生化项目SOP.docx

沭阳县仁慈医院检验科生化室作业指导书 文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP第A版编制： 路珊珊 钱丽萍审核： 李 萍批准： 侯 波生效日期：2012年10月01日沭阳县仁慈医院检验科沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP目 录文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP版本：A/0页码： 2 / 204生效日期： 2012-10-01目 录序号主 题 内 容代 号页 号1血清总胆红素测定SYXRCYYLAB-SHSOP-001 62血清直接胆红素测定SYXRCYYLAB-SHSOP-002103血清总胆汁酸测定SYXRCYYLAB-SHSOP-003144血清甘胆酸测定SYXRCYYLAB-SHSOP-004185血清总蛋白液体双缩脲法测定SYXRCYYLAB-SHSOP-005216血清白蛋白溴甲酚绿法测定SYXRCYYLAB-SHSOP-006257血清前白蛋白测定SYXRCYYLAB-SHSOP-007298血清丙氨酸氨基转移酶测定SYXRCYYLAB-SHSOP-008339血清天门冬氨酸氨基转移酶测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0093710血清碱性磷酸酶测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0104111血清GGT速率法测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0114512血清胆碱酯酶测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0124913血清尿素氮酶法测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0135314血清尿酸酶法测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0145715血清肌酐酶法测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0156116血清2-微球蛋白测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0166517血清胱抑素C测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0176818血清视黄醇测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0187119血清葡萄糖氧化酶法测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0197520糖化血红蛋白测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0207921血清总胆固醇酶法测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0218322血清甘油三酯酶法测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0228623血清高密度脂蛋白胆固醇测定SYXRCYYLAB-SHSOP-02390沭阳县仁慈 医院检验科生化室SOP目 录文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP版本：A/0页码：3 / 204生效日期： 2012-10-0124血清低密度脂蛋白胆固醇测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0249425血清载脂蛋白AI测定SYXRCYYLAB-SHSOP-0259826血载脂蛋白B测定SYXRCYYLAB-SHSOP-02610227血清脂蛋白a测定SYXRCYYLAB-SHSOP-027 