衣原体检验立克次体检验支原体检验螺旋体及检验.ppt

支原体 概念 支原体是一类缺乏细胞壁 形态上呈高度多形性 可通过滤菌器 并能在无生命培养基中生长繁殖的最小的原核细胞型微生物 形态染色 无细胞壁 能通过滤菌器高度多形性革兰阴性 不易着色常用吉姆萨染色 呈淡紫色 培养特性 细胞膜含胆固醇营养要求高二分裂繁殖为主生长缓慢 荷包蛋 样菌落 生化反应 分解葡萄糖糖 生殖道支原体 肺炎支原体不分解葡萄糖 利用精氨酸 人型支原体 口腔支原体等 肺炎支原体 其顶端结构能黏附宿主上皮细胞从宿主细胞膜获取营养 并产生有毒代谢产物 或引起超敏反应 使细胞损伤多经呼吸道感染引起原发性非典型性肺炎 泌尿生殖道感染支原体 种类 人型支原体 生殖道支原体 溶脲脲原体传播途径 性传播垂直传播所致疾病 非淋病性尿道炎早产 流产 微生物学检查 分离培养 菌落特征 形态观察 生化反应冷凝集试验 检测冷凝集素PCR技术 采用基因扩增技术检测支原体的DNA 支原体与细菌的区别 立克次体 立克次体是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物 是引起斑疹伤寒 恙虫病 Q热的病原体 立克次体共同特点 大小介于细菌和病毒之间 革兰染色阴性 多呈球杆状专性细胞内寄生以节肢动物为传播媒介多引起人畜共患病对抗生素敏感 生物学特性 形态染色 球杆状 常用Giemsa染色 在感染的细胞中排列不规则培养方法 动物接种 鸡胚接种 细胞培养抗原构造 与变形杆菌OX菌株有共同抗原 用于外斐反应 致病性 致病物质内毒素 与细菌内毒素毒性作用相似磷脂酶A 溶解宿主细胞膜和溶酶体膜致病机制 侵犯小血管内皮细胞 节肢动物叮咬 侵犯小血管内皮细胞 第一次菌血症 侵犯全身小血管内皮细胞 第二次菌血症 高热头痛皮疹 所致疾病 普氏立克次体 所致疾病 流行性斑疹伤寒传染源 病人传播媒介 人虱传播方式 人虱 人虱 人 人 流行性斑疹伤寒传播方式 所致疾病 地方性斑疹伤寒传染源 鼠等传播媒介 鼠蚤传播方式 莫氏立克次体 鼠 鼠 鼠蚤 鼠蚤 人 地方性斑疹伤寒传播方式 鼠虱 免疫性 以细胞免疫为主病后免疫力牢固 微生物学检查 标本采集 血液分离培养 接种豚鼠血清学试验 外斐反应 衣原体 是一类能通过细菌滤器 严格的细胞内寄生 有独特发育周期的原核细胞型微生物 衣原体共同特征 革兰阴性 圆形或椭圆形有细胞壁有独特的发育周期 二分裂繁殖细胞内寄生对抗生素敏感种类 沙眼衣原体肺炎衣原体鹦鹉热衣原体 生物学特性 形态染色与发育周期 原体 感染型 始体 繁殖型 培养特性 专性细胞内寄生鸡胚卵黄囊接种 致病性与免疫性 致病物质内毒素 外膜蛋白所致疾病沙眼包涵体性结膜炎非淋病性泌尿生殖道感染性病淋巴肉芽肿呼吸道感染免疫性 病后免疫力不牢固 微生物学检查 直接镜检 结膜病灶刮片Giemsa染色 查包涵体免疫荧光染色查衣原体碘液分离培养鸡胚卵黄囊接种核酸检测 螺旋体 是一类细长 柔软 弯曲呈螺旋状 