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文档简介
生药学部分实验一 生药的理化鉴定(1) (25)实验二 生药的理化鉴定(2) (29)实验三 冬虫夏草、茯苓、贯众、麻黄等生药鉴别 (33)实验四 大黄、何首乌、黄连,川乌、白芍等生药的鉴定(36)实验五 淫羊藿、防己、厚朴、五味子、肉桂等生药的鉴别 (39)实验六 延胡索、板蓝根、大青叶、山楂苦杏仁等生药的鉴别 (42)实验七 黄芪、甘草、槐米、黄柏等生药鉴别(45)实验八 人参、三七、沉香、丁香等生药鉴别 (48)实验九 当归、川芎、柴胡、白芷、小茴香、马钱子等鉴别(51)实验十 龙胆、薄荷、丹参、黄芩等生药鉴别(54)实验十一洋金花、地黄、金银花、天花粉等生药鉴别(57)实验十二桔梗、茵陈、红花、苍术、木香等生药鉴别(60)实验十三麦冬、知母、砂仁、半夏、天麻等生药鉴别(63)实验十四动物、矿物类生药 (67)实验十五中成药的显微鉴定 (69)实验十六生药的综合鉴定 (71)附录一 显微绘图法 (72)附录二 显微测量法 (75)附录三 组织透化法(78)附录四 常用试剂及配置方法(79)附录五 石蜡切片法(82)实验一 生药的理化鉴定(1)一、 实验目的(一)掌握生药中糖类、苷类成分与氰苷、酚苷、蒽苷的理化性质和定性反应并能应用于生药鉴定中,以确证生药中这些成分是否存在。(二)学会生药理化鉴定的常用方法。(微量升华法、灰分测定法)二、实验材料、仪器及试剂 党参、玉竹、苦杏仁、牡丹皮、虎杖、大黄、三七 试管架、试管、量筒、具塞试管、烧杯、三角烧瓶、水浴锅、吸管、滤纸、小漏斗。马福炉、天平、坩锅、干燥皿、Fehling试剂、-萘酚试剂、10的盐酸试液、10氢氧化钠试液、苦味酸钠试纸、氢氧化钾试液、硫酸亚铁试液、稀盐酸试液、1三氯化铁、5三氯化铁试液、醋酸镁甲醇溶液、浓硫酸。三、实验内容与方法1、单糖、多糖与苷类成分的鉴别 取玉竹0.5g,剪碎,置50ml三角瓶中,加蒸馏水10ml,瓶口放一小漏斗(空气冷凝,防止水分蒸发太多),水浴温热10分钟,滤过药渣加适量水,再滤过,合并滤液至10ml,备用。 (1)费林(Fehling试验)试验:取滤液lml于50ml烧杯中,加碱性酒石酸铜试剂(Fehling)试剂8ml(临用时由甲液与乙液等量混和而成,置沸水浴加热5分钟,观察有无砖红色沉淀产生(尤其要观察瓶壁处)。反应原理:(2)-萘酚试验(Molish试验):取玉竹粉末0.51g,加蒸馏水10ml。水浴温热510min,滤过,取滤液1ml于大试管中,加-萘酚试剂23滴,摇匀,沿管壁,缓慢加入浓硫酸1m1,保留二层液面,观察二液面交界处有无形成紫红色环。反应原理:2、氰苷的鉴别(1)苦味酸钠试验:取苦杏仁1粒,研碎后置具塞试管中,加水数滴湿润,管口悬挂苦味酸钠试纸,密塞,将试管置60水浴中温热,观察试纸逐步由黄变红。(2)普鲁士蓝试验:取苦杏仁1粒,研碎后置试管中,加水数滴湿润,立即用滤纸包扎管口,并加氢氧化钾试液1滴使湿润,将试管置60C水浴温热约10分钟后,于试纸上加硫酸亚铁溶液1滴,并加稀盐酸和5三氯化铁试液各1滴,滤纸即显蓝色。3、酚苷的鉴别 取牡丹皮0.5g,加乙醇5ml,水浴温热5分钟,取上清液2ml于试管中,滴加1三氯化铁试剂1滴,即呈紫红色。反应原理:ROH+(Fe(H2O)6)3+Fe(H2O)5(ROH)3+Fe(H2O)5RO2+H3O+(ROH示丹皮酚)4、蒽苷的鉴别(1)碱液反应:取大黄粉少许于小试管中,加10氢氧化钠试液,即呈红色,继续加10盐酸使中和,药液变黄色,再加氢氧化钠试液又显红色。(2)Borntrager(保恩特来格)反应:取大黄粉约0.5g于试管中,加10氢氧化钠试液2ml,振摇后过滤,得红色滤液,加10盐酸酸化后,溶液转为黄色,加乙醚2ml,振摇后静置分层,分取黄色的乙醚液于另一试管中,再加l0氢氧化钠试液1ml,振摇匀后静置分层,则碱液层又显红色。(3)醋酸镁反应:取大黄粉末约0.2g于试管中,加乙醇3ml,水浴温热5分钟,滤过,得滤液,加l醋酸镁甲醇溶液2滴,振摇后观察,溶液渐呈橙红色。(4)微量升华:如图5所示,取大黄粉末少许于金属圈内、小火徐徐加热数分钟,可见黄色升华物附着载玻片上,将玻片取下翻转后,在显微镜下检视,低温升华时可见针状结晶、高温时可见羽毛状结晶,滴加碱液后,结晶消失,并呈红色。5、生药中灰分的测定总灰分测定 取粉碎后过二号筛的三七粗粉约3g,置炽灼至恒重的坩埚中,精密称定(精确至0.01g),放马福炉中缓缓炽热,至完全灰化时,逐渐升温到500600,完全灰化至恒重。根据残渣重量,计算三七中含灰分的百分数。