传染病实验资料--肺炎支原体说明书.doc

赛润 ELISA classic肺炎支原体 IgG/IgM/IgA目录1.用途2.诊断意义3.赛润 ELISA classic-检测原理4.试剂盒组成5.检测所需物质，试剂盒未提供6.储存和稳定性7.赛润 ELISA classic的检验步骤 7.1注意事项 7.2样品准备和储存 7.3试剂盒反应试剂的准备 7.4检测程序概要 7.5检测过程8.检测结果评估8.1 4PL单点定量法 8.2检验有效性标准8.3计算赛润 ELISA classic肺炎支原体 IgG/IgM/IgA（定量） 8.4检测结果分析9. 性能特性 9.1重复性 9.2 敏感性和特异性10.警告 10.1警告和安全措施 10.2废料处理11.参考文献赛润 ELISA classic肺炎支原体IgG/IgM/IgA 酶联免疫法测定人体抗体（IgG/IgM/IgA）- 只限用于体外诊断-IgG试剂盒（定量） 编号 ESR127GIgM试剂盒（定量） 编号ESR127MIgA试剂盒（定量） 编号ESR127A检测评估标准: BEP 2000, BEP III, DSX, 手动操作1.用途 赛润 ELISA classic肺炎支原体IgG/IgM/IgA用于定性和/或定量检测人血清或血浆内肺炎支原体。抗肺炎支原体病毒IgG，IgM和IgA联合使用会有助于对肺炎支原体感染做出确切的诊断。IgA-Elisa的使用特别在诊断再感染时，对于IgG 和IgM诊断是一个重要的补充。2.诊断意义 支原体肺炎病毒的感染会导致许多有可能引起严重并发症的呼吸系统疾病。在这些疾病中首先值得一提的是初级非典型肺炎，咽炎以及呼吸道支气管炎。在美国支原体肺炎病毒的感染要占每年门诊肺炎的20%。肺炎支原体感染的临床症状具备多样性并且与其它原因引起的呼吸道感染（如呼吸道合孢病毒，流感-感染等）很难区别。肺炎支原体可使气管、支气管以及细支气管上皮细胞增生。感染后10-20天之后才出现一些非特异症状，如头疼、发烧、无痰干咳等。在感染期限间还可能会发展成间质性肺炎。大龄儿童和小龄成年人门诊肺炎的15-20%来自肺炎支原体病毒。在儿童中观察到病毒性感染（如麻疹）或细菌性感染（链球菌肺炎）后的肺炎支原体的重复感染。小龄儿童（5岁）中肺炎支原体感染经常无症状而消失或只导致轻度呼吸道感染。由于感染后没有足够的免疫力存在，会出现需要长时间康复期并不断加重的再感染（多次）。正因为这些不同症状的存在，诊断不能仅靠临床现象进行，而需要进一步地确诊（如病原体证明，血清学等），以便进行相应的治疗。肺炎支原体感染的病理学以支原体与呼吸道上皮细胞粘结，以在宿主细胞上滑动和宿主高细胞免疫活性为基础。（细菌凝集素和人宿主细胞的同源性很有可能可以预防凝集，降低细胞免疫活性进而组织上皮细增生）。肺炎支原体感染的免疫反应可以描述如下：IgM-抗体是在发生特殊症状后约7天之后可以被检测到。在首发症状后的10-30天后可以检测到最大的IgM-抗体浓度。12-26周后IgM-抗体的滴定度将降低到无法检测的程度。IgM-抗体最频繁地出现于初期感染阶段，因此，在较年轻患者中能测到高浓度的IgM-抗体，而在大龄患者（很有可能再感染了的）中几乎测不出或测到极微乎其微的IgM-抗体。正由于其常有的再感染，IgM-抗体会被削弱并降低到检测不到的水平。在刚刚被感染的情况下，IgA-检测的结果清楚、敏感。大量的抗体形成于出现感染症状的3周内，从出现感染症状第5周起IgA和IgM抗体浓度下降。IgA-抗体浓度下降的速度比IgM-抗体的浓度更快。肺炎支原体感染IgG-抗体的出现要比IgA-抗体和IgM-抗体晚。它在发病第5周后才达到最大浓度。因为IgG-抗体反应是肺炎支原体感染最可靠，也是最晚期的反应，所以仅有IgG检测通常被视作确诊的标志。急性感染很少会有无IgA-抗体和IgM-抗体产生的情况。在这种情况下，诊断应更依赖于IgG-抗体的检测。CFT试验是应用最为广泛的诊断肺炎支原体-感染的血清学方法。