运动活泼的原核细胞型微生物 种类 钩端螺旋体疏螺旋体密螺旋体 特征 有细胞壁有DNA和RNA以二分裂方式繁殖对抗生素敏感 钩端螺旋体 引起钩端螺旋体病 生物学性状 形态染色细长 螺旋细密 两端弯曲如钩常用Fontana镀银染色 染成棕褐色运动活泼培养 适宜温度28 30 常用柯氏培养基 生长缓慢抵抗力 一般 对青霉素敏感 在水中存活时间长 致病性 致病物质 溶血素 细胞毒因子 内毒素样物质所致疾病 钩端螺旋体病 人畜共患疾病传染源 鼠类 猪传播途径 经粘膜或破损皮肤经胎盘传播 临床特征 钩体血症 眼红腿疼淋巴大 寒热酸痛一身乏 临床类型 流感伤寒型黄胆出血型肺出血型肾功衰竭型等 免疫性 病后对同型钩体有牢固免疫力以体液免疫抗感染为主 尿 血标本 镜检 分离培养 血清学鉴定 动物试验 检测核酸 微生物学检查 微生物学检查 血清学诊断检测特异性抗体 显微镜凝集溶解试验 酶联免疫吸附试验 防治原则 防鼠 灭鼠 加强对带菌家畜的管理流行地区易感人群接种疫苗治疗首选青霉素 梅毒螺旋体 是引起梅毒的病原体梅毒属性传播疾病 生物学性状 形态染色 两端尖直 螺旋细密规则 运动活泼培养特性 不易人工培养抗原性 特异性抗原 刺激机体产生特异性凝集抗体复合抗原 刺激机体产生梅毒反应素抵抗力 极弱 对青霉素 四环素等敏感 致病性 致病物质 荚膜样物质 粘多糖酶所致疾病 梅毒后天梅毒 经性接触传染临床分期一期梅毒 外生殖器硬性下疳二期梅毒 全身梅毒疹三期梅毒 皮肤粘膜溃疡 侵犯内脏器官或组织先天梅毒 经胎盘传给胎儿胎儿表现为流产 死胎出生后表现为锯齿形牙 鞍形鼻等 免疫性 以细胞免疫为主抗磷脂抗体 梅毒反应素 对机体无保护作用 仅供血清学试验 微生物学检查 硬性下疳 梅毒疹渗出液 镜检梅毒螺旋体 血清标本 非特异性试验 查梅毒反应素 特异性试验 测定梅毒螺旋体特异性抗体 防治原则 加强性卫生教育和严格社会管理 梅毒确诊后 宜用青霉素等药物及早予以彻底治疗 二期梅毒 二期梅毒 三期梅毒 梅毒螺旋体 钩端螺旋体 碘液染色 衣原体免疫荧光染色 原体 沙眼 独特的发育周期 外斐反应 变形杆菌OX菌株代替立克次体抗原进行交叉凝集反应 以检测患者血清中有无立克次体抗体 以协助某些立克次体病的诊断 外斐反应的交叉凝集 支原体与细菌L型的区别 支原体 荷包蛋 样菌落 支原体电镜图 恙虫病立克次体 所致疾病 恙虫病传染源 鼠等传播媒介 恙螨传播方式 恙虫病传播方式 鼠类 恙螨幼虫 卵 成虫 稚虫 卵 成虫 稚虫 第二代幼虫 人 病毒 病毒是个体微小 结构简单 只含一种核酸 在细胞内以复制方式进行增殖的非细胞型微生物 病毒特征 体积微小 能通过滤菌器 需用电子显微镜观察非细胞结构 无细胞结构 由蛋白质和核酸组成 核酸类型单一 只含一种核酸严格的细胞内寄生以复制方式增殖抵抗力特殊 耐冷不耐热 对抗生素不敏感 病毒的基本性状和分类 病毒的形态 结构和化学组成 病毒的大小与形态 病毒体 指完整的 成熟的具有感染性的病毒颗粒 