GC_MS定量检测皂角种子不同部位脂肪酸组成

收稿日期 作者简介 田冬梅 主管药师 研究方向 食品 药品 医疗器械等微生物检验 通讯作者 娄志红 主任药师 定量检测皂角种子不同部位脂肪酸组成 田冬梅 于畅游 娄志红 黑龙江省食品药品检验检测所 哈尔滨 摘 要 采用 法对皂角种子不同组织部位脂肪酸进行分析 通过质谱数据库检索和标准品对照鉴定出 种脂肪酸 分别为 肉蔻酸 十五烷酸 棕榈酸 棕榈油酸 硬脂酸 反油酸 油酸 亚油酸 花生酸 二十碳一烯酸 亚 油酸 二十一烷酸 二十碳二烯酸 二十二烷酸 二十三烷酸 二十四烷酸 其中子叶中含有 种脂肪酸 种皮中含 有 种脂肪酸 有 种脂肪酸同时存在子叶和种皮中 分别为 棕榈酸 棕榈油酸 硬脂酸 油酸 亚油酸 亚油酸 这些脂肪酸主要显著积累在子叶中 是种皮的 倍 此外 将皂角种子与其他油料种子进行比较分析 最 终发现棕榈酸 硬脂酸和亚油酸均高于大豆 芝麻和葵花籽 说明皂角种子同样具有重要的营养价值 实验为皂角 种子的综合开发利用提供科学依据 关键词 气相质谱联用 皂角 种皮和子叶 脂肪酸 中图分类号 文献标识码 皂角 豆科皂荚属落 叶乔木 又名皂荚树 是我国特有的树种之一 多生 于平原 山谷及丘陵地区 原产中国长江流域 主产 山东 河南 江苏 湖北 广西 安徽等地 生长旺 盛 雌雄异株 雌树结荚能力强 皂角耐热 耐寒抗 污染 可用于城乡景观林 道路绿化 其木材坚实 耐 腐耐磨 黄褐色或杂有红色条纹 可用于制作工艺 品 家具 皂荚刺 皂针 内含黄酮甙 酚类 氨基酸 等 具有很高的经济价值 皂角的荚果 刺 枝等 均可入药 具有抗菌抗炎 免疫调节与抗过敏作用 第 期 总第 期 中 国 林 副 特 产 年 月 抗肿瘤作用 抗凝血作用 抗肝纤维化作用 降低血 脂还可治疗各种病因引起的神经性头痛 三叉神经 痛等 目前 关于皂角的研究多集中在皂角刺 而皂角 种子中有丰富的营养成分 含有大量的脂肪酸 其中 人体必需的亚油酸含量达到 含油量超过 大豆 是一种非常值得开发利用的资源 对不同 组分的脂肪酸含量及组成的研究 是评估一种物质 营养价值与可利用价值的重要组成部分 对开发具 有特殊营养功能产品有着重要的指导意义与理论价 值 因而 系统的对皂角种子各部位的脂肪酸组成 进行分析尤为重要 脂肪酸的测定法有很多种 括 近红外反射光谱分析 法 气相色 谱法 以及高效液相色谱法 等等 而 法具有分离率高 定量分析方便 灵敏度 高 定 性 能力 强等 优 点 作 为本 研 究 所使用 的方 法 本研究以皂角种子的种皮和子叶为样品 应用 方法 对皂角种子中的脂肪酸组分进行了定 性定量分析 并绘制标准曲线 为后续对皂角脂肪酸 的研究提供了理论基础 材料与方法 材料与试剂 材料 皂角种子 由东北林业大学提供 试剂 石 油醚 甲醇 氢氧化钾 正己烷 仪器与设备 仪器 分析天平 氮吹仪 涡旋仪 离心机 气相 色谱 质谱联用仪 日本岛津公司 方法 供 试 样 品 溶 液 的 制 备 取 粉 末 放 入 玻璃离心管中 加入 的正己烷提取 并 用涡 旋 仪 混 合 再 浸 泡 离 心 提取 次 合并上层清液转移到一个新的已 经称量好重量的玻璃试管中 然后用氮气吹干上层 清液 将得到的淡黄色油状物储存在 的冰箱 中 待用 甲酯化反应 取氮气吹干后的油 加 入到玻璃离心管中 然后加入 的乙醚用涡旋仪 混 匀 继 续 向 试 管 中 加 入 正 己 烷 和 甲 醇溶 液 将 混 合 物 再 次 涡 旋 涡旋后静止 加入 去离子水到混合 物中 涡旋混合后 静止直到液体分离为两层 将包 含甲酯的上层液体用移液器转移到另一个小瓶中 待测 标准品溶液的制备 准确称取肉蔻酸 十五 烷酸 棕榈酸 棕榈油酸 硬脂酸 反油酸 亚油酸 花 生酸 二十碳一烯酸 亚油酸 二十一烷酸 二十碳 二烯酸 