它最致命的缺点就是由于全细胞抗原制备中LPS-分子交叉反应导致的低异性。显而易见地，具有较高特异性的结果来源于使用特制抗原的Elisa方法（如P1 肺炎支原体的粘结）。3.赛润ELISA classic-检验原理用抗原包被微量板孔，制成固相载体。加患者血清到板孔中，其所含的抗体特异性地与固相载体中存在的抗原结合，形成免疫复合物。除去多余物质后，加入碱性磷酸酶标记的IgG、IgA和IgM抗体，使之与上述免疫复合物反应。洗板，除去多余的结合物，加入底物（对硝基苯磷酸盐）。该反应产生有颜色产物，颜色强度与特异性抗体含量成正比。4.试剂盒的组成试验成分IgG试剂盒 IgM试剂盒 IgA试剂盒 数量 / 剂量微孔条（此微孔条可掰开单独使用，每条有8孔，共96孔，已经包被了抗原）1个微孔条框架包被的抗原为灭活抗原12 12 12标准血清（立即可用）人血清溶于含蛋白的磷酸盐缓冲液；抗HIV抗体、抗乙肝病毒（HBV）表面抗原和抗丙肝病毒（HCV）抗体均为阴性；防腐剂：0.1% 叠氮化钠染色剂：紫红色O22毫升 22毫升 22毫升阴性质控血清（立即可用）人血清溶于含蛋白的磷酸盐缓冲液；抗HIV抗体、抗乙肝病毒（HBV）表面抗原和抗丙肝病毒（HCV）抗体均为阴性；防腐剂：0.1%叠氮化钠染色剂：里沙明绿 V12毫升 12毫升 12毫升酶标记的抗人IgG, IgA, IgM （立即可用）羊抗人IgG, IgA, IgM（多克隆），碱性磷酸脂酶，以蛋白稳化溶液加以稳化。防腐剂: 0.02%甲基异噻唑啉酮 0.02%溴化硝基二垩烷13毫升 13毫升 13毫升浓缩洗液（可稀释至1000毫升）氯化钠，含吐温20和30mM Tris 防腐剂： 0.1%叠氮化钠133.3毫升 133.3毫升 133.3毫升稀释缓冲液磷酸盐缓冲液，内含蛋白和吐温20防腐剂： 0.1%叠氮化钠0.01克/升的溴酚蓝钠盐250毫升 250毫升 250毫升终止液1.2N 氢氧化钠15毫升 15毫升 15毫升底物（立即可用）邻硝基苯磷酸盐，不含其它溶剂的缓冲液防腐剂：浓度小于0.1%的叠氮化钠（瓶子未盖好底物可能会轻微变黄，但不会影响其质量）13毫升 13毫升 13毫升带有标准曲线和评估表的质量控制认证文件（抗体以IU/毫升或U/毫升计量）1 1 15.其它检测所需物质- 普通实验室所需的仪器装置- IgM检测：赛润类风湿因子Rf吸附剂（产品编号Z100/5ml和Z200/20ml）- 分光光度计，波长405纳米，建议参考波长范围620纳米- 690纳米（例如 650纳米）- 37温箱- 湿盒- 蒸馏水。6.储存及稳定性试剂储存稳定性微孔条（抗原）开封后放在2-8装有干燥剂的密封铝箔袋中。有效期内质控血清 / 标准血清开封后保存于2-8。有效期内；18个月酶标记抗体立即可用的溶液于2-8储存。避免污染（使用无菌针头）。有效期内24个月稀释缓冲液 开启后于2-8储存。有絮状时丢掉未开封18个月有效期内36个月洗涤液浓缩液开封后保存于2-8。工作液在2-8。工作液在室温下。盛过工作液的瓶子应按常规方法清洗，并丢弃混浊溶液。有效期内2星期1星期底物2-8储存，避光。避免污染（使用无菌针头）。当溶液变为黄色时应予以丢弃（水作空白，吸光度大于0.2时）。有效期内24个月终止液开封后保存于室温下。有效期内7.赛润 ELISA classic的检验步骤7.1注意事项只有全部使用赛润 ELISA classic试剂才能保证检测效果，因为所有试剂都是有关联的，不能混用其他制造商的产品。尤其是标准血清，对照血清以及酶标记物，必须使用试剂盒配备的，不要使用其它批号产品。稀释缓冲液，洗液，终止液和底物溶液可用于所有赛润 ELISA classic试剂盒。ELISA classic试剂盒内所有试剂均必须正确地存放。应在未开封的情况下，保存于2-8，并在有效期（见标签说明）内使用。详细的稳定性和储存资料在“6. 储存及稳定性”内将加以详述。