分析化学论文-高效液相色谱法测定测定蔬果中的Vc含量

分析化学课程论文分析化学课程论文 系别系别 能源工程系 能源工程系 班级 班级 13 应化应化 姓名 苟昱姓名 苟昱 高效液相色谱法测定测定蔬果中的高效液相色谱法测定测定蔬果中的 Vc 含量含量 摘摘 要要 高效液相色谱法是一种高效 快速的现代分析技术 本文简要介绍了高效液相色谱法的特点和在测定蔬果中的 Vc 含量的应用 通过简单介绍有关高等分析化学在近几年食 品测定的应用 阐明高等分析化学在人类生活中的重要作 用 关关 键键 词词 高效液相色谱法蔬果 Vc 高效液相色谱法测定测定蔬果中的高效液相色谱法测定测定蔬果中的 Vc 含量含量 引引 言言 高效液相色谱是色谱法的一个重要分支 以液体为流动相 采用高压输液系统 将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶 剂 缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱 在柱内各成分被分离 后 进入检测器进行检测 从而实现对试样的分析 该方法已成为化 学 医学 工业 农学 商检和法检等学科领域中重要的分离分析技 术 1 原理原理 维生素 C Vitamin C Vc 又叫抗坏血酸 是一种水溶性维生素 Vc 在体内参与多种反应 如氧化还原过程 在生物氧化和还原作用 以及细胞呼吸中起重要作用 人体内缺乏 Vc 时容易导致坏血病 同 时 由于 Vc 是一种水溶性的强有力抗氧化剂并参与胶原蛋白的合成 它同时还具有防癌 预防动脉硬化 治疗贫血 抗氧化和提高人体免 疫力等功效 Vc 在蔬果中普遍存在 尤其是柑桔类水果中含量较高 樱桃 番石榴 辣椒 猕猴桃等水果中 Vc 含量在 50 300 mg 100 g 微波辅助萃取具有快速高效 操作简便 节省溶剂等优点 在天然产 物 环境 食品等领域中得到广泛应用 本实验采用微波辅助萃取法 快速萃取蔬果中的 Vc 采用高效液相色谱进行分析 以 Vc 标准系列 溶液的色谱峰面积对其浓度做校准 曲线 根据样品中 Vc 的峰面积 由校准曲线计算其浓度 2 试剂与材料试剂与材料 乙腈 色谱纯 冰乙酸 维生素 C 磷酸二氢钾等均为分析纯 青椒 番石榴或西红柿等蔬果样品 实验用水为超纯水 Vc 标准溶液 快速准确称取 0 025 g Vc 用 1 mol L 乙酸溶液溶解 定量转移至250 mL容量瓶中 用1 mol L乙酸溶液定容 得到100 mg L 标准溶液备用 现用现配 3 仪器和设备仪器和设备 高效液相色谱 HPLC 仪 分析天平 离心机 超声波水浴器 固相萃取装置 氮气吹干仪 涡旋混合器 50mL 具塞塑料离心管 研钵 4 样品处理样品处理 1 提取 液态奶 奶粉 酸奶 冰淇淋和奶糖等 称取 2g 精确至 0 01g 试样于 50mL 具塞塑料离心管中 加入 15mL 三氯乙酸溶液和 5mL 乙腈 超声提取 10min 再振荡提取 10min 后 以不低于 4000r min 离心 10min 上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸 过滤后 用三氯乙酸溶液定容至 25mL 移取 5mL 滤液 加入 5mL 水 混匀后做待净化液 奶酪 奶油和巧克力等 称取 2g 精确至 0 01g 试样于研钵中 加入适量海砂 试样质量的 4 倍 6 倍 研磨成干粉状 转移至 50mL 具塞塑料离心管中 用 15mL 三氯乙酸溶液分数次清洗研钵 清洗液转入离心管中 再往离心管中 加入 5mL 乙腈 超声提取 10min 再振荡提取 10min 后 以不低于 4000r min 离心 10min 上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后 用三氯乙酸溶液定容至 25mL 移取 5mL 滤液 加入 5mL 水混匀后做 待净化液 若样品中脂肪含量较高 可以用三氯乙酸溶液饱和的正己烷液 液分 配除脂后再用 SPE 柱净化 2 净化 将待净化液转移至固相萃取柱中 依次用 3mL 水和 3mL 甲醇洗涤 抽至近干后 用 6mL 氨化甲醇溶液洗脱 整个固相萃取过程流速不 超过 1mL min 洗脱液于 50 下用氮气吹干 残留物 相当于 0 4g 样品 用 1mL 流动相定容 涡旋混合 1min 过微孔滤膜后 供 HPLC 测定 5 高效液相色谱测定 1 标准曲线的绘制 用流动相将三聚氰胺标准储备液逐级稀释得到的浓度为 0 8 2 20 40 80 g mL 的标准工作液 浓度由低到高进样检测 以峰面积 浓 度作图 得到标准曲线回归方程 2 定量测定 待测样液中三聚氰胺的响应值应在标准曲线线性范围内 超过线性范 围则应稀释后再进样分析 6 空白实验 除不称取样品外 均按上述测定条件和步骤进行 本方法的定量限为 2mg kg 在添加浓度 2mg kg 10mg kg 浓度范围 内 回收率在 80 110 之间 相对标准偏差小于 10 在重复性 条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10 结结 语 语 以上的例子只是高等分析化学应用的一个小小缩影 我认为高等分析 化学对人类生活的作用会日益凸显 关于分析化学与人类生活关系的 研究也会一直伴随着这个学科的发展和人类的进步 参考文献参考文献 1 陶增宁等编 定量分析 上海 复旦大学出版社 1985 2 梁逸曾等编 分析化学手册 第十册 北京