细菌的接种和注意事项终极版.ppt

细菌的接种及注意事项 灭菌接种环 1 要充分灭菌接种环 以免污染其标本 2 要适当冷却再取标本 以免带不出标本中的菌种 取标本 1 蘸取标本时应适量 以免标本太少漏检 2 液体标本 如尿液 应注意混匀 接种 1 细菌的接种方法有很多 如平板划线法 斜面接种法 穿刺接种法 等等 但我们用的最多的是 平板划线法 意义指把混杂在一起的微生物 用接种环在平板培养基表面 通过分区划线 稀释得到较多的独立分布的单个菌落 即将样本在固体培养基表面多次做由点到线稀释而达到分纯的目的 一区 所占区域大约是平板面积的1 5 1 4 二区 由一区向二区带出三四条平行线 三区 由二区引出三四次 但三区面积最大 CO2在细菌培养中的意义 1有些细菌在初次分离培养时 需要5 10 的CO2 因为细菌在生长过程中能够分解培养基中的某些含氮物质产生氮 对该菌有杀灭作用 而CO2能中和细菌产生的氮 以减少对细菌的毒性 如脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌 牛布鲁菌等 2 为细菌提供碳源 促进细菌的生长 如肺炎链球菌 草绿色链球菌 在细菌室的培养箱上有一个CO2的开关 为什么要用CO2呢 常见细菌的鉴别及其特点 阳性球菌 葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 金葡特点 是人类化脓性感染最常见的病原菌 可以引起局部感染 也可以引起全身感染 血浆凝固酶 阳性 血平板上呈黄色菌落 大而凸起 表面光滑 有 溶血环 G 阳性球菌 葡萄状排列 无芽孢 无荚膜 1 2 3 4 葡萄球菌 表面葡萄球菌 表葡特点 正常存在于人体皮肤 黏膜表面 多见于院内感染 如体内异物留置 静脉导管等血浆凝固酶 阴性表葡形态同金葡相似 但是为白色 扁平菌落 无溶血环 1 2 3 3 链球菌 常见的链球菌主要有化脓性链球菌 草绿色链球菌 肺炎链球菌 根据抗原结构不同可以把链球菌分为A B C D等二十个群 但对人类有致病性的大多数属于A群 少量属于B群 根据在血平板上溶血分为以下三种 甲型 型 溶血性链球菌 又称草绿色链球菌 菌落周围有草绿色溶血环 致病力弱 是条件致病菌 乙型 型 溶血性链球菌 产生强烈的溶血毒素 在血平板上可使菌落周围出现2 4mm的无色透明溶血环 丙型 r 链球菌 菌落周围无溶血环 又叫不溶血性链球菌 通常不致病 肺炎链球菌 菌落特点 在血平板上0 5 1 5mm 灰白色半透明 表面光滑 扁平 周围环绕草绿色溶血环 培养放置24h以上的菌落 还会因为产生自溶酶的作用 而致菌落中央塌陷而边缘隆起 呈脐窝状 肺炎链球菌 群 群的区分 pt试验 抑菌环 14 鉴定为肺链 杆菌肽试验 群 CAMP试验 B群 Opt实验 杆菌肽实验 11 葡萄球菌与链球菌的鉴别 1 涂片 涂片革兰染色 葡萄球菌呈葡萄串样 链球菌呈链状 2 M H试验 当染片不能区别时 接种到M H平板 长成菌落之后 可挑单个菌落做触酶试验 是葡萄球菌 是链球菌 肠球菌 肠球菌属特点 成圆球形或椭圆形 单个 成对 或短链 均可 在血平板上可形成灰白色不透明表面光滑 0 5 1 0mm大小的菌落 可有溶血现象 以粪肠球菌和屎肠球菌为常见 阿拉伯糖山梨醇屎肠球菌阳性阴性粪肠球菌阴性阳性 阴性杆菌 大肠杆菌 G 杆菌 有鞭毛 菌毛 无芽胞 菌落2 3mm 圆形凸起 灰白湿润 光滑半透明 边缘整齐 某些菌落可产生有透明溶血环 鲍曼不动杆菌 菌落特点 圆形 凸起光滑 边缘整齐不透明 灰白色有粘性的菌落多数菌落不溶血在中国兰上为粉红色菌落 菌落特点 较大菌落 凸起 灰白色黏液型 相邻菌落容易发生融合可挑出长丝状细丝 肺炎克雷伯杆菌 变形杆菌 迁徙生长 菌落特点 G 两边钝圆 有明显的多形性 呈球形或丝状 无芽胞无荚膜 有鞭毛 运动活泼 普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株呈迁徙扩散生长 迅速弥漫 波纹状薄膜布满整个培养基表面 嗜麦芽假单胞菌 菌落特点 G 杆菌 细长略弯曲 不透明 灰黄色菌落 在血平板上可产生氨味 本菌氧化酶阴性 与大多数假单胞菌不同 在普通琼脂培养基上能产生水溶性绿色素 使整个培养基变为绿色菌落灰绿色 半透明 大而扁平 表面湿润 边缘不齐 有金属光泽 有生姜样芳香气味 菌落周围有宽大的兰绿色透明溶血环 铜绿假单胞菌 铜绿假单胞菌 流感嗜血杆菌 副流感嗜血杆菌 在巧克力平板上生长