每一种试剂都是经过校准以保证最佳的检测结果。这些试剂如果未经规定被稀释或改动都会导致检测的敏感度的降低。在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染，试剂避免受到微生物的污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。应按照规定刻度截断微孔条。当装微孔条的铝袋开封后，应及时用夹子夹紧，否则不可使用。开始试验前，将所有试剂置于室温。从试剂管中吸取试剂的时候，应注意使用无菌技术以防污染。为避免假阳性结果，吸加酶结合物时，吸嘴应确保不接触或喷洒于小孔的外面，注意不要盖错瓶盖或管盖。试验结果的可重复性依赖于充分混合试剂。使用前振荡装有对照血清的小管和所有稀释过的溶液（例如使用混合器）。小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本 / 对照血清，酶结合物或底物时，第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预孵育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。只有严格遵守赛润ELISA classic试剂的试验说明才会得到最佳的检测结果。如果实验中未严格遵守质量控制认证文件上的有效性特异准则，则试验结果无效。洗涤不充分将影响试验结果：应该小心进行洗涤。洗涤步骤应遵守相关洗涤器（平底孔，孔直径7毫米，深10.9毫米）指导手册进行。重要的是所有的孔内均应加入相同体积的洗涤缓冲液。洗涤结束时，应将微孔板倒扣于纸巾上并轻轻敲打，以确保所有孔内均无洗涤缓冲液。避免产生泡沫！如果使用自动洗板机，注意正确操作。7.2样本准备储存虽然，在检验中不会产生副影响，但为避免干扰结果，应保留使用高血脂的、溶血的或污染的血清。样品不应加热灭活。7.2.1样品稀释开始试验前，患者的待测样品必须以稀释缓冲液稀释如下（V1+V2）：V1+V2=1+100 加 10微升 患者待测样品于 1000微升 稀释缓冲液稀释后及加入微孔板前，样品必须充分混合。类风湿因子干扰 类风湿因子抗体是IgM的自体抗体，可与IgM免疫复合物结合。非特异性IgM抗体（风湿因子）的存在将导致IgM检测的假阳性结果。另外，也存在弱结合的病原体特异性IgM抗体被强结合的IgG抗体取代的可能性。在这种情况下，IgM的检测将得到假阴性的结果。因此，在进行IgM检测前应用类风湿因子吸附剂对血清作预处理。（赛润类风湿因子吸附剂，产品编号Z100 (5ml/25样品)及Z200（20ml/100样品）。7.2.2样品储存密封的患者样品可在冰箱中2-8保存7天。 -20可保存更久。避免样品反复冻融。已稀释的样品可在2-8 保存一星期。7.3 试剂盒反应试剂的准备7.3.1 微孔条微孔条置于一框架内，并与干燥剂一同封于铝袋之中。应将不需要的微孔条取下并重新放入铝袋。将袋口折叠2-3次，并以夹子夹紧，确保铝袋的密封性。7.3.2 对照血清 /标准血清对照和标准血清立即可用，不必进一步稀释。对于每次试验和每批检测体系，无论使用的微量板数目的多少，均应包括阴性阳性对照孔。界定对照应作双份。如果是定量试验，标准血清也做双份。不要用RF吸附剂处理对照血清！7.3.3 抗人 IgG, IgA 或IgM抗体，用 AP标记（即用）禁止将不同试剂盒的酶标抗体混合使用。同一试剂盒才能达到最佳检测效果。7.3.4 洗液以1：30稀释浓缩洗涤缓冲液（V1）至体积V2。例如：浓缩缓冲液（V1） 终体积（V2）33.3毫升1000毫升1毫升30毫升7.3.5 样品的稀释缓冲液（即用）7.3.6 底物（即用）试验时戴手套以避免污染。必须以无菌针头吸取底物溶液。