二十二烷酸 二十二烷酸 二十三烷酸 二十 四烷酸 种脂肪酸甲酯标准样品 放入色谱 专用样品瓶中 加入 正己烷至标准样品完 全溶解 脂肪酸标准曲线的制作 从 个标准品样品瓶中分别取出 溶液 放入各自另一样品瓶中 加入等体积的正己烷 混合 均匀 制作不同浓度梯度的标准溶液 对稀释好的 标准溶液进行气相质谱分析 以标准溶液浓度为横 坐标 色谱峰面积作为纵坐标绘制不同浓度梯度的 标准曲线 方法 脂肪酸甲酯通过 气相色 谱 质谱仪分离和确定 其气相色谱 质谱仪具有 分流 不分流进样注射器 并配备氢火焰离子化检测 器 色谱 条 件 色 谱 柱 采 用 毛 细 管 柱 柱 温 初 始 温 度 保留时间 以 升温至 保留 进样口和检测器的温度分别维持在 和 载气 氦气 进样量 标准 品分流比 样品无分流比 整个分析过程为 电离能量为 离子源温度为 扫描范围为 将测得的样品色谱图中 各峰的保留时间与 种脂肪酸甲酯混标的各峰保留 时间作比较 确定样品色谱图中各峰的性质 采用面 积归一法确定各脂肪酸占总脂肪酸含量的百分比 数据统计分析 相同提取条件下 每个样品重复 次 实验结果 取平均值 采用 对其做方差分析 对数据进行归一处理 用于绘制数 据图像 结果与讨论 脂肪酸定性分析与标准曲线的制作 依照上述 中的色谱条件 经过 分析得到标准品 皂角子叶和皂角种皮的峰谱 即图 通过标准品与样品的色谱峰保留时间 的对比 以及质谱数据库的检索 对不同脂肪酸组分 进行定性分析 经分析 可以确定皂角种子中共有 年 中 国 林 副 特 产第 期 图 标准品及皂角种子不同部位中脂肪酸组分峰谱 和 分别为标准品 皂角子叶和皂角种皮的峰谱 肉 蔻酸 十五烷酸 棕榈酸 棕榈油酸 硬脂酸 反油 酸 油酸 亚油酸 花生酸 二十碳一烯酸 亚麻 酸 二十一烷酸 二十碳二烯酸 二十二烷酸 二 十三碳酸 二十四烷酸 种脂肪酸 种饱和脂肪酸为肉蔻酸 十五烷酸 棕榈酸 硬脂酸 花生酸 二十一烷酸 二十二烷酸 二十三碳酸 二十四烷酸 种不饱和脂肪酸为棕榈 油酸 反油酸 油酸 亚油酸 二十碳一烯酸 亚麻 酸 二十碳二烯酸 并绘制其标准曲线 见表 此 外 对应的相关系数和线性范围分别为肉蔻酸 和 十五烷酸 和 棕榈酸 和 硬脂酸 和 花生酸 和 二十一烷酸 和 二十二烷酸 和 二十三碳酸 和 二十四烷酸 和 棕榈油酸 和 反油酸 和 油酸 和 亚 油 酸 和 二十碳一烯酸 和 亚 麻 酸 和 和二十碳二烯酸 和 表 种脂肪酸成分的 鉴定结果 编号脂肪酸种类保留时间 特征离子标准曲线 肉蔻酸 十五烷酸 棕榈酸 棕榈油酸 硬脂酸 反油酸 油酸 亚油酸 花生酸 二十碳一烯酸 亚麻酸 二十一烷酸 二十碳二烯酸 二十二烷酸 二十三碳酸 二十四烷酸 皂角子叶中脂肪酸组分分析 皂角子叶中含有 中脂肪酸 分别为 亚油酸 油酸 棕榈酸 硬脂酸 亚油酸 花生酸 二十碳一 烯酸 二十二烷酸 二十四烷酸 肉蔻酸 棕榈油酸 十五烷酸 二十碳二烯酸 二十一烷酸 二十三烷酸 其中 二十三碳酸 二十一烷酸 二十碳二烯酸 十五 烷酸 肉蔻酸 二十四烷酸 二十二烷酸 二十碳一烯 酸 花生酸为皂角子叶中特有的脂肪酸 由图 可 年 田冬梅等 定量检测皂角种子不同部位脂肪酸组成 第 期 知 亚油酸在子叶中的含量可达 远远 高于其他脂肪酸 花生酸 二十碳一烯酸 二十二烷 酸 种脂肪酸含量相近 在子叶特有的脂肪酸中含 量较高 图 皂角子叶中脂肪酸种类及含量 黑色组分代表种 皮和子叶中共同存在的脂肪酸 白色组分代表子叶中特有脂 肪酸 皂角种皮中脂肪酸组分分析 图 皂角种皮中脂肪酸种类及含量 黑色组分代表种 皮和子叶中共同存在的脂肪酸 白色组分代表种皮中特有的 脂肪酸 据图 显示 在皂角种皮中 含有亚油酸 棕榈 酸 反油酸 亚油酸 硬脂酸 棕榈油酸 油酸 种 脂肪酸 亚油酸在种皮中含量最高 