透析液细菌内毒素检查ppt课件

2020年2月28日 博康www zj 1 细菌内毒素限量检查讲义 透析用水 透析液讲解董光宴1 试验条件必备2 标准要求3 供试品溶液的制备4 限量检查湛江博康海洋生物有限公司 2020年2月28日 博康www zj 2 一 试验条件必备1 经过培训合格的实验人员 2 实验室条件 3 必备的实验材料 2020年2月28日 博康www zj 3 3必备的实验材料3 1必备材料 鲎试剂盒 具有国家批准文号 并依法检验合格 如 湛江博康海洋生物有限公司 卫药准字 88 SJ 04 2020年2月28日 博康www zj 4 组成成份 每盒试剂组成 每盒试剂配套试验耗材 无热原试管5ml 6支 无热原试管2ml 6支 无热原吸嘴0 25ml 15支 2020年2月28日 博康www zj 5 实验室要求洁净 无尘埃流通 室内温度要求20 25 为宜 必要时应在超净工作台操作 2020年2月28日 博康www zj 6 恒温箱 旋涡振荡器 其它器具 消毒棉球 剪刀和封口膜等 2020年2月28日 博康www zj 7 3 2取样取样器具必须符合2010年版 中国药品检验标准操作规范 310页 细菌内毒素检查法 3实验准备 规定 无外源性内毒素 必要时可以用真空采血管 无添加剂 取样 2020年2月28日 博康www zj 8 二 复用设备及用水要求 血液透析器复用操作规范 5 1 2水质要求 应定期检测复用用水细菌和内毒素的污染程度 应在血液透析器与复用系统连接处或尽可能接近此处进行水质检测 内毒素含量不得超过2EU ml 干预限度为1EU ml 当达到干预限度时 继续使用水处理系统是可以接受的 但应采取措施 防止系统污染进一步加重 2020年2月28日 博康www zj 9 5复用设备及用水要求5 1 3水质细菌学 内毒素检测时间 最初应每周检测1次 连续2次检测结果符合要求后 细菌学检测应每月1次 内毒素检测应每3个月至少1次 2020年2月28日 博康www zj 10 三 供试品溶液的制备透析用水需进行稀释 一般要求供试品溶液的PH值在6 0 8 0的范围内 对于透析液 需调节PH值 可使用酸性调节剂调节PH值 2020年2月28日 博康www zj 11 四限量检查透析用水 透析液已有内毒素检验标准 可直接进行内毒素检查 2020年2月28日 12 博康www zj 1 试剂和样品鲎试剂盒 生产单位 湛江博康海洋生物有限公司 灵敏度 0 125EU ml 细菌内毒素检查用水细菌内毒素工作标准品 10EU 透析用水 2020年2月28日 13 博康www zj 2 限值的确定内毒素限值L 1 0EU ml 2020年2月28日 博康www zj 14 3 计算稀释倍数MVD L 1 0EU ml 0 125EU ml 8倍 2020年2月28日 博康www zj 15 4 操作方法 2020年2月28日 博康www zj 16 透析用水 8倍稀释液 0 2ml 图示 4 1供试品溶液的制备 1 4ml 2020年2月28日 博康www zj 17 4 2阳性对照检验鲎试剂活性及试验有效性 4 3阴性对照检验试验操作及环境是否对试验有污染 0 25EU ml 2020年2月28日 博康www zj 18 补充 内毒素标准品的正确开启方法 取细菌内毒素工作标准品一支 轻弹瓶壁 使粉末落入瓶底 然后用砂轮在瓶颈上部轻轻划痕 用75 酒精棉球擦拭后启开 启开过程应防止玻璃屑落入瓶内 正确 易折点 错误 2020年2月28日 博康www zj 19 注意 1 只能在安瓿的易折点上部开启内毒素 不能沿易折点开启 防止振荡过程中内毒素粘在封口膜上 2 只能取1ml的细菌内毒素检查用水复溶细菌内毒素工作标准品 2020年2月28日 博康www zj 20 0 25EU ml 0 2ml 0 2ml 1 8ml 0 6ml 图示 1EU ml 10EU ml 2020年2月28日 博康www zj 21 4 4供试品阳性对照目的是为了验证透析用水中有内毒素可以被检测出来 0 25EU ml 8倍 2020年2月28日 博康www zj 22 5鲎试剂的准备取规格为0 1ml 支的鲎试剂8支 放在试管架上 排成4列 每列2支 轻弹瓶壁使粉末落入瓶底 用75 酒精棉球擦拭后启开备用 防止玻璃屑落入瓶内 每支加入0 1ml检查用水溶解 轻轻转动瓶壁 使内容物充分溶解 2020年2月28日 博康www zj 23 6加样其中2支加入0 1ml的0 25EU ml的内毒素标准溶液作为阳性对照 2支加入0 1ml的透析用水8倍稀释液作为供试品管 2支加入0 1ml的透析用水8倍稀释液和0 1ml的0 25EU ml的内毒素标准溶液作为供试品阳性对照 2支加入0 2ml的检查用水作为阴性对照 2020年2月28日 博康www zj 24 加样结束后 将鲎试剂用医用胶布封口 轻轻振动混匀 连同试管架放入37 水浴或适宜恒温器中 试管架保持水平状态 保温60分钟 2020年2月28日 博康www zj 25 7结果判断保温60分钟 2分钟后观察结果 若阴性对照溶液D的平行管均为阴性 供试品阳性对照溶液B的平行管均为阳性 阳性对照溶液C的平行管均为阳性 试验有效 2020年2月28日 博康www zj 26 若溶液A的两个平行管均为阴性 判供试品符合规定 若溶液A的两个平行管均为阳性 判供试品不符合规定 若溶液A的两个平行管中的一管为阳性 另一管为阴性 需进行复试 复试时 溶液A需做4支平行管 若所有平行管均为阴性 判供试品符合规定 否则判供试品不符合规定 2020年2月28日 博康www zj 27 8结果记录 2020年2月28日