HBsAg及HBeAg定量检测.ppt

HBsAg及HBeAg定量检测临床意义 首都医科大学附属北京佑安医院陈煜 主要内容 HBV血清标志物HBsAg定量检测及其临床应用HBeAg定量检测及其临床应用 HepatitisBVirusDane颗粒及基因组结构 HBsAg HBcAg Partiallydouble strandedDNA HBeAg circulatingform DNAPolymerase Partiallydouble strandedcircularDNAvirusAmemberoftheHepadnaviridae HBV DaneParticle LHBs SHBs mRNAXmRNASHBs MHBsmRNALHBsmRNACore Pol cccDNA AAA pgRNA3 5kb Coreprotein Polymerase negativestrand positivestrand AAA AAA HBsAg抗 HBsHBeAg抗 HBe抗 HBc结果分析 HBV感染或无症状携带 大三阳 急性或慢性乙肝 小三阳 趋于恢复 乙肝恢复期 有免疫力 HBV抗原抗体检测结果的临床分析 乙肝五项定量检测的意义 有效的HBV疫苗接种所产生的抗 HBs多大于100IU L 抗 HBs小于10IU L是HBV免疫的临界量值 肝移植术后针对HBV的被动免疫治疗过程中抗 HBs定量值也十分有用 可以用来估算乙肝免疫球蛋白 HBIG 的用量及给药间隔 急性乙肝感染及恢复的血清学图谱 进行到慢性HBV感染的血清学图谱 HBsAg定量检测及临床应用 慢性乙肝治疗总体目标 最大限度地长期抑制或消除HBV 减轻肝细胞炎症坏死及肝纤维化 延缓和阻止疾病进展 减少和防止肝脏失代偿 肝硬化 HCC及其并发症的发生 从而改善生活质量和延长存活时间 慢性乙型肝炎的治疗药物 Therapeuticendpointsovertime 3 1 2 HBsAg转阴或血清转换 HBeAg转阴或血清转换 HBVDNA下降 HBsAg 检索2004年1月至今五年内涉及HBsAg定量的文献 以HBsAg定量作为主题词 检索中国知网 中国学术文献网络出版总库 共查到45篇相关文献在PubMed使用HBsAgassay与HBsAglevel作为主题词 查到相关文献32篇 结论 血清HBsAg定量分别与HBVDNA定量及肝内cccDNA定量存在相关性血清HBsAg定量可作为干扰素或核苷类似物抗病毒疗效及治疗终点的评估指标 HBsAg和HBV DNA相关性 M Deguchietal JournalofVirologicalMethods115 2004 217 222 417名慢性HBV携带者的血清样本 在HBsAg和HBV DNA水平有非常好的相关性HBVDNA是评估HBV复制的金标准 但有局限性 进口试剂昂贵 HBsAg和HBeAg相关性 总计418名慢性HBV携带者 定量检测HBsAg和HBeAg结果 M Deguchietal JournalofVirologicalMethods115 2004 217 222 HBsAg和HBV DNA聚合酶的相关性 总计418名慢性HBV携带者 检测HBsAg和HBV DNA聚合酶水平的结果 M Deguchietal JournalofVirologicalMethods115 2004 217 222 LevelofHBsAgaccordingtostageofdisease Rodellaetal JClinVirol2006 10 000 1000 10 0 1 Acute Convalescent HBeAg CHB HBeAg CHB HBsAglog10IU mL 乙肝和肝癌风险 YangNEJM2002 121086420 Percentcumulativeincidence 012345678910 Time years HBsAg HBeAg HBsAg HBeAg HBsAg HBeAg HBsAg转阴 提高生存率 SurvivalinpatientswithandwithoutHBsAgseroconversion NoHBsAgclearance 20 40 60 80 100 Survival WithHBsAgclearance P 0 001 Retrospectivestudyof309patientsovermeanfollow upof5 7years Fattovichetal AmJGastroenterol1998 Time years SerumHBsAgasanindicatorofnumberofinfectedcells cccDNAactsastranscriptiontemplateSerumHBsAglevelsreflectcccDNA A andintrahepaticHBVDNA B Non invasivemarkerofinfectedcells A B Chanetal