酸不溶性灰分的测定 取上面所得灰分,加入稀盐酸约10ml,用表面皿覆盖,水浴上加热10分钟,表面皿用5ml热水冲洗,洗液入坩埚,用无灰滤纸过滤,坩埚内残渣用水洗于滤纸上,并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。将滤渣连同滤纸移至同一坩埚内,干燥并炽灼至恒重。根据残渣重量,计算三七中含酸不溶性灰分的百分数。四、实验报告1.记录各鉴别反应的步骤与结果,并说明反应原理(可用化学反应式表示)。2.计算出三七的总灰分、酸不溶性灰分的百分含量。五、思考题1.怎样鉴别某生药含单糖、多糖或苷类成分?2.灰分测定的原理是什么?3.总灰分和酸不溶性灰分与生药品质的关系是什么,举例说明。实验二 生药的理化鉴定(2)一、实验目的(一)掌握生药中黄酮苷类、皂苷类、强心苷类、香豆精苷类的理化性质和定性反应,并能应用于生药鉴定中。(二)掌握生药中生物碱类、鞣质类、氨基酸与蛋白质类的理化性质和定性鉴别反应。(三)学会应用荧光分析法、薄层层析法,水份测定法鉴别生药。二、实验材料、仪器及试剂槐米、桔梗、穿山龙、地高辛片(tabellae digoxin)、白芷、粉防己、硫酸阿托品注射液、五倍子、槟榔、天花粉。试管、试管架、量筒、烧杯、水浴锅、50ml三角烧瓶、滤纸、蒸发皿、紫外分析灯、硅胶板、层析瓶。乙醇、1盐酸、碘化铋钾试剂、碘化钾碘试剂、碘化汞钾试剂、硅钨酸、明胶氯化钠溶液、三氯化铁试剂、饱和溴水、醋酸铅试剂、饱和石灰水、茚三酮试剂、10氢氧化钠溶液、0.5硫酸铜试剂、镁粉、1三氯化铝甲醇液、10盐酸试液、0.9氯化钠溶渡,2红细胞悬浮液、醋酐、浓硫酸、冰醋酸、三氯化铁-冰醋酸试剂、K-K试剂、3,5-二硝基苯甲酸乙醇试液、乙醚、7盐酸羟胺甲醇溶液、20氢氧化钾甲醇溶液、稀盐酸、1三氯化铁乙醇溶液、甲苯、醋酸乙酯、甲酸。槐花乙醇提取液、远志生理盐水提取液、夹竹桃醇提取液、粉防己酸性乙醇液;核桃楸皮、秦皮和秦皮甲素乙醇提取液。三、实验内容与方法1、黄酮苷的鉴别 取槐米粗粉约0.5g,加乙醇10ml,水浴温热5分钟,滤过,得滤液。(1)盐酸-镁粉还原反应:取上述滤液2ml于大试管中,加镁粉少许振摇,滴加浓盐酸数滴,观察到产生许多泡沫,同时溶液渐变樱红色。(2)三氯化铝反应:取上述滤液2ml于试管中,加1三氯化铝甲醇溶液1ml,振摇,可见溶液渐变鲜黄色。2、皂苷的鉴别 取桔梗与穿山龙粗粉各1g,分别置50ml三角烧瓶中,加水l0ml,煮沸2分钟,滤过,滤液加水至10ml,备用。(1)泡沫试验:分别取上述滤液各2ml,置2个试管中,密塞或以手指压住管口,强烈振摇数分钟,观察是否产生大量泡沫,放置10分钟后,再记录泡沫的高度。另取桔梗与穿山龙滤液各4ml,分置4支试管中,每支2ml滤液,其中一支桔梗与一支穿山龙滤液中分别加10盐酸试液调节pH为l,另一支桔梗与另一支穿山龙滤液中分别加10%氢氧化钠试液调节pH为13,将酸碱两管滤液同时强烈振摇数分钟,观察泡沫高度。可见桔梗溶液的酸碱两管泡沫高度相同。而穿山龙碱液管的泡沫比酸液管高。(2)溶血试验:取远志生理盐水提取液2ml置一试管中,另取一试管加0.9NaCl溶液2ml,于二支试管中分别加2红细胞球悬浮液1ml,摇匀后放置,注意观察哪支试管溶液变清。3、强心苷的鉴别 分别取新鲜夹竹桃叶1片剪碎与地高辛3片,各置50ml三角烧瓶中,加70乙醇10ml,用空气冷凝装置水浴加热5分钟,滤过,得滤液,并加水至10ml,备用。(1)-去氧糖反应(Keller-Kiliani反应):取夹竹桃滤液2ml于蒸发皿中水浴蒸干,加三氯化铁-冰醋酸试液lml使残渣溶解,并转入小试管中,沿管壁缓缓滴加浓硫酸1ml,观察两液层交界处有无棕色环产生,上层醋酸液呈何颜色?另取地高辛滤液2ml,同样操作,观察结果。(2)3,5-二硝基苯甲酸反应(Kadde反应),取滤液1ml于试管中,滤液中加新配制的3,5-二硝基苯甲酸乙醇溶液1ml,观察溶液是否变成紫色。反应原理(C17上不饱和内酯环反应)4、生物碱的鉴别 取粉防己粗粉0.5g,置50ml三角烧瓶中,加乙醇15ml、用空气冷凝装置、水浴回流10分钟,滤过。滤液置蒸发皿中,于水浴蒸干,残渣加l盐酸5ml使溶,滤过,滤液分置4支小试管中,每试管1ml,分别滴加下表中生物碱沉淀剂各2滴,观察沉淀的颜色与数量(以、表示)。同时取4支去硫酸阿托品注射液,启封后按下表滴加生物碱沉淀剂,并记录反应结果。沉淀剂沉淀颜色与数量样品碘化铋钾碘化钾碘碘化汞钾硅钨酸粉防己提取液硫酸阿托品注射液5、荧光分析法:取秦皮,核桃核桃楸皮粉末各1g,放入三角烧瓶中,分别加入乙醇l0ml,水浴回流提取l0分钟,放冷过滤。