离子色谱法检测α-甘油磷酸钠和β-甘油磷酸钠.doc

离子色谱法检测-甘油磷酸钠和-甘油磷酸钠曹青，魏巍，栾绍嵘*华东理工大学分析测试中心，上海，200237，摘 要：甘油磷酸钠根据磷酸根取代位置的不同分为-甘油磷酸钠和-甘油磷酸钠，由于二者性质相近，一般条件下很难分开检测。本实验采用Ionpac As11-HC离子色谱柱和NaOH梯度洗脱，用抑制电导检测器对这两种构型不同的甘油磷酸钠进行分析。其中-甘油磷酸根的保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为2.62%和0.73%，线性相关系数为0.9999，加标回收率范围为100.4107.9%；-甘油磷酸根的保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为2.14%和0.29%，线性相关系数为0.9999，加标回收率范围为100.8105.9%。采用该法对实际样品进行检测，结果真实可靠，令人满意。/Seputon.shtml关键词：离子色谱，梯度洗脱，-甘油磷酸根，-甘油磷酸根 甘油磷酸钠(GP)主要用于医药上作补药和辅助剂，对于再生障碍性贫血、神经衰弱、营养不良及病后恢复等有辅助治疗的作用。在甘油磷酸钠的反应制备过程中，由于磷酸的取代位置不同，生成-甘油磷酸钠和-甘油磷酸钠两种不同产物，其具体结构如图1。由于 和甘油磷酸钠的性质比较接近，常规检测方法都很难区分开，往往作为一种物质检测。对甘油磷酸钠的分析常用分光光度法1、电位滴定法2和离子色谱法3。由于甘油磷酸钠存在一个膦酸基团，是一个弱酸根，pKa 5.0，可以使用离子交换-抑制电导检测4，有文献报道采用离子色谱法对甘油磷酸钠药物中的主要成分及杂质阴离子进行检测，但将 和甘油磷酸钠都看做一种主要物质5。目前还没有文献对这两种不同结构的甘油磷酸钠进行过分离分析。 和甘油磷酸钠在某些特殊实验中的性质、作用不同，如在采用壳聚糖与甘油磷酸盐制备具有温敏性的配合物凝胶体系时，-甘油磷酸钠与-甘油磷酸钠的比例不同会影响凝胶体系的初始凝胶化温度6。所以亟待建立一种快速、准确、可靠的分析方法对 和甘油磷酸钠进行分离和检测。 1 实验部分 1.1 仪器及试剂 Dionex 600离子色谱仪（美国Dionex公司）；ED 50电化学检测器；DZS-1A抑制器（厦门大学，抑制电流60mA）；Chromeleon 6.4色谱工作站；Ionpac As11-HC分离柱（250mm4mm）；25L进样量。 /Enterprise.asp?action=search&ChkIndPort=2&SearchClass=Enterpris&textitle=离子色谱所有试剂均为分析纯。 和甘油磷酸钠标准品购自Sigma公司。溶液均用18.2M的二次去离子水配置。 1.2 标准溶液与样品制备 称取标准 和甘油磷酸钠各0.0249g于25mL容量瓶中，完全溶解后定容至刻度，摇匀，得到996mg/L的 和甘油磷酸钠贮备液待用。 称取待测的甘油磷酸钠固体样品0.0249g于25mL容量瓶中，完全溶解后定容至刻度，摇匀。将制备的样品稀释25倍进样。 2 结果与讨论 2.1 色谱条件的优化 本实验采用NaOH梯度洗脱的方法，有效地将甘油磷酸钠中的-和-甘油磷酸钠分离开来并测定各自的含量。经过反复实验比较，采用NaOH从高浓度到低浓度淋洗，保证有效分离的情况下缩短了分析时间，提高了工作效率。实验所选用的梯度条件见表1。 图2为-甘油磷酸钠和-甘油磷酸钠的标准离子色谱图，从图中可以看出，-甘油磷酸钠和-甘油磷酸钠峰形对称，分离效果好。 2.2 精密度、线性、检测限和稳定性试验 将996mg/L的 和甘油磷酸钠贮备液分别稀释到4.98mg/L，9.96 mg/L，19.92 mg/L和49.8 mg/L，得到一系列不同浓度的标准液，在上述离子色谱分析条件下测定，得到峰面积与浓度的标准曲线如图3，其线性方程及相关系数见表2。 在相同的离子色谱条件下，连续10次重复测定浓度为9.96 mg/L的标准品，分别得到-甘油磷酸钠和-甘油磷酸钠保留时间和峰面积的相对标准偏差，见表2。 2.3 样品测定和回收率测定 在上述色谱条件下，将稀释了25倍的样品溶液直接进样分析3次，得到样品中-甘油磷酸钠和-甘油磷酸钠的平均质量浓度，进行加标实验，得到其加标回收率范围分别为3 结论 甘油磷酸钠中的-甘油磷酸钠和-甘油磷酸钠由于结构相似，性质相近而难以区分，本实验采用Ionpac As11-HC离子色谱柱和NaOH梯度洗脱，用抑制电导检测器对其进行分析检测，不仅使-和-甘油磷酸钠有效分离，而且可以缩短分析时间，提高分析效率。该方法的基线平稳，峰形对称，重现性和线性关系良好，对甘油磷酸钠样品进行组分检测，回收率合理，分析结果真实可靠。 参考文献 1 冯大仁，何兴富，左承学等，分光光度法测定复方咖磷颗粒中甘油磷酸钠的含量J，华西药学杂志，2005，20(2)：161 2 中华人民共和国国家药典委员会，中国药典S二部，北京，化学工业出版社，2000，p87 3 施青红，陈永欣，叶明立，朱岩，离子色谱法测定牙膏中的甘油磷酸根含量J，离子交换与吸附，2005，21(2)：189-192 4 牟世芬，刘开录，离子色谱方法及应用M，北京，化学工业出版社，2000，p95-96 5 姚超英，离子色