ClinGastroHepatol2007 HBsAgatbaseline HBsAgatbaseline Log cccDNA atbaseline Log intrahepaticHBVDNA atbaseline A RelationshipbetweenHBsAgserumlevels bytheLaurelltest andintrahepaticcccDNAamounts medianvalues0 07 0 3and1 8cccDNAcopies cell DifferencesbetweengroupswerehighlysignificantbyMann Whitneytest LowserumHBsAglevelscorrelatewithlowintrahepaticcccDNAamounts Werle LapostolleetalGastro2004 Volzetal Gastro2007 IntrahepaticcccDNAisamarkerofinfectedcell recentreportsshowacorrelationbetweencccDNAlevelsandHBsAgserumlevels ABBOTTHBsAg定量检测试剂的特征 方法学 微粒子化学发光免疫分析技术 CMIA 灵敏度高灵敏度 0 05IU ml 大约0 2ng ml 特异性 99 87 标准品溯源性 W H O国际标准 80 549 国际上唯一具有WHO标准的定量检测试剂监测范围 0 05IU ml 250 0IU ml突变检测 HBsAg定量水平可以指导干扰素的治疗应答 HBsAg定量检测的临床应用 用来监测经 干扰素治疗患者的HBV复制情况 HBsAg定量检测 有望成为慢性HBV感染者进行干扰素治疗过程中 监测病毒复制的简单有效 经济的方法 AntiviralRes 1994Apr 23 3 4 251 7 PatientswithHBeAg阳性乙肝患者随机按1 1 1的比例分组ITT人数 n 814 Lamivudine100mgqd PEGASYS180 gqw lamivudine100mgqd PEGASYS180 gqw oralplaceboqd 0 24 48 随访6个月 72 研究周数 随机 治疗结束48周 随访结束72周 研究设计 研究240 干扰素 拉米夫定 HBsAg定量水平下降更多 HBsAgdropvsbaseline IU mL posttreatment HBsAgdropvsbaseline IU mL posttreatment 256 256 227 237 n 252 254 239 210 n 干扰素治疗48周 干扰素 拉米夫定治疗48周 241 178 254 207 n HBsAgdropvsbaseline IU mL 拉米夫定治疗48周 posttreatment Lauetal APASL2009Poster083 HBeAg转换者比无转换的HBsAg水平显著下降 0 65 1 18 1 56 1 21 0 41 0 67 0 81 0 37 1 8 1 6 1 4 1 2 1 0 0 8 0 6 0 4 0 2 0 0 12周 24周 48周 治疗后6个月 治疗后6个月无HBeAg血清学转换者 n 262 与基线相比HBsAg log10IU mL 干扰素 拉米夫定 治疗的病人所有时间点都有病人的HBsAg值 Lauetal APASL2009Poster083 干扰素治疗24周HBsAg定量的指导价值 32 52 16 停药1年后的HBeAg转换 24周HBsAg IU mL 20 000 1 500 1 500 20 000 19 8 43 Lauetal APASL2009Poster083 在24周时HBsAg 1500IU mL的病人 51 获得治疗后1年的HBeAg血清转换 其中20 获得HBsAg清除 对于部分应答的患者能否通过延长疗程或联合治疗提高疗效 所有患者 On treatmentdeclineofHBsAgtopredictresponse6monthspost treatment RamiMoucariH pitalBeaujon ClichyFrance Studydesign Patients48consecutiveHBeAg negativepatientsPEGASYS180 gweekfor48weeksEndoftreatment EOT response undetectableserumHBVDNASVR undetectableserumHBVDNA24weekspost treatmentFurtherfollow up 48weeksaftertreatmentcessation Baselinecharacteristics Moucarietal Hepatology2009 Virologicalresponse 62 25 30 