培养基大全（包含各种培养基成分制备方法用途）.doc

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05克 10%糖或醇 10毫升 制备：把蛋白胨水，琼脂加热溶解，然后加12%酚红液04毫升，10%糖10毫升，混匀，分装试管，每管约2-3毫升，经115高压灭菌20分钟后，分置于试管架上，贴上各类糖或醇类标签备用。 质控标准：细菌发酵糖类或醇而产生酸，能使培养基PH改变，指示剂由红变黄色，如因发酵产生气体则 半固体内产生气泡，如有动力则半固体由清亮变混浊。 明胶培养基 成份：肉浸液 1000毫升（牛肉浸膏5克） 明胶 12克 制法： 100毫升肉浸液中，加入明胶12克，隔水加热煮化，校正PH72，分装小号试管，用阿诺氏间歇灭菌8030分钟，连续3日，或者108高压20分钟，冷却，贮存备用。 碱性蛋白胨水 成份： 蛋白胨 20克 氯化钠 5克 硝酸钾 01克 结晶碳酸钠（NaclCO312H2O） 02克 水 1000毫升 4 制法：将蛋白胨，Nacl，硝酸钾，结晶碳酸钠称好，溶于1000DW中，校正PH84分装试管，121高压 灭菌15分钟后备用 。 用途：用于霍乱弧菌培养。 葡萄糖蛋白胨水（M。V用） 成份：蛋白胨 5克 葡萄糖 5克 K2HPO4 5克 水 1000毫升 制法：将上述称好溶解分装试管，调PH74高压灭菌115 灭菌20分钟 ，或者葡萄糖加热煮沸后再倒试管 标准：灭菌试验合格。 接种大肠杆菌VP阴性，M阳性；接种产气杆菌VP阳性，M阴性。 用途：作鉴别肠道杆菌用。 枸椽酸盐培养基 成份：磷酸二氢铵 01克 硫酸镁 002克 磷酸氢二钾 01克 枸椽酸钠 023-05克（036） 氯化钠 05克 琼脂 15克 05%溴麝香草酚兰2毫升 （调PH68再加） 制法：将上述称好，放入水中煮沸溶解，调PH68，然后分装中号试管，高压灭菌，趁热倒呈斜面，凝固 后备用。 标准：1灭菌试验合格，培养基呈果绿色适宜。 2接种大肠杆菌，培养基上不生长，也不变色。 3接种产气杆菌，培养基呈深兰色。 用途：作鉴别大肠杆菌用。 双糖铁培养基 成份： 下层：蛋白胨 1克 氯化钠 05克 葡萄糖 02克 琼脂 03-05克 水 100毫升 将上述物质混匀调PH76后加12%酚红04毫升 上层：蛋白胨 1克 氯化钠 05克 乳糖 1克 硫代硫酸钠 003克 硫酸亚铁 002克 琼脂 1克 水 100毫升 制法： 1将下层配好，分装中号试管（1毫升），塞好包扎，15磅高压灭菌半小时，使凝固后备用。 2制上层时，先将蛋白胨水制好，加入硫酸亚铁，硫代硫酸钠，加热溶解PH81，再加入酚红分瓶，（每瓶300毫升，称取琼脂包扎灭菌，趁热加入乳糖隔水煮沸30分钟或112消毒15分钟）。 3取已制的下层管，每管用无菌法倒入上层液约1。5毫升，边斜放置使成斜面，凝固后备用。 标准：无菌试验合格，接种大肠杆菌下层产酸产气，上层产酸。 