7.3.7 终止液（即用）7.4 检测程序概要肺炎支原体IgG / IgM/ IgA定量进行IgM检测时先吸除RF 因子，样品稀释液（患者样本）1+100将稀释的样本，和立即可用的对照血清 / 标准血清，加到微量孔内（100微升）孵育60分钟/37湿盒中 洗涤加入已稀释的酶标记抗体溶液（100微升）再孵育30分钟/37湿盒中洗涤加入底物溶液（100微升）再孵育30分钟/37湿盒中 加入终止液（100微升） 在405 纳米处读消光系数7.5检测过程 7.5.1 将检测所需数目的微孔条放到微孔板框上并准备好一张标签。7.5.2 在微量孔内分别加入100微升的已稀释样本对照血清。留一个孔为底物空白使用，例如：定量的IgG / IgM / IgA微量孔孔A1孔B1孔C1孔D1孔E1底物空白阴性对照标准血清标准血清标本 17.5.3 将样品于湿盒内37（1）孵育60分钟（5分钟）。7.5.4 孵育后以洗液缓冲液洗涤板孔（使用自动洗板机或手工洗板）：- 吸去或甩去洗液- 每孔内加入300微升洗液- 吸去或甩去洗液- 重复洗涤过程3次（共4次！）- 将微孔板翻转过来在纸巾上拍打，使微孔中不再含有液体7.5.5 加入酶标记抗体。于相应孔内（底物空白除外）加入100微升 IgG / IgM / IgA酶标记抗体7.5.6 湿盒内37（1）孵育30分钟（1分钟）*。7.5.7 孵育后，以洗液清洗板孔（洗涤见上）7.5.8 加入底物于每孔内加入100微升底物溶液（包括底物空白孔）7.5.9 湿盒内37（1）孵育30分钟（1分钟）*。7.5.10 终止反应每孔内加入100微升终止液，轻微振荡微孔板以混合溶液。7.5.11 读取消光度以底物空白为空白对照液， 60分钟内读取405纳米的OD值，建议参考波长范围为620纳米-690纳米（例如650纳米）。* 请您注意：在特殊的工作环境下有必要对孵育时间进行调整。8. 检测结果评估赛润 ELISA classic肺炎支原体 IgG/IgM/IgA（定量）8.1 用4PL方法，单点定量通过应用一非线性方程，消光信号数值的最佳分配得以保证，该方程可在不对OD值作任何改动的情况下调整S型曲线。赛润 ELISA classic抗体滴度的确定是通过逻辑对数模型（4PL, 4参数）计算得出的，此模型可精确适用于相关曲线。它是基于以下公式：参数A,B,C,D分别代表曲线的准确形状：1. 下端渐近线 参数A 2. 曲线斜率 参数B 3. 转折点 参数C 4. 上端渐近线 参数D 标准曲线由在德国维尔茨堡的德国维润赛润研发有限公司试验多次研制所得。使用者无需花费大量的时间和使用昂贵的仪器来制作标准曲线。每一个试剂盒内均带有一特异标准曲线和一特异求值表图以衡量抗体活度。如有需要也可取得相关的评估软件。为了校正正常试验偏差和建立试验对照，每轮试验均需使用标准血清。对于此种对照血清，有效范围参考值是由厂商的质量控制决定的。在此范围内，可保证抗体滴的正确计量。因为标准血清不必是一阳性对照，所以在某些ELISA试验中标准血清数值可能近于0或负值。8.2有效性标准-底物空白的OD值必须 0.2-阴性对照必须为负值-赛润 ELISA classic定量试验：标准血清的平均OD值必须在有效范围内，此范围在试剂盒的特异性质量控制认证书上给定（减去底物空白之后！）-赛润 ELISA classic定量试验：阳性对照的平均OD值必须在有效范围内，此范围在试剂盒的特异性质量控制认证书上给定（减去底物空白之后！）如果未遵守以上标准，试验无效且必须重做。8.3赛润 ELISA classic肺炎支原体IgG / IgM/IgA的定量计算8.3.1非自动评估每个试剂盒内均备有一个标准曲线和一个评估表，因而每一个OD值就可得到一个抗体活性值。标准血清的参考值和有效范围会在求值表格（质量控制认证）中给定。所有的OD值在求值前必须先减去空白A1。方法1：定性评估为确定临界值范围，请将已测得的标准OD平均值与质量控制证书上给出的数据相乘（见专用公式），例如：OD = 0.502 x MW(STD) 临界值上限OD = 0.352 x MW(STD) 临界值下限如果得到的标准血清的平均消光度值是0.64, 那么临界值的范围即为 0.225-0.321。 