48 12 48 Moucarietal Hepatology2009 patients HBsAgloss 6 25 3 12 3 48 0 36 Moucarietal Hepatology2009 patients HBVDNAlevel SVRsvs Non responders Logcopies mL Treatment FUP SVRs N 12 NRs N 18 Moucarietal Hepatology2009 HBVDNAlevel SVRsvs Relapsers SVRs N 12 Relapsers N 18 Moucarietal Hepatology2009 Logcopies mL Treatment FUP HBsAglevel SVRsvs Non responders SVRs N 12 NRs N 18 Moucarietal Hepatology2009 Logcopies mL Treatment FUP HBsAglevel SVRsvs Relapsers SVRs N 12 Relapsers N 18 Moucarietal Hepatology2009 Treatment FUP Logcopies mL HBsAg Predictivevalueofweek12drop 0 5logIU mL 48Patients N 9 N 39 N 4 N 35 N 1 N 8 PPV 89 NPV 90 Week12 HBsAg 0 5logIU mL Week12 HBsAg 0 5logIU mL SVR SVR SVR SVR Moucarietal Hepatology2009 HBsAg Predictivevalueofweek24drop 1LogIU mL 48Patients N 12 N 36 N 1 N 35 N 1 N 11 PPV 92 NPV 97 Week24 HBsAg 1logIU mL Week24 HBsAg 1logIU mL SVR SVR SVR SVR Moucarietal Hepatology2009 HBsAg定量作为临床监测指标的重要性 专家共识 HBsAg的消失是CHB患者可能达到的最佳治疗效果HBsAg的血清转换是CHB患者达到的最佳治疗效果完全免疫应答应定义为持续的HBsAg消失HBsAg的显著降低预示病人预后良好通过HBsAg定量检测可以预测那些患者最可能发生免疫应答 并指导治疗方案的制定 二 HBeAg检测及其临床应用 HBeAg定量水平可以指导干扰素的治疗应答 利用ARCHITECT系统进行HBe定量检测 推荐研究用 标本浓度计算公式 C 10 log S CO 0 6977 0 94 PEIU mlPEI线性范围 0 5 100PEIU m S CO值测量范围 1 000 350 000S CO 鉴于HBe浓度最高的S CO 不超过3000 因此推荐当S CO大于350时进行10倍稀释 PatientswithHBeAg阳性乙肝患者随机按1 1 1的比例分组ITT人数 n 814 Lamivudine100mgqd PEGASYS180 gqw lamivudine100mgqd PEGASYS180 gqw oralplaceboqd 0 24 48 随访6个月 72 研究周数 随机 治疗结束48周 随访结束72周 研究设计 研究240 PEGIFN 2a单药治疗24周HBeAg定量的指导价值 所有患者 n 263 52 n 137 21 n 54 27 n 72 72周时HBeAg血清转换 24周时HBeAg PEIU ml 52 71 137 20 11 54 100 10 10 100 4 3 72 NPV 96 Friedetal Hepatology2008 Friedetal Hepatology2008 对干扰素应答的指导价值 HBeAgvsHBVDNA HBeAg均值 PEIU ml HBVDNA均值 logcp ml 第24周时 HBeAg 100PEIU mL NPV96 HBVDNA 9log NPV86 第24周HBeAg比HBVDNA能更好地指导远期HBeAg血清转换率 HBeAg定量检测的临床意义 HBeAg定量检测及其在抗病毒治疗方面的预测作用HBeAg血清转换及其长期的临床效果 定量检测需要注意的问题 部分临床医生不了解定量检验的线性范围及误差可能受其它因素如自身抗体 红细胞脆片等的干扰 病情简介 患者 男 35岁 职员有乙肝家族史 母亲 姐姐 感染方式 母婴传播HBVDNA 1 38E 06乙肝病毒抗原抗体测定 HBsAg 250IU L HBsAb HBeAg1336 S Co HBeAb 肝功能 ALT163U L慢性乙型肝炎诊断日期 2006年04月04日既往抗病毒治疗 无 抗病毒治疗 治疗期限 90周 06 5 08 3 治疗剂量 135 g 180 g 自08 1起剂量由135 g改为180 g 联