尿素培养基 成份：蛋白胨 01克 氯化钠 05克 磷酸二氢钾 02克 尿素 02克（或10%2毫升） 葡萄糖 001克（或10%葡萄糖01毫升） H2O 100毫升 酚红（02%） 04毫升 4 临床微生物培养基手册 制法：1除葡萄糖，尿素外把其它药品称好放入水中煮沸，使溶解，调PH72过滤，15磅高压灭菌15分钟 2配制尿素（灭菌）液：每100毫升基液内加2毫升 3配制10%葡萄糖（灭菌）每100毫升加01毫升 4分装小试管待用 标准： 1灭菌试验合格 2接种变形杆菌24小时呈红色 用途：鉴定变形杆菌用 胆盐中性红琼脂 成份：蛋白胨琼脂PH72-74 5000毫升 胆 盐 25克 乳糖 50克 对氨基苯甲酸 25毫克 1%中性红溶液 25毫升 制法： 将胆盐，对氨基苯甲酸，乳糖趁热加入已灭菌之蛋白胨琼脂中，待冷至50-60时，加入1%中性红液25毫升，混合后即倾注平皿，凝固待用 *：1%中性红：1克中性红加酒精60毫升，加水40毫升 丙二酸盐培养基（缩苹果酸钠） 成份：丙二酸钠 03克 酵母浸膏 01克 Nacl 02克 硫酸铵 02克 K2HPO4 006克 KH2PO4 004克 水 100毫升 PH68，高压灭菌备用 02%溴麝香酚兰乙醇 125毫升 制法：与枸椽酸盐利用试验相类似，是测定细菌能否利用丙二酸盐与碳源无机铵盐为氨源而生长，生长者使培养基变成碱呈兰色 鉴定： 克氏杆菌 （+） 赫夫尼亚 （+） 沙门氏菌 （） 痢疾杆菌 （） 苯丙氨酸培养基 成份：酵母浸液 15克 DL-苯丙氨酸 1克 磷酸氢二钠（无水）05克（或L-苯丙氨酸 05克） 氯化钠 25克 琼脂 6克 水 500毫升 PH74 制法：1 将上述成份加热溶解，分装于12*125mm口径的试管中，每管约4毫升 2 高压灭菌15磅10分钟，趁热使试管斜置凝固后备用 3 接种时划斜面 用途：鉴定沙门氏菌用苯丙氨酸脱氨酶试验沙门氏菌阴性 双抗培养基 成份： 蛋白胨 10克 牛肉膏 5克 氯化钠 5克 无水亚硫酸钠 3克 柠檬酸钠 10克 蔗糖 10克 琼脂粉 20克 水 1000毫升 制法： 1将上物称好，加热溶于水中 2调PH8284 3 分装高压灭菌后备用 倾注平板前先加热溶解琼脂等冷至50左右，按无菌操作加入多、庆抗菌素充分摇匀， 倾注平板，凝固后备用 （庆大霉素：150u/毫升，多粘菌素：1500u/毫升, 2毫升加至1000毫升培养基内，此相当于庆大霉素0.3u/毫升, 多粘菌素3u/毫升） O2培养基 保存液：（文腊氏液） A液：硼酸 12405克 KCL 14912克 水 1000毫升 取A液250毫升 08%NAOH 1335毫升 NACL 20克 水 1000毫升 分装高压灭菌 硝酸盐胨水 成份： 蛋白胨 1克 硝酸钾（无NO2） 01克 H2O 100毫升 PH74，高压灭菌分装备用 （如无硝酸钾也可用硝酸钠002克，NACL005克，H2O100毫升） 用途：硝酸盐还原试验用 原理：测定细菌能否还原硝酸盐为亚硝酸盐，后者在酸性条件下与a萘胺和对氨基苯磺酸发生重氮反应，生成红色的1-萘-4偶氮苯对磺酸 制法：试剂甲液A对氨基苯磺酸08克溶于5N的醋酸100毫升 B：乙液a-萘酚05克溶于5N的醋酸100毫升中 将细菌接种于硝酸盐水中37培养24-96小时，加入甲液01毫升，再加入乙液数滴，立即呈现红或紫色为阳性 5 临床微生物培养基手册 king氏培养基（能促进绿脓菌绿色素产生） 成分： 蛋白胨 2克 K2SO4 1克 甘油 1克 MGCL2 0.14克 琼脂 1.5克 H2O 100毫升 KING氏培养基（能促进绿脓菌荧光色产生） 成分： 蛋白胨 