10628血清肌酸激酶测定SYXRCYYLAB-SHSOP-02811029血清肌酸激酶同功酶测定SYXRCYYLAB-SHSOP-02911430血清乳酸脱氢酶测定SYXRCYYLAB-SHSOP-03011831血清a-羟丁酸脱氢酶测定SYXRCYYLAB-SHSOP-03112232血清a-淀粉酶测定SYXRCYYLAB-SHSOP-03212633腺苷脱氨酶测定SYXRCYYLAB-SHSOP-03313034a-L-岩藻糖苷酶测定SYXRCYYLAB-SHSOP-03413435钙测定SYXRCYYLAB-SHSOP-03513836镁测定SYXRCYYLAB-SHSOP-03614237磷测定SYXRCYYLAB-SHSOP-03714638抗链球菌溶血素O测定SYXRCYYLAB-SHSOP-03814939类风湿因子测定SYXRCYYLAB-SHSOP-03915240C-反应蛋白测定SYXRCYYLAB-SHSOP-04015541免疫球蛋白A测定SYXRCYYLAB-SHSOP-04115842免疫球蛋白G测定SYXRCYYLAB-SHSOP-04216143免疫球蛋白M测定SYXRCYYLAB-SHSOP-04316544补体3因子测定SYXRCYYLAB-SHSOP-04416945补体4因子测定SYXRCYYLAB-SHSOP-04517246K/Na/Cl测定SYXRCYYLAB-SHSOP-04617547尿液和脑脊液总蛋白测定SYXRCYYLAB-SHSOP-047181沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP目 录文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP版本：A/0页码： 4 / 204生效日期： 2012-10-0148CRP测定（金标法）SYXRCYYLAB-SHSOP-04818449糖化血红蛋白测定（金标法）SYXRCYYLAB-SHSOP-04918750D-二聚体测定（金标法）SYXRCYYLAB-SHSOP-05019051尿微量白蛋白测定（金标法）SYXRCYYLAB-SHSOP-05119352正常值、病理值复合质控品SYXRCYYLAB-SHSOP-05219653复合校准品SYXRCYYLAB-SHSOP-053198沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP目录文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP版本：A/0页码： 5 / 204生效日期： 2012-10-01修 订 页序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期1234567891011121314151617181920沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP血清总胆红素(T-BIL)测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-001版本：A/0页码： 6 / 204生效日期： 2012-10-01血清总胆红素(T-BIL)测定一、目的保证总胆红素测定的结果准确、可靠。二、修改程序本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任）。三、适用范围钒酸盐氧化法测定总胆红素。四、试剂来源本标准操作程序适用于上海执诚生物科技股份有限公司生产的总胆红素测定试剂盒。五、溯源全国临床检验操作规程（第二版）。六、原理此方法基于样品中的总胆红素在pH3.0 环境中，在有机复合物氧化剂的作用下，可以被氧化成胆绿素，而胆红素特有的黄色也随即消失，在450nm 处测定吸光度的变化，即可计算出样品中总胆红素的浓度。七、试剂R1： 硫磺酸缓冲液（pH2.9） 0.1mol/L表面活性剂 R2： 磷酸缓冲液（pH7.0） 10mmol/L 有机钒酸盐 4mmol/L 不同批号试剂盒中各组份不能互换。本试剂对光敏感，28密闭避光保存可以稳定18个月（勿冷冻）；首次开启试剂后，避光保存于28防污染环境中，可继续稳定至效期。校准液： Randox 公司提供的系列校准品。八、标本采沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP血清总胆红素(T-BIL)测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-001版本：A/0页码： 7 / 204生效日期： 2012-10-01血清总胆红素(T-BIL)测定血清、血浆。样本28保存可以存放约3天，-20保存可以存放3个月，但只能冻融一次。九、操作步骤1、标本编号，分离血清，依顺序置样品架上。2、按标本编号在全自动化生化仪器上输入标本的基本信息和测定要求，进行测定。3、仪器校准：将校准液置试管架上，输入校准液浓度，然后进行测定（测定参数与下同），其吸光度贮存在电脑中，浓度值测定符合要求即可应用。