广西高考生物 6.2实验九 DNA的粗提取与鉴定配套课件 新人教版 .ppt

第2讲实验九dna的粗提取与鉴定 1 dna的提取 1 dna和蛋白质在不同nacl溶液中溶解度不同 析出 溶解 2 但细胞中的某些物质可以溶于酒精溶液 据此可进一步提纯dna 2 dna的鉴定dna 蓝色 dna不溶于酒精溶液 二苯胺 1 鸡的血细胞鸡的血细胞 含有大量的dna 材料来源容易获得 注意不能选用哺乳动物的血细胞 因为其红细胞高度分化 没有 不能从中获得dna 2 植物细胞由于具有细胞壁 不能使用吸水涨破的方法 需进行研磨 使细胞破裂 含有细胞核 细胞核 选材 选用含有细胞核的 操作 宰杀所选动物收集其血液 防止凝血 加入的抗凝剂是 溶液操作 将血液倒入离心管中离心2min 除去上清液目的 使鸡血细胞快速沉淀 得到 1 制备血细胞液 取血 离心 鸡血细胞 柠檬酸钠 鸡血细胞液 1 分别取鸡血细胞液5ml 10ml和蒸馏水20ml 倒入烧杯内混合 并用玻璃棒 快速搅拌5min 2 纱布过滤 滤液中含 和其他核物质 2 提取鸡血细胞的细胞核物质 沿一个方向 dna 3 溶解细胞核内的dna 向滤液中加入2mol lnacl溶液40ml 玻璃棒沿一个方向搅拌1min4 析出含dna的黏稠物 溶液 蒸馏水析出丝状物 缓慢加蒸馏水直至黏稠物不再增加为止 此时nacl溶液被 5 滤取含dna的黏稠物目的 得到含dna的黏稠物 稀释到0 14mol l 6 将dna的黏稠物再溶解操作 用 过滤目的 得到含dna的滤液 7 过滤含有dna的nacl溶液 两层纱布 使用的试剂 冷却的 体积分数为 操作 沿一个方向搅拌 出现乳白色丝状物 用玻璃棒将丝状物卷起目的 得到含杂质较少的dna丝状物 8 提取含杂质较少的dna 95 的酒精溶液 使用试剂 0 015mol l的nacl溶液 操作 现象 9 dna的鉴定 二苯胺 不出现蓝色 出现蓝色 二苯胺 1 制备鸡血细胞液时 为什么要倒掉上层血浆 提示 去除上层血浆的目的是为了增加dna的相对含量 2 实验中出现数次相同操作 其操作的目的分别是什么 提示 3 实验中提取到较多dna的关键步骤包括哪些操作 提示 1 向鸡血细胞液中加入足量的蒸馏水 必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌 使鸡血细胞加速破裂 并释放出dna 2 提取含杂质较少的dna时必须用冷酒精 3 盛放鸡血细胞液的容器和实验中的烧杯和试管最好也是塑料制品 因为玻璃制品表面带电荷 dna中的磷酸基带相反的电荷 会被吸附于玻璃表面 减少dna含量 1 2012 玉林模拟 甲 乙两图为 dna的粗提取与鉴定 实验中涉及的两个操作装置图 相关叙述正确的是 a 图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为nacl溶液 但两者浓度不同b 图乙试管经稍稍加热后即可观察到一支试管中的溶液明显变蓝 另一支试管中的溶液不变蓝c 图甲操作需用玻璃棒迅速搅拌以使dna析出 并缠绕在玻璃棒上d 图乙操作中所用的二苯胺需现配现用以达到较好的鉴定效果 解析 选d 图甲烧杯中为酒精溶液 图乙试管中为nacl溶液 则a错误 图乙试管需要在沸水中加热5min 则b错误 图甲用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌 卷起丝状物 则c错误 图乙操作中所用的二苯胺最好现配现用 否则二苯胺会变成浅蓝色 则d正确 2 2011 江苏高考 在利用鸡血进行 dna的粗提取与鉴定 的实验中 相关叙述正确的是 a 用蒸馏水将nacl溶液浓度调至0 14mol l 滤去析出物b 调节nacl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶 都可以去除部分杂质c 将丝状物溶解在2mol lnacl溶液中 加入二苯胺试剂即呈蓝色d 用菜花替代鸡血作为实验材料 其实验操作步骤相同 解析 选b 在物质的量浓度为0 14mol l的nacl溶液中 dna的溶解度最低 dna存在于析出物中 故不能滤去析出物 a项错误 利用dna与rna 蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异 提取dna 去除其他成分 b项正确 进行dna鉴定时 加入二苯胺试剂后还需经沸水浴加热才能出现蓝色 c项错误 用菜花作为实验材料时需先用洗涤剂溶解细胞膜 d项错误 3 在 dna的粗提取与鉴定 实验中 将第三次过滤获得的纱布上含有的dna的黏稠物 含有较多杂质 分别处理如下 上述操作过程正确的是 a b c d 解析 选c 第三次过滤后纱布上的是粗提取的dna 此dna还含有杂质 因此将其溶于2mol l的nacl溶液中 再进行过滤 以除去不溶于2mol l的nacl溶液的杂质 然后向滤液中加入冷却的体积分数为95 的酒精即可析出dna 然后挑出dna进行鉴定 4 某同学以菜花为实验材料 进行 dna的粗提取与鉴定 实验 步骤如下 步骤一 称取30g菜花 去梗取花 切碎 步骤二 将碎菜花放入研钵中 倒入10ml研磨液 充分研磨10min 步骤三 在漏斗中垫上滤纸 将菜花研磨液过滤到烧杯中 在冰箱中放置几分钟 取上清液 步骤四 将一倍体积的上清液倒入两倍体积的某溶液中 并用玻璃棒缓缓地 轻轻地搅拌溶液 将絮状物缠绕在玻璃棒上 请回答下列问题 1 请指出并改正该同学实验操作中的错误 2 步骤二不能采用加入蒸馏水使细胞吸水涨破的方法 原因是 为使研磨充分 可以加入 为溶解dna 加入的研磨液中氯化钠浓度应为 3 步骤四中所用两倍体积的某溶液为 4 简要说明鉴定步骤四所得絮状物是dna的基本实验设计思路 5 该同学在上述实验的基础上 想进一步探究絮状物中是否含有蛋白质 他还需要准备的试剂有 请你帮助该同学对步骤四的絮状物中是否含有蛋白质给予鉴定 解析 本实验与用鸡血细胞提取dna的方法相似 只是由于植物细胞具有细胞壁 所以使细胞破裂释放出dna的方法是不同的 要进行步骤二中充分研磨 根据教材实验 加入二氧化硅可以使研磨较为充分 dna在2mol l氯化钠溶液中溶解度较高 析出dna时所加入的某溶液应是体积分数为95 的冷酒精 因为dna不溶于酒精 鉴定dna时 可将其溶解在0 015mol lnacl溶液中 加入二苯胺试剂 沸水浴加热 观察溶液颜色是否变蓝 鉴定蛋白质需要双缩脲试剂 设计实验时需要设置对照实验 所以需要添加蛋白质标准样液 通过观察溶液颜色变化确定絮状物中是否含有蛋白质 答案 1 滤纸改为纱布 或尼龙布 2 植物细胞具有细胞壁 吸水后不会涨破二氧化硅2mol l