滤液作供试品。另取秦皮甲素(七叶树苷),加乙醇制成每1ml含5mg的标准液做对照品。将三者分别点于滤纸上,置365nm紫外分析灯下观察荧光反应。6、薄层层析法:(两人做一份)样品、标准品的制备:同荧光分析法。制板:取硅胶G2克加入0.5羧甲基纤维素钠的水溶液6ml,搅拌均匀,倒在6cm22cm干净的玻璃板上铺匀,放置水平位置,自然干燥,干后于105活化一小时,活化后置干燥器中备用。展开剂:甲苯:醋酸乙酯:甲酸:乙醇3:4:l:2点样:距玻璃板下端一厘米处,分别点上秦皮、核桃楸皮的提取液及秦皮甲素的标准液。展开方式:倾斜上行法。展距约15cm。晾干后,置365nm紫外分析灯下观察荧光斑点并描绘出层析图谱,计算秦皮甲素的Rf值。7、水分测定法(甲苯法)当归约50g。水分测定装置一套,如图6【实验内容、方法及步骤】1、甲苯的制备 取甲苯约250m1,加少量蒸馏水振摇,放置后弃水层再蒸馏甲苯后备用。2、测定 取经粉碎的当归粗颗粒约20g,精密称定(准确至0.01g),置A瓶中,加甲苯约20ml,如图连接,再从冷凝管顶部加甲苯充满B的狭窄部分,将A置可调温电热套中加热至苯沸腾,调节温度使2滴秒,至B管的水量不再增加,将冷凝管内部用甲苯冲洗,再用饱蘸甲苯的长刷把管壁上的甲苯推下,继续蒸馏5分钟,放冷至室温,待水分与甲苯完全分离,检读水量,并换算成当归中含有水分的百分数。 生药中的水分含量【水分量(ml)样品量(g)】100% 四、实验报告1、记录有关鉴别反应、化学定性、荧光分析与微量升华的实验结果。2、绘出秦皮、核桃楸皮的薄层分析图谱并计算出秦皮甲素的Rf值。3、计算出当归的水分含量。五、思考题1、某生药的乙醇提取液与盐酸-镁粉反应不显红色,则能否否定其存在黄酮类成分?2、试述K-K反应的原理。3、生药中含水量与生药品质有何关系?实验三 冬虫夏草、茯苓、贯众、麻黄等生药鉴别一、目的要求 掌握冬虫夏草、茯苓、猪苓、贯众、麻黄的性状鉴别、显微鉴定特征及理化鉴别方法。二、仪器、用品、药品 白瓷板、小勺、解剖针、酒精灯、试管、吸水纸、镊子、载玻片。水合氯醛、蒸馏水、5氢氧化钾、20%氢氧化钠、碘碘化钾试液、碘试液、碘化铋钾,碘化汞钾、2%麻黄碱酸性水溶液,2硫酸铜试剂、l0氢氧化钠、乙醚。 冬虫夏草、茯苓个、猪苓个、茯苓皮、茯苓块、茯神、猪苓片、贯众个、贯众饮片、麻黄。 草麻黄(雌、雄株)腊叶标本。 冬虫夏草子座横切片、绵马贯众、荚果蕨贯众、草麻黄茎横切片。 茯苓、猪苓粉末、草麻黄粉末。三、实验内容与方法(一) 性状鉴定 1、茯苓poria和猪苓polyporus 观察并比较茯苓、猪苓二者在外形,颜色、表面特征、断面颜色及质地等方面有何不同?再观察茯苓皮、赤茯苓、茯神和猪苓饮片各有何特征,如何区分? 2、冬虫夏草Cordyceps注意冬虫夏草的虫体似蚕,具2030条环节,腹面有足8对,子座棕色,长圆柱形,顶端稍膨大,其内密生子囊壳(子实体)。 3、观察多种贯众,注意形状、大小和叶柄断面特征。4、麻黄Herba Ephedrace:观察草麻黄的药材,并取草麻黄腊叶标本观察,注意其茎节、叶片等有何特征。再分别观察雌株与雄株,注意花序的着生位置与特征等。注意与中麻黄及木贼麻黄的区别。草麻黄Ephedra Sinica:少分枝,节上鳞片2片。裂片呈锐三角形,顶端反卷,基部约12合生成筒状。木贼麻黄E.equlsetina:小枝多分枝,节上鳞片2,裂片呈钝三角形,多不反卷,基部约23合成鞘状。 中麻黄E.intermedia: 小枝多分枝,节上鳞片3,裂片三角状圆形,微反曲,基部约13合成或不合生。(二)显微鉴定1、取茯苓粉末,用水或5%氢氧化钾装片,镜检可见:茯苓:多为无色不规则的颗粒状团块或末端圆钝的分枝状团块,菌丝细长,多无色,可见少数棕色菌丝,无草酸钙结晶。2、冬虫夏草子座横切面:子囊壳近表生,基部陷于子座内,几列?内有多数细长的子囊,注意壁的厚度、孔口;子囊孢子24个,线形,具有多数横隔。3、取绵马贯众的叶柄横切片观察:注意表皮、下皮层、内皮层及束鞘细胞的特征。维管束的类型、数目及排列方式。细胞间隙大,有的间隙有单细胞间隙腺毛,呈球形或棒状,含棕色分泌物。注意:荚果蕨贯众叶柄横切有何不同。4、麻黄:取草麻黄茎横切片,置显微镜下观察可见,切面呈圆形或椭圆形,具多数棱脊,呈波状凹凸。表皮:外被厚的角质层,细胞外壁增厚,壁上有细小草酸钙砂晶两棱线间有内陷气孔,保卫细胞切面呈三角形,内外壁均增厚木化。皮层:外侧23列细胞径向延长,似栅状,每一棱脊的表皮内侧有非木化的下皮纤维束。薄壁细胞中含草酸钙砂晶与方晶,纤维束散在。