一般每36个月校准一次，若更换不同批号的试剂、质控超标或仪器维修处理后应进行校准 。4、测定参数：血清量 7l试剂 200l试剂 50l主波长 444nm次波长 548nm反应类型 终点法；负反应测定时间 10分钟温度 37报告单位 mol/L5、结果计算：A 样品样本中总胆红素的含量 = - 标准液浓度A 标准单位换算：mg/dl17.1=mol/L 十、正常参考值5.1-20mol/L 沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP血清总胆红素(T-BIL)测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-001版本：A/0页码： 8 / 204生效日期： 2012-10-01血清总胆红素(T-BIL)测定十一、室内质控质控方法：每天测定样品前做一组质控，在标本中间插一组质控，最后再做一组质控品，共三组。控制限（X2SD）：超过+2SD或2SD均为失控，寻找原因，另作处理。当校准物或质控物达不到靶值时，将质控物或校准物按本单位条件重复测定20次，计算均值和标准差，再以测定结果为靶值进行校准或质控用。十二、性能指标1. 外观：R1试剂为澄清、无色液体；R2试剂为澄清、无色到浅黄色液体。2. 装量：液体试剂的净含量不少于标识值。3. 空白吸光度：以蒸馏水为空白对照（450nm；1cm；37）应不大于0.45。4. 分析灵敏度：测得的校准品在5分钟内单位浓度吸光度的变化绝对值0.110-3。5. 线性范围：在0.4730mg/dL范围内，剂量-反应曲线线性相关系数应不低于0.9900；线性相对偏差15%。6. 准确度：误差10%。7. 精密度：批内变异系数6%，批间相对极差8%。8. 在28避光条件下，总胆红素测定试剂盒自生产之日起可以保存18个月。十三、检验方法的局限性1.样本中血红素（500mg/dL）、甘油三酯（2000 mg/dL）、抗坏血酸（30mg/dL）在达到以上浓度前基本不会影响该试剂的测定。为了不影响测试结果，操作时请格外注意，用移液器移液时勿用嘴。2.因为反应液pH 值低，故不推荐使用肝素抗凝血浆。3.浓度最大可达30mg/dL。高于此浓度，请用生理盐水稀释，所得结果乘以稀释因子。十四、临床意义、血清总胆红素病理性增高常见于：1、溶血性黄疸：如新生儿黄疸、阵发性睡眠性血红蛋白尿、疟疾、血型不合的输血、沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP血清总胆红素(T-BIL)测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-001版本：A/0页码： 9/ 204生效日期： 2012-10-01血清总胆红素(T-BIL)测定急性溶血性贫血等。2、肝细胞性黄疸：如急性黄疸性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化、急性肝坏死、中性肝炎、肝癌等。3、阻塞性黄疸：如胆石症、胰头癌等。、血清总胆红素降低：主要见于再生障碍性贫血等。十五、【参考文献】 1. 临床化学常用项目自动分析发/韩志钧等主编.沈阳：辽宁科学技术出版社，2005.82. 临床检验自动化分析标准操作规程/陆永绥，李清华，张伟民主编。杭州：浙江大学出版社，2006.93. 临床检验管理与技术规程/陆永绥，张伟民主编。杭州：浙江大学出版社，2004.104. 张秀明等主编。现在临床生化检验学，北京：人民军医出版社，2001沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP血清直接胆红素(T-BIL)测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-002版本：A/0页码： 10 / 204生效日期： 2012-10-01血清直接胆红素（D-BIL）测定一、目的保证直接胆红素测定的结果准确、可靠。二、修改程序本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任）。三、适用范围钒酸盐氧化法测定直接胆红素。四、试剂来源本标准操作程序适用于上海执诚生物科技股份有限公司生产的总胆红素测定试剂盒。五、溯源全国临床检验操作规程（第二版）。六、原理此方法基于样品中的直接胆红素在pH3.0 环境中，在有机复合物氧化剂和表面活性剂的共同作用下，可以被氧化成胆绿素，而胆红素特有的黄色也随即消失，在450nm 处测定吸光度的变化，即可计算出样品中直接胆红素的浓度。七、试剂R1： 酒石酸缓冲液（pH2.9） 0.1mol/L表面活性剂R2： 磷酸缓冲液（pH7.0） 10mmol/L 有机钒酸盐 4mmol/L 不同批号试剂盒各组份不能互换。