皮精油和乳酸菌的抑菌效果越好 答案 1 压榨过滤 2 稀释涂布平板法 或 稀释混合平板法 高压蒸汽灭菌锅消毒 3 氮源越慢 4 直径 或 大小 5 2011 新课标全国高考 有些细菌可分解原油 从而消除由原油泄漏造成的土壤污染 某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株 回答问题 1 在筛选过程中 应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上 从功能上讲 该培养基属于 培养基 2 纯化菌种时 为了得到单菌落 常采用的接种方法有两种 即 和 3 为了筛选出高效菌株 可比较单菌落周围分解圈的大小 分解圈大说明该菌株的降解能力 4 通常情况下 在微生物培养过程中 实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌 和 无