维管束:韧皮部外侧具新月形纤维束,形成层几成环,木质部三角形,木化,多少连成环,偶见麻黄式穿孔板。髓:薄壁细胞中含红棕色物质,偶见环髓纤维。取麻黄粉末少许,放在载玻片的中央偏右一些,滴加水合氯醛溶液2滴,用解剖针调和均匀,在酒精灯上以小火微微加热透化(要使载玻片保持平稳,慢慢移动,且勿使液体沸),在加热过程中,要随时添加水合氯醛溶液,千万勿蒸干,加热到粉末微透明为止,待载玻片冷却后再滴加水合氯醛溶液少许,用解剖针将粉末搅匀,加上盖玻片,即可镜检,可见:表皮碎片:黄棕色,表皮细胞表面观长方形,壁上布满草酸钙砂晶,有的可见气孔。气孔:多位于表面碎片上,表面观内陷,长圆形,保卫细胞多单个,似电话筒状。皮层纤维:黄色,成束或单个散在,壁极厚,壁上布满砂晶(嵌晶纤维)。导管:多成束,多为螺纹与孔纹导管,偶见麻黄式穿孔板(导管分子横壁倾斜,有数个圆形的穿孔排成13列)。色素块:红棕色,散在,形状不规则。(三)理化鉴定 1、分别取茯苓、猪苓粉末少量,置白瓷板的凹窝内,各加入碘化钾碘l2滴,放置片刻后,茯苓呈深红色,猪苓呈棕褐色(检查多糖);取茯苓粉末约0.1g于试管中,加水5ml,煮沸,加碘试液3滴,溶液显黄色,应不显蓝色或紫红色(检查淀粉及糊精);分别取茯苓,猪苓粉末少量,置白瓷板凹窝内,各加入适量20氢氧化钠溶液茯苓呈粘胶状,猪苓不呈粘胶状(与茯苓区别)。2、麻黄的沉淀反应:取2麻黄碱水溶液,在白瓷液的两个凹窝内各滴l2滴,再分别加入碘化铋钾和碘化汞钾试剂l2滴,前者产生桔黄色沉淀,后者不产生沉淀。3、麻黄的双缩脲反应:取2麻黄碱酸性水溶液2ml于试管中,加入2硫酸铜试剂数滴,再加入l0氢氧化钠至微过量(约5滴),呈紫红色,然后加入等量乙醚,轻轻振摇,放置数分钟后,醚层显紫色,水层呈蓝色。四、实验报告:(一)绘草麻黄粉末特征图,茯苓粉末特征图。(二)记录草麻黄的理化鉴别结果。(三)记录茯苓理化鉴别的实验结果。五、思考题:(一)麻黄活性成分是什么?横切片和粉末有哪些重要鉴别特征?(二)绵马贯众的药材性状和显微特征有哪些?(三)茯苓主要含有何种成分,有何药理作用?(四)茯苓与猪苓主要区别点是什么?(五)冬虫夏草的入药部位,鉴别点是什么?何谓真菌类植物?常用真菌类生药有哪些?实验四 大黄、何首乌、黄连、川乌、白芍等生药的鉴定一、实验目的 1、掌握大黄、何首乌、黄连、川乌、白芍实验观察的各项内容。 2、了解牛膝、牡丹皮等生药的性状鉴别特征。二、实验材料,仪器及试剂 1、药材及饮片:大黄、何首乌、黄连(味连、雅连、云连)、川乌、附子(黑附片、白附片)、白芍(赤芍)、虎杖、牛膝、川牛膝、牡丹皮、升麻、威灵仙、白头翁。 2、药材横切片:大黄根茎、何首乌、味连、附子。 3、药材粉末:大黄、何首乌、黄连。 4、仪器试剂:试管、试管夹、酒精灯,微量升华器、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、纱布、紫外分析灯。10NaoH、10HCI、氨水、乙醚、30硝酸。三、实验内容与方法(一)性状鉴定: 1、大黄Raidx Rhlzoma Rheiz:观察大黄生药性状,判断其为根还是根茎。注意形状、颜色、纹理、质地。髓部有无星点?其形状,大小和分布如何?嗅之有特殊香气,味苦,嚼之粘牙,有砂粒感。 2、何首乌:Radix Polygoni Multdlori:注意其外部颜色,断面黄棕色或淡红棕色,粉性。中央有较大的木心。皮部可见“云锦花纹”(异型维管束)。 3、黄连Rhizoma Coptidls:味连呈簇状分枝,形如倒鸡爪,表面有棕褐色侧根,节密生,结节状隆起。上具褐色鳞片。部分节间平滑(习称过桥),断面皮部和髓部暗棕色,木部鲜黄色,味极苦。比较雅连、云连与味连的不同点。 4、乌头与附子Radix Aconiti et Radix Aconiti Lateralis Preparata:乌头多为母根,呈瘦长的倒圆锥形,上具残茎,表面皱缩不平,散生小瘤状侧根或摘除子根的痕迹。断面灰白色、粉性,味麻。 盐附子:为子根,圆锥形,饱满,表面附盐霜。顶端具芽痕,周围有瘤状突起的支根(钉角),侧面具与母根摘离痕迹。断面灰棕色,中间略浅,可见多角形的形成层环纹、味咸而麻舌。 白附片:纵切片,黄白色,半透明。 黑附片:为纵切片,呈黑棕色,角质,近边缘可见稍突起的木质部。 5、白芍与赤芍:Radix Paeonlae Alba and Radix Paeoniae Rubra。白芍:根呈圆柱形,表面何色?质坚实,角质样,切断面何色?木部具放射状纹理。味微苦酸。赤芍:根表面暗棕色至紫棕色,有横向突起的皮孔,外皮易剥落,质地如何?断面和白芍有何不同?味微苦酸涩。 