其次为棕榈酸 硬脂酸和 亚油酸含量相近 油酸含量最低 反油 酸是种皮中唯一特有的脂肪酸 含量较高 在接下 来的研究中 如需进一步对反油酸测定 提取 可直 接选取皂角种子种皮作为实验材料 皂角子叶与种皮之间相同脂肪酸对比研究 在皂角子叶与种皮中共有 种的相同的脂肪 酸 其中饱和脂肪酸有 种 棕榈酸 硬脂酸 不饱 和脂肪酸有 种 亚油酸 亚麻酸 油酸 棕榈油 酸 对其含量进行比较 结果如图 所示 通过图 可以发现 棕榈油酸在种皮和子叶中的含量相近 亚油酸 亚麻酸 棕榈酸 油酸 硬脂酸在子叶中的 含量均远高于种皮中的含量 在对上述 中脂肪酸 的深入研究中 可直接将皂角子叶作为材料展开相 关实验 图 皂角子叶与种皮中相同脂肪酸含量对比 皂角与其他植物油脂肪酸对比研究 表 几种植物油脂肪酸组成对比分析 样品棕榈酸硬脂酸油酸亚油酸 亚麻酸 大豆 芝麻 葵花籽 接骨木 白木香 皂角 在当前的研究中 大豆 芝麻 葵花籽等均是世 界植物油的重要原料 本文对大豆 芝麻 葵花 籽 接骨木 白木香以及皂角 种植物油脂肪酸的 种主要组分进行对比分析 结果如表 所示 皂角 中棕榈酸的含量占 高于其他 种植物 硬 脂酸的含量为 远高于大豆 芝麻 葵花籽 接骨木 种植物 具有降低血脂 降低血液胆固醇 预防动脉粥样硬化等作用的亚油酸 在皂角种子中 的含量高达 不饱和脂肪酸含量是评价植 物油营养水平的主要依据之一 由表 可知 皂角种 子中不饱和脂肪酸的含量高达 通过与 其他几种植物的比较发现 皂角种子具有重要的营 养价值 结论 作为脂肪酸分析的一种有效方法 灵 敏度高 相对于其他方法更加准确可靠 本研究采 用 法对皂角种子的子叶和种皮中的脂肪酸 年 中 国 林 副 特 产第 期 进行分析 鉴定出脂肪酸 种 主要大量存在于子 叶中 且含量远高于种皮 其中子叶中含有 种脂 肪酸 种特有脂肪酸 种皮中含有 种脂肪酸 种 特有脂肪酸为反油酸 将皂角种子与其他植物油种 子进行比较分析后发现 皂角种子中含有大量的脂 肪酸 不饱和脂肪酸的含量高达 其中 多 不饱和脂肪酸含量为 已高于一些食用 油 通过以上分析得知 皂角植物油可能有一定的 营养保健和医疗药效 具有作为食用油的潜力 有较 高的经济价值及广阔的开发前景 最终 本次实验 对于皂角种子的综合开发利用提供了科学依据 为 进一步的深入研究提供了一定的参考 参考文献 董玉山 刘占朝 李霞 等 皂角种子营养成分的研究 河南林业科技 王莹莹 刘伟杰 杜钢军 皂角刺抗肿瘤的初步研究 河南大学学报 医学版 龚宁 董玉山 赵海双 等 皂角籽化学成分的初步研究 西北农林科技大学学报自然科学版 李岗 王召平 仙云霞 等 皂角刺中黄酮类成分及其抗 肿瘤活性研究 中草药 尹卫平 刘华清 高嘉屿 等 皂角刺中 个香豆素类化 合物及其细胞毒活性研究 中草药 徐 哲 皂 角 刺 抗 肿 瘤 活 性 成 分 与 含 量 测 定 方 法 研 究 沈阳药科大学 徐杰 胡国华 张大勇 大豆种子脂肪酸组分的研究进 展 大豆科学 范胜栩 李斌 孙君明 等 气相色谱方法定量检测大 豆 种脂肪酸 中国油料作物学报 张延龙 韩雪源 牛立新 等 种野生牡丹籽油主要脂 肪酸成分分析 中国粮油学报 樊燕 孙晨阳 王博 等 分析俄罗斯鲟鱼不同 部位脂 肪 酸 组 成 现代食品科技 卫亚丽 杨茂发 刘爱英 蝉花中脂肪酸成分和含量的 分析 食品工业科技 楼乔明 徐杰 王玉明 等 气相色谱 质谱法分析孔石 莼中的脂肪酸 色谱 丽艳 罗丽萍 杨柏云 等 白木香种子油脂肪酸组成 分析 安徽农业科学 櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐 年 现代园艺 征订 征稿启事 现代园艺 聚集当代果树林木 瓜果蔬 菜 药材菌菇 花卉园林 景观设计等先进科 技信息 预测