方法2：用评估表格来确定抗体活性级别1. 计算标准血清两个OD值的平均值，并检查其是否在给定的有效范围内。2. 然后，将所得结果转入“标准血清OD范围”栏，在此进行求值。3. 已测得的患者样品值通过读取“IU / ml或U / ml”来求得相应的抗体活性。例如： 标准血清OD范围0.57-0.610.62-0.65IU / ml 或 U / ml其它 0.060.070.07-0.120.13-0.22 30 U / ml 不确定性结果： 20-30 U / ml 阴性结果： 15 U / ml 不确定性结果： 10-15 U / ml 阴性结果： 17 U / ml 不确定性结果： 13-17 U / ml 阴性结果： 14 U / ml 不确定性结果： 10-14 U / ml 阴性结果： 10 U / ml 如样品所得结果为不确定，应于1-2星期后再次复查。8.3.2 通过SERION easy base 4PL软件 / SERION自动评估软件进行自动评估。输入四个参数和标准血清参考值之后，联机软件就会计算出抗体活性。如果标准血清的消光值超出有效范围，SERION easy base 4PL软件就会显示如下信息： “标准已超出允许范围”和 / 或“标准差异大于20%”。SERION 评估软件只用英语显示：Standard values out of ranges in following groups: Group 1-24. Standard value differ more than 20% in following groups: Group 1-24.” (“以下组样品标准值超出范围：组1-24。以下组样品标准值差异大于20%：组1-24。”) 在这种情况下，此轮试验无效，需重做。只有更换批号时，参数和参数值才需要改变（评估表中标有参数与参考值）。组别特异性数据的正确输入与否可以以标准血清的 IU / ml 或 U / ml 值为基础进行检验。计算出的平均单位值需与组别特异性认证书所示的单位值相对应。可自动校正测定值。使用标准版本打印机会显示如下内容：样本编号OD值IU / ml或 U / ml结果解释8.4检测结果分析对SERION ELISA classic肺炎支原体IgG, IgM和IgA的临界值进行评估，其中包括对三个参量或仅一个或多个参量均显示为阳性的急性感染的评估。对IgG临界值范围进行设定是为了在15%未经筛选的献血者中检测到阳性结果或临界结果。这会使临床IgG检测的上下限值更加清晰，从而取代了分析得出的上下限值。通过临界值的确定可以将急性支原体感染情况同普通感染区分开。IgA和IgM检测结果是诊断急性肺炎支原体感染的重要参量。年龄较大患者经常会复发感染，所以在对这一群体检测时仅有IgM检测结果是不充分的，甚至在很多时候是没有作用的，所以IgA测试结果对于此类患者的检测就具有更为重要的意义。IgM可以为初期感染的诊断提供可靠的依据。因为IgG抗体在支原体感染的过程中才会产生，因此IgG检测结果仅能用做确诊支原体感染。因此，阳性IgG检测结果既可以表明血清检出率，也可以体现出不含IgA和IgM抗体的初期感染，但此种情况很少。支原体IgA支原体IgM支原体IgG检测分析-阴性血清，当临床症状怀疑为支原体感染时应在14天内持续提取血清进行检测+-/+怀疑为初期感染；特别是年轻患者通常检测为IgA及IgM均为阳性。+-/+怀疑为初期感染（年长患者复发感染时通常检测不到IgM）-+继往感染；或在少数情况下为初期感染，检测不到IgA和IgM抗体（注意IgG检测浓度的增长）9.性能特征：9.1重复性重复性是通过在同一轮试验中检测20次不同反应的血清来判断。组间重复性是通过分别在5天进行的10次独立的血清检测分析来判断。