6、结合讲义,观察虎杖、怀牛膝、川牛膝、牡丹皮、升麻、威灵仙、白头翁的性状鉴别特征。(二)显微鉴别 1、大黄:取大黄根茎横切片,自外向内依次观察:木栓层和皮层大多已除去,偶有部分残余,正常维管束为外韧型,形成层细胞扁平,排列成环,外侧为韧皮部、韧皮射线较平直,内含棕色物质;内侧为木质部,木射线内也含棕色物质,导管稀疏排列。 髓:大,由大型薄壁细胞组成,异型维管束分布在髓内;薄壁细胞内含草酸钙簇晶和众多淀粉粒。 每个异型维管束自外向内有以下构造。 木质部:位于形成层外侧,导管径向排列,稀疏。 形成层:环状,由数列扁平细胞组成。 韧皮部:位于形成层内侧,有时可见大型粘液腔。 射线:由1至数列薄壁细胞组成,自韧皮部向外星芒状射出,细胞内含深棕色物质。 2、取何首乌横切片,置显微镜下观察: 木栓层:为多列整齐扁平的木栓细胞,充满红棕色物质。 皮层:较宽,由何种细胞组成?皮层内散生的异型维管束为近圆形的复合维管束,偶有单个维管束,均为外韧型。 韧皮部:窄小。 形成层:呈环状。 木质部:导管较少,周围有管胞及木纤维环绕,中心可见初生木质郡,薄壁细胞内可见淀粉粒和草酸钙簇晶,有些薄壁细胞中充满红棕色物质。 3、取黄连(味连)根茎横切片,置显微镜下观察可见。 木栓层:为数列扁平的木栓细胞,有的其间散有石细胞,木栓层外侧常有残留的表皮层和鳞叶维管束。 皮层:宽广。其间散有单个或成群的石细胞,可见横走的根迹维管束。 韧皮纤维:位于韧皮部外恻,成束,外方常伴有少数石细胞。 维管束;外韧型,成断续的环状排列,束间射线宽广;束间形成层不明显。木质部细胞均木化。 髓:由薄壁细胞组成。雅连可见单个或成群的石细胞。 取黄连粉末做成临时装片,镜检可见。 石细胞:多见。淡黄棕色,类多角形纹孔明显。 木纤维:多成束。黄色、壁厚。 韧皮纤维:成束。黄色、壁厚。 另外可见木栓细胞(表面观);鳞叶细胞(细胞长方形,壁弯曲);导管碎片等。 4、取附子根横切片,置显微境下观察可见: 后生皮层:位于最外方,为数列棕色木栓化细胞,多破裂,皮层细胞间散在石细胞,单个或35个成群。 内皮层:明显。为一列排列整齐的扁平细胞,换高倍镜观察可见凯氏点。 韧皮部:宽广,小型筛管群径向散列,细胞内无淀粉粒。 形成层:呈不规则多角形。 本质部:导管多呈“V”字形排列,有时可见初生木质部。 髓:明显。 薄壁细胞中充满淀粉粒。(三)理化鉴别 1、微量升华:取何首乌粉末少许,微量升华后,在显微镜下可见何种类型结晶?加碱液有无颜色变化?2、Borntrager反应:取大黄粉末0.5克,置试管中,加10%氢氧化钠5毫升,微振摇,观察颜色变化。取上清夜2毫升加盐酸至溶液为黄色;再加等量乙醚,轻轻振摇,放置片刻。醚层应显黄色。分取醚层,加氨试液,振摇,氨液层应显红色,醚层变为何色?上述颜色变化的原理是什么?3、黄连的定性反应(示教)取黄连粉末少许于载玻片上,加30%硝酸1-2滴,放置5-10分钟后镜检,可见针簇状的硝酸小檗碱结晶。为何产生此反应?又取黄连饮片,置紫外灯下观察,显金黄色荧光,木质部尤为明显。四、实验报告 1、绘黄连根茎横切面简图。2、记述何首乌、大黄、黄连理化鉴定结果。五、思考题 1.附子根的组织构造与正常双子叶植物次生根的构造有何不同? 2.味连性状,显微结构上有哪些鉴别特征?它所含的主要成分是什么?如何鉴别? 3.大黄药材断面有哪些突出特征?横切面髓部常见什么样的结构?实验五 淫羊藿、防己、厚朴、五味子、肉桂等生药的鉴别 一、实验目的 1掌握淫羊藿、防己、厚朴、五味子、肉桂等药材的实验观察各项内容 2了解北豆根、辛夷、乌药的性状特征。二、实验材料、仪器及试剂 1药材及饮片:淫羊藿、防己(广防己、木防己)、厚朴、五味子、肉桂(桂枝)、北豆根、辛夷、乌药 2药材横切片:淫羊藿、五味子、肉桂 3药材粉末:肉桂、防己三、实验内容与方法(一)性状鉴别 1淫羊藿:Herba Epimedii 茎细长平滑,黄绿或棕黄色,叶片卵圆形,中间片较两侧叶片大,先端尖,叶基部深心形,两侧小叶基部偏斜,边缘有细毛状锯齿,上表面绿色或黄绿色,无毛,下表面灰绿色,有稀疏毛茸,叶片近革质而脆,气弱,味极苦。 2防己(粉防己):Radix Stephaniae Tetrandrae 根在形状上有何特征?表面何色?具明显横向突起的皮孔。纵剖面黄白色,有维管束条纹。质坚重,断面平坦,灰白色、粉性。另取广防己生药,比较两者的异同点。 3厚朴:Cortex Magnoliae 观察厚朴生药(包括干皮、枝皮与根皮)的性状特征,注意其卷曲形式,外表面与内表面色泽、断面特征,质地与气味。 