本试剂对光敏感，28密闭避光保存可以稳定18个月（勿冷冻）；首次开启试剂后，避光保存于28防污染环境中，可继续稳定至效期。校准液： Randox 公司提供的系列校准品。沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP血清直接胆红素(T-BIL)测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-002版本：A/0页码： 11/ 204生效日期： 2012-10-01血清直接胆红素（D-BIL）测定八、标本采集血清、血浆。样本28保存可以存放约3 天，-20保存可以存放3 个月，但只能冻融一次；又因为反应液pH 值低，故不推荐使用肝素抗凝血浆。九、操作步骤1、标本编号，分离血清，依顺序置样品架上。2、按标本编号在全自动化生化仪器上输入标本的基本信息和测定要求，进行测定。3、仪器校准：将校准液置试管架上，输入校准液浓度，然后进行测定（测定参数与下同），其吸光度贮存在电脑中，浓度值测定符合要求即可应用。一般每36个月校准一次，若更换不同批号的试剂、质控超标或仪器维修处理后应进行校准。4、测定参数：血清量 7l试剂 200l试剂 50l主波长 444nm次波长 548nm反应类型 终点法；负反应测定时间 10分钟温度 375、结果计算：A 样品样本中直接胆红素的含量 = - 标准液浓度A 标准单位换算：mg/dl17.1=mol/L十、正常参考值：1.70-6.80umol/L。沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP血清直接胆红素(T-BIL)测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-002版本：A/0页码： 12/ 204生效日期： 2012-10-01血清直接胆红素（D-BIL）测定十一、室内质控质控方法：每天测定样品前做一组质控，在标本中间插一组质控，最后再放一组质控品，共三组。控制限（X2SD）：超过+2SD或2SD均为失控，需寻找原因，另作处理。当校准物或质控物达不到靶值时，将质控物或校准物按本单位条件重复测定20次，计算均值和标准差，再以测定结果为靶值进行校准或质控用。十二、性能指标1. 外观：R1试剂为澄清无色液体；R2试剂为澄清无色到微黄色液体。2. 装量：液体试剂的净含量不少于标识值。3. 空白吸光度：以蒸馏水为空白对照与试剂1和试剂2混合后测得的吸光度值0.45ABS（450nm；1cm；37）。4. 分析灵敏度：测得的校准品在5分钟内单位浓度吸光度的变化绝对值0.1510-3。5. 线性范围：在0.1610 mg/dL范围内，剂量-反应曲线线性相关系数应不低于0.9900；线性相对偏差15%。6. 准确度：用试剂盒测定校准血清，作3次测定并计算其测定结果均值，所得的结果与靶值对照，误差10%。7. 精密度：批内变异系数CV6%，批间相对极差8%。8. 在28避光条件下，直接胆红素测定试剂盒自生产之日起可以保存18个月。十三、检验结果的解释1.常用于诊断胆道阻塞、肝硬化、肝炎等疾病。2.胆管梗阻（如胆结石）或肝细胞病（如肝硬化或肝炎）可引起高结合胆红素（直接胆红素）血症。3.直接胆红素测定结果升高也可能由各种药物引起，其中包括抗生素、巴比妥类、固醇类或口腹避孕药。沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP血清直接胆红素(T-BIL)测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-002版本：A/0页码： 13 / 204生效日期： 2012-10-01血清直接胆红素（D-BIL）测定十四、临床意义血清直接胆红素显著增高常见于：1、阻塞性黄疸：如胆石症、肝癌、胰头癌等。2、肝细胞性黄疸：如急性黄疸性肝炎、慢性活动性肝炎、急性黄色肝萎缩等。十五、【参考文献】1. 临床化学常用项目自动分析发/韩志钧等主编.沈阳：辽宁科学技术出版社，2005.82. 临床检验自动化分析标准操作规程/陆永绥，李清华，张伟民主编。杭州：浙江大学出版社，2006.93. 临床检验管理与技术规程/陆永绥，张伟民主编。杭州：浙江大学出版社，2004.104. 张秀明等主编。现在临床生化检验学，北京：人民军医出版社，2001 沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP总胆汁酸酶法测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-003版本：A/0页码：14 / 204生效日期： 2012-10-01总胆汁酸酶法测定一、目的保证总胆汁酸测定的结果准确、可靠。