7第五章第二节尿液蛋白质检查.ppt

尿液蛋白质检查 主讲王宝峰 健康人尿液中蛋白质含量很少 仅为30 130mg d 随意一次尿蛋白质为5 80mg L 尿液蛋白质定性为阴性 若尿液蛋白质定性为阳性 即为Proteinuria 根据蛋白质对肾小球的通过能力和分子量 人为地分为大 中 小分子量蛋白质 大分子量蛋白质 分子量 9万的蛋白质 含量极微 包括由肾髓袢升支及远曲小管上皮细胞分泌的T H糖蛋白及分泌型IgA等 中分子量蛋白质 分子量为4 9万 是以白蛋白为主的血浆蛋白 小分子量蛋白质 分子量 4万 容易通过肾小球滤过 原尿中约含2 4g d 绝大部分被肾小管重吸收 因此尿液中含量极少 如免疫球蛋白Fc片段 游离轻链 1 微球蛋白 2 微球蛋白 健康人尿中蛋白质以白蛋白为主 还有少量TH蛋白 分泌型IgA 1 微球蛋白 2 微球蛋白等 Glomerularproteinuria 白蛋白 2微球蛋白 2g 24h Tubluarproteinuria 2微球蛋白 溶菌酶 1g 24h Mixedproteinuria 2微球蛋白 白蛋白 Overflowproteinuria 血红蛋白 本周蛋白 肌红蛋白 Histicproteinuria 肾小管代谢产生的蛋白质 肾组织破坏分解的蛋白质 泌尿系统分泌的蛋白质 Accidentalproteinuria Functionalproteinuria posturalproteinuria 蛋白尿形成的原因和机制 尿液蛋白质的定性检验 加热乙酸法 加热可使蛋白质变性凝固 加酸使蛋白质接近等电点 促使蛋白沉淀 灵敏度为0 15g L 影响因素少 磺基水杨酸法 在略低于蛋白质等电点的pH条件下 蛋白质带有正电荷的氨基与带负电荷的磺基水杨酸根相结合 形成不溶性蛋白沉淀 灵敏度0 05 0 1g L 某些药物可以造成假阳性 干化学试带法 蛋白质与溴甲酚蓝 四溴酚蓝二酯结合 蛋白质离子吸引带相反电荷指示剂 形成复合物发生颜色改变 只与白蛋白反应 不与球蛋白反应 尿液蛋白质的定量检验 比浊法 磺基水杨酸三氯乙酸钨酸氯化苄甲乙氧胺氯化苯甲烃胺 双缩脲法 经典方法 通过加酸于尿液中使蛋白质沉淀而形成一定的浊度 碱性环境下 蛋白质与季胺盐结合形成不溶性沉淀 染料结合法 直接法 考马斯亮蓝G 250邻苯三酚红 染料和蛋白质结合时 其最大吸收峰发生漂移 沉淀法 丽春红S苯胺蓝 蛋白质与结合的染料在TCA的作用下共沉淀 然后碱性环境使沉淀复溶 测定吸光度 尿液蛋白质电泳 尿液标本 葡聚糖 聚乙烯吡咯烷酮 羧甲基纤维素 聚乙二醇 乙酸纤维膜电泳 琼脂或琼脂糖电泳 SDS PAGE电泳 胶体金 胶体银 考马斯亮蓝G 250染色 光密度计扫描 结果分析 尿液蛋白质检查的意义 生理性蛋白尿 体位性 功能性病理性蛋白尿 肾前性 肾性 肾后性蛋白尿的分类 轻度蛋白尿4g 24h 蛋白尿的选择性 蛋白尿的选择性是判断肾小球损伤严重程度的指标选择性蛋白尿非选择性蛋白尿选择性蛋白指数 SPI SPI 尿IgG 血清IgG 尿Alb 血清Alb SPI0 2选择性差 其他几种选择性蛋白指数 球蛋白 白蛋白 0 5非选择性蛋白尿 肾小球蛋白比 RGP SDS PAGE电泳RGP 分子量为6 6万 9 0万的蛋白质量 分子量超过15万的蛋白质量7选择性好 思考题 试分析比较急性肾小球肾炎和慢性肾盂肾炎患者的尿液特点 急性肾小球肾炎 肾小球性蛋白尿 白蛋白增多为主 约占70 8