4五味子:Fructus Schisandrae 北五味子果实呈皱缩的不规则形,表面紫红色或暗红色,显油润,果肉柔软,内含种子12粒;种子肾形,表面黄棕色,具光泽,种皮硬脆,种仁淡黄色,果肉味酸甜,种子破碎微有香气,味微咸而辛。 南五味子:取南五味子与北五味子生药进行比较,注意两者的异同点。 5肉桂:Cortex Cinnamomi 取企边桂和油桂筒观察:注意两者的外表面颜色,特征,内表面颜色,划痕,折断面特征,气味等方面的异同点。注意板桂的形状。 6参照讲义,观察北豆根、辛夷、乌药的性状特征。(二)显微鉴别 1淫羊藿:取淫羊藿叶横切片,置显微镜下观察可见 上表皮:1列细胞近方形,外具角质层。 下表皮:l列细胞近方形,有气孔,有时可见残留非腺毛。 叶肉:栅栏组织23列细胞,短小,排列不整齐,有的细胞中含深色物;海绵组织细胞排列疏松,支脉维管束明显,周围异细胞中含草酸钙棱晶或柱晶。 主脉:薄壁细胞木化,维管束3个,外韧型;木质部具导管与纤维。 2厚朴干皮横切面镜检可见 木栓层:由多列细胞组成,栓内层为24列石细胞。 皮层:较宽厚,散有多数石细胞群,石细胞多呈分枝状,靠内层有切向延长的椭圆形油细胞散在,壁稍厚。 韧皮部:占大部分,射线宽13列细胞,韧皮纤维众多,壁极厚,油细胞散在。 3取五味子横切片观察 (1)果皮:外果皮 为1列长方形表面细胞、壁稍厚、外被角质层、间有油细胞。 中果皮 10余列薄壁细胞,其间散有小形外韧型维管束。 内果皮 细胞1列,方形,较小,排列紧密。 (2)种皮:最外层1列栅状石细胞,其下为34列类圆型石细胞,较大;石细胞层内侧为数列薄壁细胞,种脊部位有维管束;往里为油细胞层,由l列长方形油细胞组成,含有棕黄色挥发油,再往里为35列小形细胞,最里面为内种皮,细胞壁增厚。 (3)胚乳:细胞多角形,细胞壁较厚,细胞内含脂肪油滴及糊粉粒。取五味子粉末做成临时装片镜检可见: 种皮外层石细胞:表面观多角形或长多角形,壁厚孔沟极细密。 种皮内层石细胞:呈类多角形或不规则形,纹孔较大而密。 外果皮细胞:表面观类多角形,垂周壁连珠状增厚,角质线纹明显;油细胞散在于表皮中,类圆型,内含挥发油。尚可见中果皮薄壁细胞、纤维、淀粉粒、内胚乳细胞等。 4取肉桂横切片观察 木栓层:木栓细胞数列,最内层木栓细胞外壁增厚,木化。 皮层:散有石细胞、油细胞及粘液细胞。 中柱鞘:有石细胞群,排列成环,外侧伴有纤维束。 韧皮部:较厚。可见厚壁纤维和油细胞,射线l2列,含细小草酸钙针晶,薄壁细胞中含有淀粉粒。 取肉桂粉末做成临时装片,镜检可见: 纤维:大多单个散在,长梭形,壁极厚,木化,纹孔及孔沟不明显。 石细胞:较多,类方形或类圆型,壁厚,有的一面菲薄。 油细胞:类圆型或长圆形,有时尚会有黄色挥发油滴。 草酸钙针晶:众多,细小散在或成束,常存在于射线细胞中。 木栓细胞:表面观呈多角形,木化,常含棕色物质。四、实验报告 绘肉桂粉末特征图。五、思考题 1防己的药材性状有哪些主要特征?其所含的主要成分是什么?如何鉴别? 2厚朴有哪些规格,各有何特征? 3南五味子与北五味子有何异同点? 4肉桂的商品规格有哪些,药材性状、显微方面有哪些鉴别特征?实验六 延胡索、板蓝根、大青叶、山楂、苦杏仁等生药的鉴别一、实验目的 1、掌握延胡索、板蓝根、大青叶、山楂、苦杏仁实验观察的各项内容 2、了解青黛、杜仲、枇杷叶、木瓜等药材的性状鉴别特征二、实验材料、仪器及试剂 1、药材及饮片:延胡索、板蓝根、大青叶(蓼兰叶、菘兰叶)、山楂(野山楂)、苦杏仁、浸泡苦杏仁(甜杏仁)、青黛、杜仲、枇杷叶、木瓜 2、药材横切片:延胡索、板蓝根、苦杏仁 3、透化标本:蓼兰叶4、腊叶标本:蓼兰、菘兰 5、药材粉末:延胡索、蓼兰叶 6、仪器试剂:研钵、酒精灯、具塞试管、试管夹、苦味酸钠试纸、稀盐酸、0.5N硫酸、l铁氰化钾、1三氯化铁、重铬酸钾溶液。 三、实验内容与方法 (一)性状鉴别: 1、延胡索:Rhizoma Corydalis 块茎呈不规则扁球形,有的呈倒圆锥形。表面灰黄色或灰棕色,有不规则网状细皱纹,上端有略凹陷的茎痕,底部中央略凹呈脐状,有数个圆锥状小凸起(根痕)。质坚硬,断面棕黄色角质样,有蜡样光泽,味苦。 2、板蓝根:Radix Isatidis 圆柱形、淡棕黄色,表面有横长皮孔样突起,有支根痕。根头部膨大,顶端有盘状凹陷的茎基。周围有轮状排列的叶柄残基和密集的疣状突起。质坚实,断面粉性,味微甜而后苦涩。 3、大青叶:Folium Isatidis 结合原植物标本观察菘蓝与蓼蓝叶,注意二者在颜色、叶片形状、叶缘、叶基、托叶及质地、气味等方面的不同点。 4、山楂:Fructus Crataegi 类球形,深红色,有光泽,表面有细小白色斑点。顶有凹窝,边缘有宿萼,基部有细果柄或柄痕。果核5枚,弓形。果肉深黄至淡棕色。