二、修改程序本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任）。三、适用范围循环酶法测定总胆汁酸。四、试剂来源本标准操作程序适用于上海执诚生物科技有限公司生产的总胆汁酸测定试剂盒。五、溯源全国临床检验操作规程（第二版）。六、原理标本中的胆汁酸被3-羟基类固醇脱氢酶（3-HSDH）及-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸氧化型（Thio-NAD）特异性的氧化，生成3-酮类固醇以及-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸还原Thio-NADH。而生成的3-酮类固醇在3-HSDH和-烟酰胺脲嘌呤二核苷酸还原型（NADH）作用下，又生成胆汁酸及-烟酰胺脲嘌呤二核苷酸氧化型（NAD）。通过上述的循环，血清中微量的胆汁酸量得到了放大，Thio-NADH也同比的扩增，于是通过测定Thio-NADH在405nm特异性的吸光度变化，即可计算得到标本中胆汁酸的含量。胆汁酸+Thio-NAD 3a-HSD 3-酮类固醇+Thio-NADH3-酮类固醇+NADH 3a-HSD 胆汁酸+NAD+七、试剂R1： 缓冲液pH7.0 0.65mmol/LThio-NAD 1g/L ： 沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP总胆汁酸酶法测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-003版本：A/0页码：15 / 204生效日期： 2012-10-01总胆汁酸酶法测定R2：缓冲液pH7.0 0.65mmol/L3a-羟类固醇脱氢酶 (3a-HSDH) 5000U/L叠氮钠 0.6mmol/lNADH 6g/L 不同批号试剂盒中各组份不能互换。标准液： 英国Randox 公司提供的系列校准品。本试剂2-8密闭避光保存可以稳定18个月（勿冷冻），首次开启试剂后，避光保存于2-8防污染环境中，可继续使用到有效期止。八、标本采集空腹新鲜血清或血浆。血清中胆汁酸在2-8可稳定7天，-20可以稳定3个月。九、操作步骤1、标本编号，分离血清，按顺序置样品架上。2、按标本编号在全自动化生化仪器上输入标本的基本信息和测定要求，进行测定。3、仪器校准：将校准液置试管架上，输入校准液浓度，然后进行测定（测定参数与下同），其吸光度贮存在电脑中，浓度值测定符合要求即可应用。一般每36个月校准一次，若更换不同批号的试剂、质控超标或仪器维修处理后应进行校准。4、测定参数：血清量 3l试剂 200l试剂 66l主波长 404nm次波长 660nm反应类型 速率法 测定时间 10分钟沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP总胆汁酸酶法测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-003版本：A/0页码：16 / 204生效日期： 2012-10-01总胆汁酸酶法测定温度 375、结果计算：A样品/min样品中胆汁酸含量 = - 标准液浓度A标准/min十、正常参考值015mol/L十一、室内质控质控方法：每天测定样品前做一组质控，在标本中间插一组质控，最后再做一组质控品，共三组。控制限（X2SD）：超过+2SD或2SD均为失控，需寻找原因，另作处理。当校准物或质控物达不到靶值时，将质控物或校准物按本单位条件重复测定20次，计算均值和标准差，再以测定结果为靶值进行校准或质控用。十二、性能指标1. 外观：R1（缓冲液）：澄清，浅黄色液体 R2：（启动液）澄清，无色液体。2. 装量：液体试剂的净含量不少于标识值。3. 空白吸光度及空白吸光度变化率：以蒸馏水为空白对照（405nm；1cm；37）应不大于0.5；试剂空白吸光度变化率绝对值0.075。4. 分析灵敏度：测得的校准品在5分钟内单位浓度吸光度的变化绝对值0.3410-3。5. 线性范围：在12.5200mol/L范围内，剂量-反应曲线线性相关系数应不低于0.9900；线性相对偏差15%。6. 准确度：误差10%。7. 精密度：批内变异系数4%，批间相对极差5%。8. 在28避光条件下，总胆汁酸测定试剂盒自生产之日起可以保存18个月。十三、检验方法的局限性血红蛋白500mg/dl、抗坏血酸盐100mg/dl、胆红素50mg/dl对实验结果不产生沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP总胆汁酸酶法测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-003版本：A/0页码：17 / 204生效日期： 2012-10-01总胆汁酸酶法测定影响。