不同药物对心绞痛的治疗效果(机能实验设计)

机能学实验设计大纲实验名称：不同药物对心绞痛的影响课题来源：自选设计班级：2008级临床本科4班设计人员：张军设计日期：2011年3月25日指导老师：梁楠一、实验设计的目的意义：实验设计的目的意义，国内外研究现状，存在的问题，解决问题的思路。目的与意义:掌握通过注射垂体后叶素使心脏冠状动脉发生痉挛性收缩，造成人工急性心肌供血不全，而复制出急性心肌缺血模型。熟悉不同治疗心绞痛药物的药理作用，心绞痛的发生机制。了解药物治疗心绞痛的作用原理。国内外研究现状：心绞痛(angina)是一种源于心肌缺血的综合征，其直接病因是大冠状动脉血管粥样硬化引起的血管狭窄或部分堵塞(导致动脉粥样硬化性或典型心绞痛)，所以降低心肌氧耗、增加冠脉血流量及恢复缺血心肌氧供需间的平衡，并同时防治动脉粥样硬化成为心绞痛的根本治疗原则。随着近年来循证医学的蓬勃兴起、大规模随机临床试验的迅速开展以及分子生物学的直线升温，许多新的干预手段、新的药理学方法、新的治疗方案和新型药物开始出现在心绞痛整体防治的前沿地带，如预防心脏病项目中的预防干预、活性因子阻滞病变、基因治疗手段的介入、新的NO供体与诱导剂的研究以及中医药干预治疗等。目前，传统药物已经广泛应用于心绞痛的治疗，主要有硝酸酯和亚硝酸酯类、钙拮抗剂（钙通道阻滞剂）、-受体阻断剂、抗凝血药、抗血小板凝聚剂、中药等1。就目前，许多新型药物的研发与试验尚在进行，主要表现在以下几个方面：不完全脂肪酸氧化抑制剂、ATP敏感性钾通道开放剂、新的NO供体与诱导剂、特异性心率减慢药、醛糖还原酶抑制剂、活性因子阻滞病变、基因治疗仍待完善2-3。结合本实验的目的，即探讨硝酸甘油、硝苯地平和普萘洛尔在心绞痛治疗中的效果有何不同。利用给心绞痛模型动物不同的药，来比较哪种种更具有临床使用价值。存在的问题：目前市场上抗心绞痛的药物已广泛使用，特别是硝酸甘油、硝苯地平和普萘洛尔。但其疗效不完全同，不知其疗效分别有何特点。解决问题的思路：注射垂体后叶素使心脏冠状动脉发生痉挛性收缩，造成人工急性心肌供血不全，而复制出急性心肌缺血模型。对心绞痛的动物分别注射硝酸甘油、硝苯地平、普萘洛尔作为实验组。再用心绞痛的动物注射生理盐水作为对照组。 参考文献：1陈旭东.心绞痛药物治疗进展.社区医学杂志,2006,4(12):46-47.2 Frishman WHRecent advance in cardiovascular pharmacologyJCurr Probl Cardiol，2000，25(4)：227.3 陈超,郭代红,刘皈阳,施振国.心绞痛药物治疗新看点.中国药物应用与监测,2007,6:55-58.二、实验设计方案（实验设计目标,拟解决的主要问题, 实验动物设计,实验专业设计，实验统计设计,实验方法设计，可行性分析,预期结果，实验设计工作时间安排）。（一）实验设计目标，拟解决的关键问题设计目标：掌握通过注射垂体后叶素使心脏冠状动脉发生痉挛性收缩，造成人工急性心肌供血不全，而复制出急性心肌缺血模型。熟悉不同治疗心绞痛药物的药理作用，心绞痛的发生机制。了解药物治疗心绞痛的作用原理。拟解决的关键问题：实验模型的制备。对试验性心绞痛的模型进行分组与实验结果分析。（二）实验设计1、实验动物设计我们选用家兔作为实验动物，有以下几点理由：1）、家兔易得到，容易饲养，在科研工作中被广泛利用。2）、家兔体形较大，观察临床症状更明显。2、实验专业设计选用家兔作为实验动物，制作成心绞痛的动物模型，分别给予硝酸甘油、硝苯地平、普萘洛尔和水，观察其对实验性心绞痛的治疗作用，观察兔子呼吸频率（/min），心率（/min），血压（mmhg），心绞痛缓解时间（min）等实验指标。3、实验统计设计实验统计设计中应始终贯彻随机、对照、重复三大原则。（1）随机：选正常成年健康体重相近的家兔80只，将80只家兔按体重由小到大编号后，从随机数字表中查取随机数字，依次抄录于家兔编号下。