气清香,味酸微甜。 5、苦杏仁:Semen Armeniacae Amarum 取浸泡的苦杏仁,注意其形状和颜色,基部对称否?基部中央有一棕色合点,由此散出行多深棕色的脉纹,种子尖端为种孔,近尖端边缘处有短线状种脐,种脐与合点间为线形种脊。剥开种皮可见两枚白色肥厚子叶,加水研磨,有苯甲醛气味。味苦。 甜杏仁:较大,基部对称,味淡,加水研磨苯甲醛气味较弱 6、参照讲义,观察青黛、杜仲、枇杷叶、木瓜等药材的性状特征。(二) 显微鉴定 1、延胡索:取延胡索块茎横切片显微镜下观察 皮层细胞10余层,扁平。外侧23层常木化,具细密纹孔 韧皮部宽广,筛管与管状分泌细胞伴生,成环状散列。 木质部常分为47小束,疏列成环状,中央有较宽的髓。 粉末观察: 薄壁细胞类多角形,类方形或类圆形,含糊化淀粉粒。 厚壁细胞类多角形,长条形,壁念珠状增厚,木化、纹孔密集。 石细胞单个散在或少数成群。 管状分泌细胞、导管可见。 2、板蓝根:取板蓝根横切片镜下观察 木栓层为数层细胞。 韧皮部宽广,射线明显。 形成层成环。 木质部导管类圆形,木纤维成束。 薄壁细胞中含淀粉粒。 3、取已透化好的蓼蓝叶和蓼兰粉末,做成临时装片,镜检可见: 气孔:表皮细胞间嵌有气孔,为不典型的平轴式(两个付卫细胞不等大) 草酸钙簇晶:位于叶肉细胞内,多而明显。 多列式非腺毛:以叶缘、叶脉、侧脉上多见,壁厚、木化、有纹孔。 腺毛:以下表皮为多,为黄色圆点状,高倍镜下可见腺毛头部由28个细胞组成。 4、取苦杏仁种子横切片观察 种皮:表皮细胞1例,其间有近圆型橙黄色的石细胞,上半部突出于表皮外,下半部埋在表皮组织中,有大的纹孔。 营养层:位于表皮下方,细胞皱缩,散有细小维管束。 内种皮:细胞1列,含黄色物质。 胚乳:外胚乳为1列颓废细胞,内胚乳为1列长方形细胞,内含糊粉粒及脂肪油。 子叶:由薄壁细胞组成含有糊粉粒及脂肪油。(三) 理化鉴别 1、取延胡索粉末2g,加0.5N硫酸溶液10ml,振摇,滤过。取滤液2ml,加1铁氰化钾溶液0.4ml与1三氯化铁溶液0.3ml的混合液,显深绿色,渐变蓝色,放置后有深蓝色沉淀;另取滤液加重铬酸钾数滴,产生黄色沉淀。 2、苦杏仁甙的鉴别:取苦杏仁l2枚研碎,放人试管中加水或稀盐酸湿润,再取苦味酸钠试纸一条悬挂于试管口,管口用塞子连同试纸上端一同塞住;然后稍加热,过几分钟后试纸由黄变成砖红以,为什么?四、实验报告 1、绘延胡索、蓼蓝叶粉末特征图。 2、记述延胡索、苦杏仁理化鉴别结果。五、思考题 1、延胡索的主要化学成分是什么?有何药理作用?若想增强其疗效,应采用何种炮制方法? 2、如何进行叶类药材的鉴别研究?3、北方常用大青叶有哪几种?在性状、显微上它们有何区别,为什么都能做大青叶使用?实验七 黄芪、甘草、槐米、黄柏等生药鉴别一、目的要求 (一) 掌握黄芪、甘草、黄柏、槐米的性状显微特征(二) 掌握槐米的理化鉴别 二、实验用品、试剂、材料 黄芪、红芪、甘草、槐米、番泻叶、川黄柏、关黄柏生药及饮片,黄芪的伪品。黄芪、甘草、黄柏的横切片。甘草、黄柏粉末。槐米甲醇提取液、盐酸、镁粉、试管。三、实验内容与方法 (一) 性状鉴定 1、黄芪Radix Astragaly:圆柱形。表面灰黄或浅棕。有纵皱、皮孔及支根痕,外皮脱落处可见网纹。质柔韧,纤维性强,具粉性,断面显菊花心。味甘而有豆腥气。 类同品:红芪。表面红棕色,栓皮易脱落,质坚硬,致密。 注意伪品黄芪与正品的区别。 2、甘草Radis Glycyrrhizae根呈圆柱形。表面红棕色或灰棕色。有明显的皱纹和横长的皮孔,外皮有时呈鳞片状剥裂而露出黄色内皮。质坚实。折断时有粉尘散出。断面纤维性、淡黄色,形成层环明显,气微,味甜而特异。 根茎:园柱形,表面可见芽或芽痕,断面中央有髓。 3、槐米Flos Sophorae lmmaturus:注意花蕾的形状,大小和颜色。上部为黄白色的花冠,下部为黄绿色的钟状花萼。 4、黄柏Cortex Phellodendri观察黄柏生药(川黄柏和关黄柏)的性状特征,注意木栓层的有无与厚度,表面特征,平滑或粗糙,有无皮孔,分布及形状如何?色泽如何?二种有无不同?折断面和横断面特征各如何?同时注意气味及粘性。 5、番泻叶 Folium Sennae:狭叶番泻叶:卵状披针形。革质。先端尖而有锐刺,叶基不对称。有的表面有横斜压纹。尖叶番泻叶:宽披针形或长卵形,光端尖或微突,叶基不对称。无横斜压纹。 我们实验所用药材有混合品。其中还有少量耳叶番泻叶,小叶片呈卵圆形或倒卵形,先端钝圆,微凹或具刺突、叶基对称或不对称,表面多为红棕色,被有灰白色毛茸。(二)显微鉴定1、黄芪根横切片:木栓层:数列木栓细胞,栓内层由厚角细胞组成,切向延长。