为不影响测试结果，操作时请格外注意，用移液器移液时勿用嘴十四、临床意义血清TBA增高，常见于急性乙肝、慢性活动性肝炎、慢性迁延性肝炎、肝硬化等。十五、【参考文献】1. 临床化学常用项目自动分析发/韩志钧等主编.沈阳：辽宁科学技术出版社，2005.82. 临床检验自动化分析标准操作规程/陆永绥，李清华，张伟民主编。 杭州：浙江 大学出版社，2006.93. 临床检验管理与技术规程/陆永绥，张伟民主编。杭州：浙江大学出版社，2004.104. 林其燧等.临床化学诊断方法大全，东南大学出版社，1990年第一版沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP甘胆酸测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-004版本：A/0页码：18 / 204生效日期： 2012-10-01甘胆酸测定一、目的保证甘胆酸测定的结果准确、可靠。二、修改程序本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任）。三、适用范围胶乳增强免疫比浊法测定甘胆酸。四、试剂来源本标准操作程序适用于新昌美迪生物科技有限公司生产的甘胆酸测定试剂盒。五、溯源全国临床检验操作规程（第二版）。六、原理标本中的甘胆酸与试剂中的肝胆酸抗体胶乳颗粒反应，出现凝集反应，在600nm波长检测其吸光度的变化，其变化程度与样本中的肝胆酸含量成正比。七、试剂R1： Tris缓冲液pH7.2 100mMR2： 甘胆酸抗体胶乳颗粒悬浊液 1% 不同批号试剂盒中各组份不能互换。标准液： 英国Randox 公司提供的系列校准品。本试剂2-8密闭避光保存可以稳定12个月（勿冷冻），首次开启试剂后，避光保存于2-8防污染环境中，可继续使用到有效期止。八、标本采集沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP甘胆酸测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-004版本：A/0页码：19 / 204生效日期： 2012-10-01甘胆酸测定空腹新鲜血清或血浆。血清中肝胆酸在2-8可稳定7天，-20可以稳定3个月。九、操作步骤1、标本编号，分离血清，按顺序置样品架上。2、按标本编号在全自动化生化仪器上输入标本的基本信息和测定要求，进行测定。3、仪器校准：将校准液置试管架上，输入校准液浓度，然后进行测定（测定参数与下同），其吸光度贮存在电脑中，浓度值测定符合要求即可应用。一般每36个月校准一次，若更换不同批号的试剂、质控超标或仪器维修处理后应进行校准。4、测定参数：血清量 5l试剂 200l试剂 50l主波长 600nm反应类型 终点法、正反应测定时间 5分钟温度 37报告单位 mg/L5、结果计算：A样品A空白样品中甘胆酸含量 = - 标准液浓度A标准A空白十、正常参考值010mg/L十一、室内质控质控方法：每天测定样品前做一组质控，在标本中间插一组质控，最后再做一组质控品，共三组。沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP甘胆酸测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-004版本：A/0页码：20 / 204生效日期： 2012-10-01甘胆酸测定控制限（X2SD）：超过+2SD或2SD均为失控，需寻找原因，另作处理。当校准物或质控物达不到靶值时，将质控物或校准物按本单位条件重复测定20次，计算均值和标准差，再以测定结果为靶值进行校准或质控用。十二、性能指标1. 外观：R1（缓冲液）：澄清，浅黄色液体 R2：（启动液）澄清，无色液体。2. 装量：液体试剂的净含量不少于标识值。3. 空白吸光度及空白吸光度变化率：以蒸馏水为空白对照（600nm；1cm；37）应不大于1.2；试剂空白吸光度变化率绝对值0.075。4. 分析灵敏度：测得的校准品在5分钟内单位浓度吸光度的变化绝对值0.3410-3。5. 线性范围：在80mgl/L范围内，剂量-反应曲线线性相关系数应不低于0.9900；线性相对偏差15%。6. 准确度：误差10%。7. 精密度：批内变异系数5%，批间相对极差10%。8. 在28避光条件下，甘胆酸测定试剂盒自生产之日起可以保存12个月。十三、检验方法的局限性严重乳糜或脂浊标本影响测定结果，建议先离心后测定。