赛润 ELISA classic肺炎支原体IgG：平均消光值（OD）检测内分析（CV%）平均消光值（OD）检测间分析（CV%）样品不确定结果阳性强阳性0.8351.2691.5624.904.704.200.9061.4701.79011.606.905.90赛润 ELISA classic肺炎支原体 IgM：平均消光值（OD）检测内分析（CV%）平均消光值（OD）检测间分析（CV%）样品阴性阳性强阳性0.3751.5811.7027.707.207.900.4341.8231.94312.805.508.30赛润 ELISA classic肺炎支原体 IgA：平均消光值（OD）检测内分析（CV%）平均消光值（OD）检测间分析（CV%）样品不确定结果阳性结果0.5251.1557.108.600.5781.2956.407.109.2敏感性及特异性在研究中使用赛润ELISA classic肺炎支原体（IgG, IgA, IgM）和另一种参照检测试剂（ELISA A）分别对两组血清集合进行了检测。必须指出的是，对于肺炎支原体抗体的检测尚未存在普遍的黄金标准。除了诊断参数，如敏感性、特殊性及关联性之外还要在对两种测试系统的比较中考虑到临床背景因素。第一组血清集包括十一个来自不同厂家的血清样本，在临床方面已被预先定性。第二组血清集包含的19个血清样本取自感染肺炎支原体或具有相似呼吸系统症状（如非典型肺炎，呼吸道感染）的病人。此项比较研究显示结果如下：赛润ELISA classic肺炎支原体IgG第一组血清检验结果：血清号赛润ELISAclassic IgGELISA A IgG预诊断1阴性阴性无感染2阴性阴性无感染3阴性阴性无感染4阴性不确定结果无感染5阳性阳性六个月前感染6阳性阳性新近感染7阳性阳性新近感染8阳性阳性新近感染9阳性阳性新近感染10阳性阳性三个月前感染11阳性阳性急性感染第二组血清检验结果：SERION ELISAclassic IgGELISA AIgG阳性99不确定结果30阴性710如果将ELISA A IgG做参考试验并将其制为100%的话，赛润ELISA classic肺炎支原体IgG的测试将得到以下关键数据：ELISA AIgG赛润 ELISA IgG阳性不确定结果阴性阳性1501不确定结果102阴性029关联性*80%特异性：90%敏感性：100%*一致阳性，阴性或不确定结果赛润ELISA classic肺炎支原体IgA:第一组血清检验结果：血清号赛润ELISAclassic IgAELISA A IgA预诊断1阴性阴性无感染2不确定结果阴性无感染3阴性阴性无感染4阴性阴性无感染5不确定结果阳性六个月前感染6阳性阳性新近感染7阳性阳性新近感染8阳性阳性新近感染9阳性阴性新近感染10阳性阴性三个月前感染11阳性阳性急性感染第二组血清检验结果：SERION ELISAclassic IgAELISA AIgA阳性107不确定结果21阴性711如果将ELISA A IgG做为参考试验并将其制为100%的话，赛润ELISA classic肺炎支原体IgA的测试将得到以下关键数据：ELISA AIgA赛润 ELISA IgA阳性不确定结果阴性阳性1015不确定结果004阴性109关联性*59.4%特异性:64.3%敏感性:90.9%*一致阳性，阴性或不确定结果与ELISA A IgA相比，赛润ELISA classic IgA 显示出很小的关联性及很低的特异性。如果考虑到临床数据，那么同ELISA A相比赛润ELISA classic显示出更强的敏感性：因此ELISA A 仅作为参考测试。