韧皮部:纤维成束或单个散在,纤维与筛管群、薄壁细胞交互排列,近栓内层处有时可见石细胞及纵向管状木栓组织(外为数层木栓细胞,中央为木化纤维及薄壁细胞,细胞内含棕色物质)。木质部:导管单个或23个相聚,导管间有木纤维束及木薄壁细胞。射线:发达,辐射状排列,外侧常弯曲,有裂隙。薄壁细胞中含淀粉粒。2甘草:取甘草根茎横切片:自外向内观察其组织的特征是:木栓层:为数列至2030列细胞,红棕色;排列整齐。皮层:较窄。为数列薄壁细胞,纤维群散在。韧皮部:筛管群常压缩变形而颓废成条状;韧皮纤维壁厚、成束,微木化其周围薄壁细胞中多含草酸钙方晶;韧皮射线多弯曲,常有裂隙。 形成层:束内形成层明显,为数列扁平细胞,束间形成层不明显。 木质部:导管较大,木纤维多成群,其周围薄壁细胞中也含草酸钙方晶,木射线较平。 髓部:根中心无髓。根茎中心有髓。薄壁细胞中含众多细小淀粉粒。取甘草粉末,制成临时装片镜检可见: 晶鞘纤维:众多,多成束;含晶细胞的壁增厚,非木化。纤维细长壁极厚,微木化,孔沟不明显。导管:主为具缘纹孔导管较大,多破碎。草酸钙方晶:呈类双锥形、长方形或类方形;木栓细胞:棕红色。表面观呈多角形,壁薄、微木化淀粉粒:多单粒,椭圆形,卵形或类球形,脐点点状或短缝状;复粒稀少,此外,有射线细胞及少数黄棕色色素块。3黄柏:自外向内注意观察下列组织特征。 木栓层:残存木栓细胞。 皮层:由薄壁细胞组成,石细胞与纤维成群或散在。石细胞形状多样,常呈分枝状或不规则状,孔沟明显。 韧皮部:射线细胞l至数列,细胞径向延长,纤维群成层,径向排列,木化。 皮层与韧皮部内均有粘液细胞,并有众多草酸钙方晶。 取黄柏粉末做成临时装片,镜检可见: 纤维:鲜黄色,常成束,多碎断,边缘微波状,周围细胞含草酸钙方晶,形成晶纤维,含晶细胞壁木化增厚。 石细胞:鲜黄色,分枝状,类圆形或纺锤形,分枝状者形大,壁厚,层纹明显。草酸钙方晶较多,有的呈双锥形。淀粉粒:很小,单粒,球形。(三)理化鉴定槐米:盐酸镁粉反应:取槐米甲醇提取液lml;置试管中,加盐酸23滴,再加少许镁粉,提取液显樱红色。为什么?四、实验报告(一)绘甘草粉末特征图。(二)绘黄柏横切面简图。(三)记述槐米理化鉴定结果。五、思考题(一)什么是晶鞘纤维?(二)黄柏粉末中有哪些鉴别特征?(三)黄芪、甘草在性状方面如何区别?(四)槐米中含有哪类化学成分,用何种方法鉴别?实验八 人参、三七、沉香、丁香等生药鉴别一、目的要求 (一) 掌握人参的四大鉴别特征,了解人参有关商品规格及常见伪品。(二) 掌握沉香、丁香、三七的性状显微特征。(三) 掌握人参、丁香的理化鉴别。二、实验用品、试剂、材料 试管、烧杯、滤纸、漏斗、酒精灯、三角架、石棉网、小勺、蒸发皿、95乙醇、冰醋酸、浓硫酸、氯仿、3NaOH的氯化钠饱和液、三氯化锑氯仿饱合溶液。人参腊叶标本及浸制标本,野山参、生晒参、红参、糖参、高丽参、西洋参、人参常见伪品;国产沉香、进口沉香、丁香、三七及其伪品、五加皮。人参、三七、沉香、丁香横切片。人参、丁香粉末。三、实验内容与方法(一)原植物鉴定 观察人参Panax ginseng CAMey腊叶标本,注意根茎特征。茎直立,单一。掌状复叶轮生茎顶,注意小叶形态特征,叶片数目。植令几年?何种花序?(二)性状鉴定: 1、人参Radix Ginseng:观察野山参的外部形态特征,搞清什么是“雁脖芦”枣核宁”,“横短体”、“铁线纹”、“珍珠点”。观察园参浸制标本,注意芦头、芦碗及主根、支根、须根各部特征。观察并比较生晒参、红参、糖参、高丽参性状特征,注意生晒参断面,形成层环纹棕黄色。皮部可见放射状裂隙及黄棕色点状树脂道。气特异,味甜,微苦。红参侧根多已除去,棕红色,半透明,偶有暗褐色斑块,质硬脆,断面平坦角质中心部较浅。糖参表面淡黄白色,质松泡,断面白,有菊花纹,味甜。注意伪品人参与正品的区别。2、三七Radix Notoginseng:根呈纺锤形或类圆锥形,表面灰黄或灰褐色,有蜡样光泽,有断续的纵皱纹及少数横长皮孔,顶端有茎痕,周围有瘤状突起,下部有支根断痕,质坚实。击碎后皮部与木部分离,皮部可见棕色细小树脂道斑点。气微味苦后微甜。注意伪品三七与正品的区别。3、沉香Lignum Aquilariae Resinatum药材呈不规则块状或小片状,表面有刀削痕及不规则凹凸,并有黑褐色及黄白色相间的斑纹。质坚硬折断面刺状,具特异香气,味苦。燃烧时可产生浓烟,伴有浓烈香气和黑色油状渗出物。进口沉香表面密布棕黑色树脂斑痕或细纵纹,能沉或半沉于水,气味较浓烈。 4、丁香Flos Caryop
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