病毒的测量单位 纳米 nm 病毒形态 球形 杆形 丝状 弹状 砖形蝌蚪形等研究病毒大小和形态的方法 电子显微镜超滤膜法超速离心法 病毒的结构与化学组成 病毒结构 基本结构 核衣壳 辅助结构 核心 衣壳 壳粒 衣壳 包膜 核心 只含一种核酸 DNA或RNA 分别称DNA病毒和RNA病毒 控制病毒的增殖 变异 毒力等性状除去病毒衣壳仍具有感染性的核酸称感染性核酸 化学成分为蛋白质构型 螺旋对称 20面体立体对称 复合对称具有保护核酸的作用具有抗原性 能刺激机体产生免疫应答通过与宿主细胞表面受体结合参与感染 衣壳 包膜 化学成分 类脂 多糖和蛋白质类脂 多糖来自宿主细胞蛋白质由病毒基因编码包膜蛋白形成刺突包膜蛋白的作用 具有抗原性参与病毒感染可引起机体发热 病毒的增殖 病毒的增殖周期 吸附 穿入 脱壳 生物合成 组装与释放 病毒的增殖周期 吸附 特异性吸附穿入 通过胞饮 融合 转位作用方式脱壳 生物合成 病毒mRNA的转录复制子代病毒核酸转译子代病毒蛋白组装与释放芽生释放 破胞释放 病毒增殖示意图 吸附 宿主细胞 穿入 脱壳 生物合成 组装 释放 病毒的异常增殖和干扰现象 病毒的异常增殖 顿挫感染 缺陷病毒病毒的干扰现象概念 两种病毒同时或先后感染同一宿主细胞 可发生一种病毒干扰另一种病毒增殖的现象 干扰机理诱导细胞产生干扰素 竞争干扰干扰类型 同种干扰 异种干扰 自身干扰实际意义 指导疫苗的合理使用 理化因素对病毒的影响 温度 病毒耐冷不耐热 应低温保存病毒辐射 破坏病毒核酸结构 导致病毒灭活脂溶剂 有包膜病毒对脂溶剂敏感消毒剂 可灭活病毒抗生素 病毒对抗生素不敏感 抗生素治疗病毒性疾病无效 病毒的变异 变异类型 毒力变异耐药性变异抗原性变异温度敏感性变异变异机制基因突变基因重组 病毒的分类 根据宿主不同分类动物病毒 植物病毒 昆虫病毒 细菌病毒根据核酸类型分类 DNA病毒 RNA病毒根据有无包膜分类 有包膜病毒 无包膜病毒临床分类呼吸道病毒 消化道病毒 肝炎病毒 虫媒病毒 出血热病毒 肿瘤病毒 亚病毒 类病毒 只有单股RNA 无蛋白质衣壳主要引起植物疾病朊粒只含具有感染性的蛋白质 分子量3 0 104 与老年性痴呆 多发性硬化症 脑组织海绵状淀粉样变 疯牛病 等有关 病毒的感染与免疫 病毒的感染方式 水平传播 通过黏膜表面 呼吸道 消化道 泌尿生殖道通过皮肤传播 媒介昆虫叮咬皮肤医源性传播 经输血 注射 拔牙 手术等垂直传播 经胎盘传播经产道传播 病毒感染的类型 隐性感染 成为病毒携带者 获得免疫显性感染 急性感染持续性感染慢性感染潜伏感染 慢发感染 病毒的致病机制 一 病毒对宿主细胞的直接作用影响细胞的生命力杀细胞感染非杀细胞感染细胞融合形成包涵体 有些病毒感染的细胞在普通光学显微镜下可观察到胞浆或胞核内出现圆形或卵圆形的斑块状结构细胞转化细胞凋亡 二 病毒感染的免疫病理损伤体液免疫损伤通过 型超敏反应引起损伤细胞免疫损伤通过Tc细胞和Th1细胞杀伤病毒感染的细胞 