赛润ELISA classic肺炎支原体IgM:第一组血清检验结果:血清号赛润ELISAclassic IgMELISA AIgM预诊断1阴性阴性无感染2阴性阴性无感染3阴性阴性无感染4阴性阴性无感染5不确定结果阴性六个月前感染6阳性阴性新近感染7阳性临界值新近感染8阳性阴性新近感染9阳性阴性新近感染10不确定结果阴性三个月前感染11阳性阳性急性感染第二组血清检验结果：SERION ELISAclassic IgMELISA AIgM阳性1211不确定结果00阴性78如果将ELISA A IgM做为参考试验并将其制为100%的话，赛润ELISA classic肺炎支原体IgA的测试将得到以下关键数据：ELISA AIgM赛润 ELISA IgM阳性不确定结果阴性阳性1214不确定结果002阴性0011关联性*76.6%特异性：75%灵敏度：100%*完全相同的阳性、临界或阴性结果与ELISA A IgM相比，赛润ELISA classic IgM 显示出很小的关联性及很低的特异性。如果考虑到临床数据，那么同ELISA A相比赛润ELISA classic显示出更强的敏感性：因此ELISA A 仅作为参考测试。10.警告10.1警告和安全措施赛润 ELISA classic试剂盒是针对熟悉实验室操作人员所设计使用的。所有试剂盒试剂及人类标本必须采用已有的良好实验技术，小心处理：- 此试剂盒内含人血成分。尽管所有的对照及定点对照都已经过试验验证并且发现对于乙型肝炎表面抗原，丙型肝炎抗体，HIV抗体均为阴性；但仍认为它们具有潜在的感染性。- 移液过程禁止用口。- 在处理试剂和标本的地方禁止吸烟，饮食。- 使用试剂盒和标本时，必须戴一次性手套，穿试验服，戴安全镜。使用后请彻底洗手清洁。- 患者样本及其他潜在感染材料试验后应予以消毒。- 终止液：具有腐蚀性（C）；因此在操作时应穿戴防护镜，手套和试验服。10.2废料处理请注意相关要求！11. 参考文献1. Brandt W.A. 1993. Clinical overview of typical mycoplasma pneumoniae infections. Clin. infect. Dis. 17:32-37.2. Marston, B. J., Plouffe J. F., File T. M., Hackman B. A., Salstrom S. J., Lipman H. P., Kolczak M. S., Breiman R. F.1997. Incidence of community acquired pneumonia requiring hospitalization. Arch. Intern. Med. 157: 1709-1718.3. Jacobs E. 1993. Serological diagnosis of Mycoplasma pneumoniae infections: a critical review of current procedures. Clin. Infect. Dis. 17: 79-82.4. Bredt W., Lam W. Berger J. 1975. Evaluation of a microscopy method for rapid detection and identification of Mycoplasma pneumoniae. J Clin. Microbiol.: 2: 541-545.5. Kok T. W., Varkanis G., Marmion B. P., Martin J., Esterman A. 1988. Laboratory diagnosis of Mycoplasma pneumoniae infection. Direct detection of antigen in respiratory exudates by enzyme immunoassay. Epidemiol. Infect. 101: 669-684.6. Williamson J., Marmion B. P., Worswick D. A., Kok T. W., Tannock G., Herd R., Harris J. 1992. 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