十四、临床意义血清甘胆酸增高，常见于急性肝炎和肝硬化患者血清甘胆酸有较大幅度的升高。十五、【参考文献】1. 临床化学常用项目自动分析发/韩志钧等主编.沈阳：辽宁科学技术出版社，2005.82. 临床检验自动化分析标准操作规程/陆永绥，李清华，张伟民主编。 杭州：浙江 大学出版社，2006.93. 临床检验管理与技术规程/陆永绥，张伟民主编。杭州：浙江大学出版社，2004.104. 林其燧等.临床化学诊断方法大全，东南大学出版社，1990年第一版5、临床检验管理与技术规程沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP血清总蛋白双缩脲法测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-005版本：A/0页码： 21 / 204生效日期： 2012-10-01血清总蛋白(TP)双缩脲法测定一、目的保证总蛋白测定的结果准确、可靠。二、修改程序本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任）。三、适用范围双缩脲法测定总蛋白。四、试剂来源本标准操作程序适用于上海执诚生物科技股份有限公司生产的总蛋白测定试剂盒。五、溯源全国临床检验操作规程（第二版）。六、原理蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结合而成的，肽键在碱性溶液中，能与二价铜离子作用产生紫红色络合物，在546nm有吸收峰，并与蛋白含量成正比，通过与同样处理的标准蛋白比较可求出标本血清中总蛋白的含量。七、试剂氢氧化钠 600mmol/L硫酸铜 12mmol/L酒石酸钾钠 32mmol/L碘化钾 30mmol/L稳定剂 不同批号试剂盒中各组份不能互换。本试剂2-25密闭避光保存可以稳定18个月（勿冷冻），首次开启试剂后，避光保存于2-25防污染环境中，可继续使用到有效期止。校准液： Randox公司提供的系列校准品。沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP血清总蛋白双缩脲法测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-005版本：A/0页码： 22/ 204生效日期： 2012-10-01血清总蛋白(TP)双缩脲法测定八、本采集血清或血浆（应使用澄清、不溶血的血清，尽快与红血球分离；室温可稳定1周；建议冷藏。）九、操作步骤1、标本编号，分离血清，按顺序置样品架上。2、按标本编号在全自动化生化仪器上输入标本的基本信息和测定要求，进行测定。3、仪器校准：将校准液置样品架上，输入校准液浓度，然后进行测定（测定参数与下同），其吸光度贮存在电脑中，浓度值符合校准值即可，一般每36个月校准一次。若更换不同批号的试剂、质控超标或仪器维修处理后应进行校准。4、测定参数：血清量 4l试剂量 240l波长 548nm反应类型 终点法；正反应测定时间 10分钟温度 37报告单位 g/L5、结果计算：A样品A空白样品中总蛋白含量 = - 标准液浓度（单位：g/L）A标准A空白十、正常参考值成人: 60-80g/L 十一、室内质控质控方法：每天测定样品前做一组质控，在标本中间插一组质控，最后再做一组质控，沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP血清总蛋白双缩脲法测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-005版本：A/0页码： 23 / 204生效日期： 2012-10-01血清总蛋白(TP)双缩脲法测定共三组。控制限（X2SD）超过+2SD或-2SD均为失控，需寻找原因，另作处理。当校准物或质控物达不到靶值时，将质控物或标准物重复测定20次，计算均值和标准差，再以测定结果为靶值来进行校准或质控。十二、性能指标1. 外观：澄清，蓝色液体。2. 装量：液体试剂的净含量不少于标识值。3. 空白吸光度：以蒸馏水为空白对照（546nm；1cm；37）应不大于0.25。4. 分析灵敏度：测得的校准品在5分钟内单位浓度吸光度的变化绝对值0.4510-5。5. 线性范围：在7.5120g/L范围内，剂量-反应曲线线性相关系数应不低于0.9900；线性相对偏差15%。6. 准确度：误差10%。7. 精密度：批内变异系数4%，批间相对极差5%。8. 在28避光条件下，总蛋白测定试剂盒自生产之日起可以保存18个月。十三、检验方法的局限性1.双缩脲比色法目前还没有标准化，试剂组成的摩尔浓度经过了多种方法的修改，但双缩脲比色法仍被视为基础的参考方法。牛血清白蛋白被推荐为总蛋白定量的校准品。2.