同时造成组织细胞损伤病毒直接损伤淋巴细胞或淋巴器官艾滋病毒直接杀伤CD4T细胞 抗病毒免疫 干扰素 干扰素概念 干扰素是个体出生后 由病毒或干扰素诱导剂刺激多种细胞所产生的一种糖蛋白 种类 型干扰素 干扰素 干扰素 型干扰素 干扰素 免疫干扰素 干扰素的产生及干扰素的作用机制干扰素的生物学活性 抗病毒 免疫调节 抗肿瘤 非特异性杀伤不受MHC限制通过依赖抗体的杀伤作用 ADCC 不依赖抗体的杀伤作用 自然杀伤 干扰素可调节NK细胞的杀伤作用 NK细胞 特异性免疫 体液免疫的保护作用中和抗体 阻止病毒吸附依赖抗体的细胞毒作用 ADCC 杀伤病毒寄生的细胞细胞免疫的保护作用TH1 释放细胞因子效应Tc CTL 特异性杀伤病毒寄生的细胞 微生物学检查 标本采集与送检 用于培养 注意时间 部位 处理 保存血清学诊断 双份血清标本检查方法 显微镜观察 电镜 光镜血清学 查病毒标记物 检测特异性抗体病毒基因检测 病毒的分离培养 组织细胞培养 将组织或细胞模拟体内的生理条件在试管或培养瓶内培养 使其生存或生长 称组织培养 组织培养方法 原代培养 如原代猴肾细胞等次代培养 二倍体细胞株 如人胚肺成纤维细胞传代株W1 38传代细胞系 多为肿瘤细胞或突变的二倍体细胞 如Hela细胞 Hep 2细胞等 鸡胚接种 鸡胚接种的优点鸡胚接种的缺点鸡胚接种部位 卵黄囊接种 尿囊腔接种 绒毛尿囊膜接种 动物接种 病毒的鉴定 初步鉴定 动物感染 根据病毒感染动物的表现初步判断鸡胚接种 根据接种部位不同 收获不同材料 进行观察细胞培养 细胞病变效应红细胞吸附干扰作用物理化学实验 病毒的鉴定 最后鉴定 中和试验已知抗体 待检病毒 细胞培养 观察有无细胞病变交叉保护试验病毒免疫动物 2周后 用标准动物作攻击试验不接种病毒的动物 2周后 用标准动物作攻击试验 病毒的血清学诊断 标本采集 早期和恢复期双份血清急性期单份血清IgM的测定双份血清的IgG的测定 常用方法中和试验补体结合试验血凝抑制试验免疫荧光试验酶免试验胶乳凝集试验间接血凝试验 特异性预防 人工主动免疫灭活疫苗减毒活疫苗亚单位疫苗基因工程疫苗人工被动免疫抗病毒免疫血清丙球 药物治疗 金刚烷胺 抑制病毒脱壳 预防感冒 病毒蛋白酶的抑制物 indinavir 核苷类药物 疱疹净 阿昔洛韦 抗病毒药物 特异性抗体治疗性疫苗 免疫制剂 其他 干扰素及干扰素诱生剂 中草药 抗病毒基因治疗 asODN asON 核酶 补体结合试验 抗原 抗体 补体 绵羊红细胞 溶血素 溶血 不溶血 病毒与抗体对应 病毒与抗体不对应 血凝试验和血凝抑制试验 血凝试验 血凝素 鸡红细胞 红细胞凝集血凝抑制试验 血凝素 抗体 鸡红细胞 红细胞不凝集 20面体立体对称 RNA Capsomere 壳粒 螺旋对称 病毒的分离培养 三大培养技术动物接种鸡胚接种细胞培养 细胞病变效应 CPE 病毒在细胞内增殖引起细胞形态学改变 干扰素的产生及作用机制 病毒结构示意图 核心 衣壳 包膜 无包膜