2克 甘油 1克 K2SO4 0.15克 MGSO4 4.7克 H2O 0.15克 琼脂 1.5克 H2O 100毫升 调PH7.2 15磅20分钟消毒后使成斜面备用 七叶苷水解试验 原理： 粪链球菌能分解七叶苷（Escalin）其代谢产物与铁离子结合产生黑色沉淀，使培养基变黑 方法： 将菌种接种在七叶苷或琼脂上3718小时，观察结果，培养基变黑色，其他链球菌能生长但不变黑色，肺炎链球菌不长 成分： 七叶苷 0.1克 胰胨 1.5克 枸橼酸铁 0.2克 琼脂 2.0克（0.5克/50毫升） 胆汁 2.5毫升 H2O 100毫升 PH7.0分装小试管内高压灭菌后备用（10磅20分钟） 七叶苷又名桑树皮甙，七叶灵，Aesclin Escnlim Bicolorin等为白色针状结晶水溶液兰色荧光） 葡萄糖氧化发酵培养基（O/F） 成份： 蛋白胨 27克 氯化钠 50克 02%溴麝香酚兰 003克 琼脂 3克 KH2PO4 03克 葡萄糖 100克 水 1000毫升 制法：以上成份除糖外，溶解调PH70，10磅高压灭菌20分钟后备用 方法：挑取少量培养物接种两管，其中一管接种后加液体石腊不少于1厘米厚，两管同时35，培养过夜， 观察颜色的变化，若无颜色变化，需继续观察七天，每日观察刺层型别 用途：适用于微球菌科和非发酵菌的鉴定 麦康凯培养基 成份： 蛋白胨 20克 氯化钠 5克 乳糖 10克 琼脂 20克 H2O 1000毫升 1%中性红溶液 3-4毫升 1%结晶紫 01毫升 PH74 除中性红临时用时加入外，其余均高压灭菌备用 邻硝基酚半乳糖甙（ONPG）酶试验 缓冲液： Na2H2PO4 69克 溶于40DW中，用5NNOH调PH70，再加水到50毫升，冰箱保存用前若有结晶可稍加温，溶解后再用 ONPG液： 称取ONPG（邻硝基酚-B-D半乳糖苷）80毫克，溶于15毫升D.W中，再加上缓冲液5毫升，放入冰箱中保存此液不稳定，如出现黄色即不能用 鉴别： 脑膜炎球菌和乳糖球菌及沙门氏菌属与枸橼酸菌属及亚利桑那氏菌属 脑膜炎球菌和沙门氏菌属为阳性 乳球菌，枸橼酸菌属和亚利桑那菌属为阳性 半固体培养基 成份： 牛肉膏 3克 蛋白胨 10克 氯化钠 5克 琼脂 25-4克 水 1000毫升 校正PH74，15磅高压15分钟倾注平板，厚度约4mm，冷藏备用 氨基酸脱羟试验培养基 成份： L-氨基酸 05克 蛋白胨 05克 牛肉膏 05克 葡萄糖 005克 吡多醛 05克 水 100毫升 2%溴甲酚紫乙醇液 05毫升 2%甲酚红 025毫升 制法：除指示剂及氨基酸外，溶解，PH60，然后加入氨基酸（必要时重新调PH）及指示剂，混匀分装1毫升/管加10毫米厚石蜡油，高压10-15磅10-15分钟灭菌备用 6 临床微生物培养基手册 注意： 1 使用DL型AA时量加倍 2 最好同时接种空白管（即不含有AA的同样培养基）作对照 3 培养基超过24小时可出现假阳性 葡萄糖酸盐培养基 成份： 蛋白胨 15克 酵母浸液 1克 K2HPO4 1克 葡萄糖酸钾 40克 DW 1000毫升 溶解过滤分装，高压10磅15分钟 结果：加班氏试剂，加热观察结果 黄-橙色为阳性 无颜色变化为阴性 枝矛噬愤比纪夺医暖藩院芋疡寒营含棺盔重针莆鄂缨糟烂葡板嗅汾浑筏嚣恫关槛晋钙湃楚卒赵脱盆葱吾温辑纫潭外芽