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文档简介

1.蛋白质的基本组成单位是什么?其结构特征是什么?2.什么是蛋白质的二级结构?它主要有哪几种?各有何种结构特征?3.举例说明蛋白质的四级结构。4.什么是蛋白质的变性?举例说明实际工作中应用和避免蛋白质变性的例子。变性与沉淀的关系如何?5.维持蛋白质溶液稳定的因素是什么?6.举例说明蛋白质的变构效应。7.简述蛋白质的主要理化性质。1.蛋白质的基本组成单位是氨基酸,均为L氨基酸,即在碳原子上连有一个氨基、一个羧基、一个氢原子和一个侧链。每个氨基酸的侧链各有不同,是其表现不同性质的结构特征。2.蛋白质二级结构是指多肽链原子的局部空间排布,不包括侧链的构象。它主要有螺旋、折叠、转角和无规卷曲四种。在螺旋结构中,多肽链主链围绕中心轴以右手螺旋方式旋转上升,每隔3.6个氨基酸残基上升一圈。氨基酸残基的侧链伸向螺旋外侧。每个氨基酸残基的亚氨基上的氢与第四个氨基酸残基羰基上的氧形成氢键,以维持螺旋稳定。在折叠结构中,多肽链的肽键平面折叠成锯齿状结构,侧链交错位于锯齿状结构的上下方。两条以上肽链或一条肽链内的若干肽段平行排列,通过链间羰基氧和亚氨基氢形成氢键,维持折叠结构稳定。在球状蛋白质分子中,肽链主链经常出现180回折,回折部分称为转角。转角通常有4个氨基酸残基组成,第二个残基常为脯氨酸。无规卷曲是指肽链中没有确定规律的结构。3.蛋白质四级结构是指蛋白质分子中具有完整三级结构的各亚基在空间排布的相对位置。例如血红蛋白,它是由1个亚基和一个亚基组成的一个单体,2个单体呈对角排列,形成特定的空间位置关系。四个亚基间共有8个非共价键,维系其四级结构的稳定性。4.在某些理化因素作用下,蛋白质的空间构象受到破坏,使其理化性质改变和生物活性丧失,这就是蛋白质变性。其实质是蛋白质的次级键断裂一级结构并不破坏,利用此性质可采用酒精、加热、紫外线照射等方法进行消毒、灭菌。由钨酸、三氯醋酸等使其变性。沉淀去除血清蛋白质用于化验摩检测。制备酶、疫苗、免疫血清等蛋白质制剂时,应选用不引起变性的沉淀剂。并在低温等适当条件下保存。蛋白质变性后疏水侧链暴露,肽链可相互缠绕而聚集,分子量变大,易从溶液中析出,这就是蛋白质沉淀。可见变性的蛋白质易于沉淀,有时蛋白质发生沉淀但并没有变性现象。5.维持蛋白质溶液稳定的因素有两个:水化膜:蛋白质颗粒表面大多为亲水基团,可吸引水分子,使颗粒表面形成一层水化膜,从而阻断蛋白质颗粒的相互聚集,防止溶液中蛋白质的沉淀析出。同种电荷:在pHpl的溶液中,蛋白质带有同种电荷。pHpl,蛋白质带负电荷。pHpl,蛋白质带正电荷。同种电荷相互排斥,阻止蛋白质颗粒相互聚集而发生沉淀。6.当配体与蛋白质亚基结合,引起亚基构象变化,从而改变蛋白质的生物活性,此种现象称为变构效应。变构效应也可发生于亚基之间,即当一个亚基构象的改变引起相邻的另一亚基的构象和功能的变化。例如一个氧分子与Hb分子中一个亚基结合,导致其构象变化,进一步影响第二个亚基构象变化,使之更易与氧分子结合,依次使四个亚基均发生构象改变而与氧分子结合,起到运输氧的作用。7.蛋白质由氨基酸组成又是生物大分子物质所以其既有氨基酸的性质又有其作为生物大分子的独特性质: (1)两性电离:蛋白质是两性电解质,具有两性解离的性质。在某一pH值溶液中其解离成正、负离子的趋势相等,此时溶液pH值即为等电点。 (2)蛋白质的胶体性质:蛋白质颗粒表面形成水化膜及带电荷,使蛋白质在溶液中稳定存在。 (3)蛋白质变性、沉淀和凝固:某蟪理化因素可以破坏蛋白质的空问构象。使其变性。变性后的蛋白质容易发生沉淀,将变性后的蛋白质加热,使其不再溶于强酸、强碱中,此即为蛋白质的凝固作用。 (4)蛋白质的吸收:蛋白质的分子中也有含共轭双键的酪氨酸和色氨酸,因此在280nm处有特征性吸收峰,据此性质可作为蛋白质定量测定。 (5)蛋白质的呈色反应:茚三酮反应:氨基酸+茚三酮水合物一还原茚三酮+还

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