输注溶液、铵盐、溶血、脂血及浓度大于5mg/dl的胆红素等可能影响测量结果。十四、临床意义、血清总蛋白浓度增高：1、主要是由于血清浓缩而致，尤其是急性失水（如严重腹泻、呕吐、高热等）是造成脱水的主要原因；2、多发性骨髓瘤的病人由于血清蛋白质合成增加，使血清总蛋白显著增加，可高达100g/L，其中主要为球蛋白。、血清总蛋白浓度降低沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP血清总蛋白双缩脲法测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-005版本：A/0页码： 24/ 204生效日期： 2012-10-01血清总蛋白(TP)双缩脲法测定1、蛋白质合成功能障碍：肝脏是合成白蛋白的唯一场所，肝脏严重损害时，如慢性肝炎、肝硬化、急性肝坏死、肝癌等，血清总蛋白含量降低；2、蛋白质摄入不足：食物中的蛋白质含量不足或慢性胃肠疾病所引起的吸收不良，常见于营养不良、妊娠后期、饥饿等；3、蛋白质消耗太多：常见于慢性消耗性疾病，如严重结核病、甲状腺机能亢进、恶性肿瘤、高热、外伤、糖尿病等；4、蛋白质丢失：严重大面积烧伤、大出血、肾病综合症等。十五、【参考文献】1. 临床化学常用项目自动分析发/韩志钧等主编.沈阳：辽宁科学技术出版社，2005.82. 临床检验自动化分析标准操作规程/陆永绥，李清华，张伟民主编。杭州：浙江大学出版社，2006.93. 临床检验管理与技术规程/陆永绥，张伟民主编。杭州：浙江大学出版社，2004.10沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP血清白蛋白溴甲酚绿法测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-006版本：A/0页码： 25/ 204生效日期： 2012-10-01血清白蛋白（ALB）溴甲酚绿法测定一、目的保证白蛋白测定的结果准确、可靠。二、修改程序本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任）。三、适用范围溴甲酚绿法测定白蛋白。四、试剂来源本标准操作程序适用于上海执诚生物科技股份有限公司生产的白蛋白测定试剂盒。五、溯源全国临床检验操作规程（第二版）。六、原理血清中的白蛋白与溴甲酚绿在pH4.2的条件下可以结合生成蓝绿色复合物，溶液亦由黄色变为绿色，且其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，通过在630nm处测定其吸光度可得出标本中白蛋白的含量。PH=4.2白蛋白 + 溴甲酚绿 - 绿色复合物七、试剂溴钾酚绿 0.25mmol/L缓冲液pH4.2 稳定剂和表面活性剂 不同批号试剂盒中各组份不能互换。本试剂2-25密闭避光保存可以稳定18个月(勿冷冻)，首次开启试剂后，避光保存于2-25防污染环境中，可继续使用到有效期止。避免强光直晒试剂！校准液： Randox 公司提供的系列校准品。八、标本采集沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP血清白蛋白溴甲酚绿法测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-006版本：A/0页码： 26/ 204生效日期： 2012-10-01血清白蛋白（ALB）溴甲酚绿法测定血清，肝素或EDTA 抗凝血浆。如在收集后4小时后方能分析样品，一定要在28密塞保存，在28可稳定2周，在-20冷冻稳定6个月。九、操作步骤1、标本编号，分离血清，按顺序置样品架上。2、按标本编号在全自动化生化仪器上输入标本的基本信息和测定要求，进行测定。3、仪器校准：将校准液置试管架上，输入校准液浓度，然后进行测定（测定参数与下同），其吸光度贮存在电脑中，浓度值符合校准值即可，一般每36个月校准一次。若更换不同批号的试剂、质控超标或仪器维修处理后应进行校准。4、测定参数：血清量 3l试剂量 340l主波长 628nm次波长 700nm反应类型 终点法:；正反应测定时间 10分钟温度 37报告单位 g/L5、结果计算： A样品A空白样品中白蛋白含量(g/L) = - 标准液浓度A标准A空白十、正常参考值3555g/L十一、室内质控质控方法：每天测定样品前做一组质控，在标本中间插一组质控，最后再做一组质控共三组。沭阳县仁慈医院检验科生化室SOP血清白蛋白溴甲酚绿法测定文件编号：SYXRCYYLAB-SH SOP-006版本：A/0页码： 27/ 204生效日期： 2012-10-01血清白蛋白（ALB）溴甲酚绿法测定控制限（X2SD）超过+2SD或-2SD均为失控，需寻找原因，另作处理。当校