具体方法：动物编号为180号，随机数字从11行第一个数字开始接着抄写80个，按照能被4除的规律：不余到A组，余1到B1组，余2到B2组，余3到B3组，每组20只。（2）对照：本组实验做了对照组和实验照，在前面的专业设计里已经提及。（3）重复：本实验采用的是每实验小组有20只家兔，具有一定的重复性。（4）统计数据收集：本实验搜集计量资料。表1 实验数据收集记录表项目 呼吸频率（/min） 心率（/min） 心绞痛缓解时间（min） A B1 B2 B3 A B1 B2 B3 A B1 B2 B31234567891011121314151617181920表2四组动物各项值比较（s）组别呼吸频率（/min）心率（/min）心绞痛缓解时间（min）A （n20） B1（n20） B2（n20） B3（n20） （5）统计数据分析本实验采用计量资料来测定各种指标的数值，所有数据均采用平均数标准差（s）表示，四组间实验数据比较用完全随机单因素方差分析，组间两两比较用q检验，B1、B2、B3组模型心绞痛缓解时间用两样本比较t检验，均以0.05作为显著性检验水准。实验数据记录如表2。四组间实验数据比较用完全随机单因素方差分析，如心绞痛缓解时间均值的比较，其方法如下：（1）建立检验假设H0：=（心绞痛缓解时间平均值相等）。H1：、不等或不全相等，0.05。（2）计算统计量 利用统计学专业软件SPSS做One-way ANOVA 。( 3 ) 查F值表，确定P值，得出结论。B1、B2、B3组心绞痛缓解时间均值用两样本比较t检验，如B1与B2组之间心绞痛缓解时间均值的比较，其方法如下：（1）建立检验假设H0：=（两组心绞痛缓解时间总体均值相等）。H1：、不等或不全相等，0.05。（2）计算统计量 X=(X1+X2+X3+Xn)/n=(Xi-X)2/(n-1) t=（x-u）/Sx( 3 ) 查t值表，确定P值，得出结论。4、实验方法设计实验技术路线家兔（心绞痛模型） B组 实验组A组 对照组B2组 注入硝本地平注入生理盐水B3组注入生普萘洛尔B1组 注入硝酸甘油测定心绞痛缓解时间测定心绞痛缓解时间测定心绞痛缓解时间测定心绞痛缓解时间实验技术方法（1）随机抽样：随机80只正常的家兔，并分别编号，再随机平分成四组，并称重。（2）实验分组：分四组，分别为A组、B1B2B3（3）实验准备：AB组同时取兔，称重（婴儿秤）后固定于兔台上。（4）模型复制：用针状电极插入动物四肢皮下和左、右胸骨间近胸骨处，用BL-410生物信息采集系统观察心电图，记录导、左胸前、右胸前各导联心电图作为正常对照，然后由耳缘静脉注入垂体后叶素2U/kg体重，容积为0.20.3ml/kg体重，30s注射完毕。注射后，于1、2、5、10、15、25、30min时，分别记录上述导联心电图变化，特别注意观察心率、ST段、T波的变化，一般以注射后30s出现ST段升高或2min后T波低平作为心肌缺血的指标。（5）处理措施：滴注药品：当家兔出现心绞痛症状时，立即给A组注射生理盐水，给B1组注射硝酸甘油，给B2注射硝苯地平，给B3组注射普萘洛尔，四组注射量相等。（6）实验数据：心率：用BL-410生物信号采集处理系统记录各组家兔实验前后的心率。呼吸频率：用BL-410生物信号采集处理系统记录各组家兔实验前后的呼吸频率。心绞痛缓解时间：记录各组家兔在给药后，心绞痛症状得到缓解的时间。（三）可行性分析:1、家兔易得到，容易侍养，在科研工作中被广泛利用。2、心绞痛的动物模型容易获得，实验条件容易控制。3、手术器材和设备均为实验室常用，实验方法也相对熟练。（四）预期效果:1、实验组家兔的心绞痛症状先后快速得到缓解。2、对照组家兔心绞痛症状未得到缓解，或症状持续很长时间后才缓解。（五）实验设计工作时间安排:1、半天完成实验动物模型制备和取材。2、半天完成材料重量分析3、总共实验在1天完成。三、完成实验的条件1、仪器设备情况：BL-410生物信号采集处理系统