《活性肽的分离提取》PPT课件.ppt

第二专题活性肽 蛋白的分离提取及应用 一 概述 定义 活性肽 是一类具有特殊生理活性的肽类 活性蛋白质 是一类具有特殊生理活性的蛋白质 分布 动物 植物及微生物组织 动物乳汁 植物种子等 一般性质 两性解离 等电点 胶体性 变性 沉淀 显色 二 活性肽及活性蛋白质的类型 三 活性肽及活性蛋白质的一般特性 1 谷胱甘肽 GSH 又称长寿因子 抗衰老因子 结构 L 谷氨酰 L半胱氨酰 L甘氨酸 3肽 生理作用 1 自由基清除剂GSH含有巯基 SH 可以和有机过氧化物作用 消除自由基 2 解毒剂可用于氟化物 CO 重金属及有机溶剂的解毒 3 保护作用对放射性药物引起的白细胞减少症状起到保护作用 4 防止皮肤老化及色素沉着 2 降压肽 降压肽是通过抑制血管紧张素转换酶 ACE 的活性 来体现降压功效 降压肽的来源 1 乳酸蛋白 12肽 2 鱼贝类 6肽 3 植物大豆降压肽玉米降压肽无花果降压肽 优点 这些肽通常是在温和条件下由蛋白酶水解制得 食用安全性高 对血压正常的人物降压作用 3 抗菌肽由30多个氨基酸残基组成的碱性寡肽 PI 7 水溶性好 具有热稳定性 表现出较强的阳离子特性 主要功能 杀菌作用某些抗菌肽具有广谱抗菌高效杀菌活性 部分对真菌 病毒及癌细胞 4 高F值肽 F Fischer 值 是支链氨基酸 BC 与芳香族氨基酸 AC 的摩尔比值 高F值肽主要生理功效 1 防治肝性脑病2 改善蛋白质营养状况在肠道易消化吸收 常用于烧伤 外科手术等患者的蛋白质营养补充 3 抗疲劳在应急情况下 BC可直接向肌肉提供能源 可作为高强度工作者和运动员能量补充 消除疲劳 增强体力 5 大豆肽 是大豆蛋白的酶水解产品 由3 6个氨基酸组成 有较好的流的特性 不易形成沉淀 可用于酸性饮料的制作 主要生理功能 1 易于消化吸收 2 促进脂代谢 3 增强肌肉的运动力 加速肌红细胞的恢复 4 较低的过敏性 6 乳活性肽 由乳蛋白经胰蛋白酶作用下水解由5 15个氨基酸残基组成的肽 主要作用 1 促进人体钙磷吸收 2 降低血压 3 抗血栓 4 镇静安神 1 乳铁蛋白 活性蛋白质 牛乳或母乳中的一种红色含铁的糖蛋白 Mr77000 1500 牛乳铁蛋白pI 8 0 母乳pI 6 0 生理功效 1 刺激肠道中铁的吸收 2 抑菌 抗病毒 3 调节吞噬细胞功能 4 调节发炎反应 2 大豆蛋白 是一类存在大豆的蛋白质 主要生理功效 1 营养价值丰富必需氨基酸比例与人体必需氨基酸比例接近 2 降低血清胆固醇 3 抑制动脉血管硬化 4 增强免疫效果 5 抗癌 6 防止骨质疏松 3 金属硫蛋白 MT 是一种含有大量镉 锌 富含半胱氨酸的低分子量蛋白质 Mr6000 10000 每摩尔MT有60 61个氨基酸残基 其中有18个半胱氨酸 每3个半胱的巯基结合一个2价的金属离子 主要生理功效 1 参与微量元素的储存 运输和代谢 2 清除自由基 拮抗电离辐射 3 金属离子的解毒作用 4 参与细胞DNA的复制和RNA的转录作用 参与蛋白质的合成与分解及能量代谢的调节 三 一般的活性肽及蛋白质的提取方法 蛋白质具有的一般特性 两性解离等电点 pI 胶体性变性沉淀显色 电泳 离子交换层析沉淀蛋白质透析加热 酸 碱 破坏蛋白质的高级结构盐析双缩脲反应540nm酚试剂法650nm考马斯亮蓝法595nm 四 活性肽 活性蛋白质的制备流程 1 谷胱甘肽的生产方法 4种 溶剂萃取法发酵法 主要介绍 酶法化学合成法 菌种的选择和改良诱变技术基因重组技术 固定化载体的选择 等电点沉淀法树脂吸附离子交换层析法 防止巯基氧化 碳源 氮源比例矿物盐的种类培养条件 2 高F值肽的生产 肌动蛋白酶兼有氨肽酶和羧肽酶作用 也能水解芳香族氨基酸形成的肽键 碱性蛋白酶水解芳香族氨基酸形成的肽键 去除芳香族氨基酸 AC 的方法为了提高F值 必须从酶水解液中除去AC 常有的方法 1 离子交换法2 膜分离法3 凝胶过滤法4 高效液相色谱法5 电泳技术6 吸附色谱法 选用SephadexG 15凝胶色谱柱 高支链氨基酸低聚肽在220nm有最大吸收峰 芳香族氨基酸在280nm有最大吸收峰 浓缩高F值肽的方法 超滤法冷冻法蒸发浓缩法 高F值肽的用途 制成口服液制成胶囊添加到食品或饮料中开发成各种功能性食品 3 降压肽的生产技术 降压肽的生产方式 原料来源生产方法多肽序列蛇毒提取Pyr W P R P T P N I P P酪蛋白胰蛋白酶F F V A P F P E V F G K玉米醇溶蛋白嗜热菌蛋白酶V H L P P P金枪鱼肉嗜热菌蛋白酶I V G R P R H Q G发酵乳发酵I P P Pyr是焦谷氨酸 4 大豆蛋白的生产工艺 五 活性肽 活性蛋白的研究方向 我国活性肽研究进展我国生物活性肽研究开发起步晚 研究单位少 基础和应用研究都很薄弱 目前处于起步阶段 我国在生物活性肽的研究开发上 从事活性肽的研究单位也多从医药角度出发 研究力量及投入较少 限制了活性肽药食两用功能的发挥 市场上国产的活性肽药品和食品寥寥无几 但近几年研究逐步活跃起来 报道渐多 前景看好 活性肽的研究方向1 肽的定向酶解技术开发包括高效 专一性高的酶的选育 复合酶系共同作用机理 2 脱苦微生物的分离 纯化机理 酶解工艺改进 3 功能性肽的分离 分析技术开发 4 肽的功能性生物学评价5 生物活性肽功能性食品的开发 目前肽类物质的应用1 功能性食品 具有一定功能的肽类食品 目前是国际上研究的热点 日本 美国 欧洲已捷足先登 推出具有各种各样功能的食品和食品添加剂