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选修一 生物技术实践基础课时案39微生物的培养和利用考点一微生物的实验室培养1(2014苏、锡、常、镇调研,32)微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节。下图甲、乙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作和实验结果示意图,请据图回答有关问题:(1)上图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一,它称为_,若用该培养基培养大肠杆菌,除考虑营养条件外,还要考虑_、_和渗透压等条件。(2)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。(3)上图乙是平板划线法接种操作示意图,正确的操作顺序是ab_(用字母和箭头表示);找出图乙中两处错误的操作_、_(用字母表示)。解析(1)上图甲所示的实验操作步骤之一为倒平板,若用该培养基培养大肠杆菌,还要考虑温度、氧气、ph和无菌操作等一系列相关条件。(2)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染,因此要设置对照实验,对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生,若有则说明培养基已被污染,应重新配制培养基进行实验。(3)上图乙是平板划线法接种操作示意图,正确的操作顺序是abgfecdh;图乙中两处错误的操作是c未在酒精灯火焰旁进行操作,d将第五区域内的划线与第一区相连。答案(1)倒平板温度(氧气)ph(无菌)(2)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生(3)gfecdhcd2为了从泡菜汁中筛选分离出发酵产酸速度快、亚硝酸盐降解能力强的乳酸菌,科研人员做了如下实验。请回答问题:(1)在无菌操作下,使用无菌水对泡菜汁进行_,将不同稀释度的泡菜汁涂布于添加了caco3的乳酸菌培养基(mrs培养基)平板上。在适宜条件下培养后,挑取有_的菌落,继续在mrs平板上用_法分离,得到单菌落。(2)取分离到的乳酸菌分别接种到mrs液体培养基中,间隔取样测定ph,目的是筛选出_的乳酸菌。(3)取上一步筛选出的乳酸菌接种到含有nano2的mrs培养基中,培养一段时间后,用_法测定nano2的含量,筛选出_的菌株。解析筛选分离出的菌种需要满足两个条件:发酵产酸速度快,亚硝酸盐降解能力强。先筛选分离出产酸速度快的乳酸菌,再从产酸速度快的乳酸菌中筛选分离出亚硝酸盐降解能力强的乳酸菌。产酸速度快的乳酸菌在含有caco3的选择培养基上可较快形成透明圈。测定nano2的含量通常用比色法。答案(1)梯度稀释透明圈划线(2)产酸速度较快(3)比色亚硝酸盐降解能力强3(2014河北衡水中学二模,39)请回答下列相关问题。(1)在腐乳的制作时,用来腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干净后要用_消毒;在提取植物细胞的dna时,需要先用洗涤剂溶解_。(2)葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮红素和大量葡萄风味物质等,这些物质易溶于乙醇、乙酸乙酯中,因此常采用_法来分离提取,还可以用_和_等提取植物芳香油的方法。(3)为了检测某致病菌对于抗生素的敏感性,取该单菌落适当稀释,接种于固体培养基表面,在37 培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板。将分别含有a、b、c三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含a的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素a_(填“敏感”或“不敏感”);含b的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素b_(填“敏感”或“不敏感”);含c滤纸片周围的透明圈比含a的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是_。(4)用来判断某选择培养基是否起到了选择分解纤维素的细菌的作用,要设置的对照是()a未接种的选择培养基b未接种的牛肉膏蛋白胨培养基c接种了的牛肉膏蛋白胨培养基d接种了的选择培养基解析(1)在制作腐乳时,用来腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干净后要用沸水消毒;在提取植物细胞的dna时,需要先用洗涤剂溶解细胞膜。(2)提取植物芳香油的最常用方法有萃取法、蒸馏法和压榨法。(3)若含抗生素的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对相应抗生素敏感,若含抗生素的滤纸片周围没有透明圈出现说明该致病菌对此抗生素不敏感。(4)将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于在选择培养基上生长的菌落数目,因此,牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照,用来判断选择培养基是否起到了选择作用。答案(1)沸水细胞膜(2)萃取蒸馏压榨(3)敏感不敏感抗生素c的耐药菌(4)c4(2015陕西长安五校联考)研究者初步筛选到能合成纤维素酶的菌株mc1,回答以下问题。(1)为了获得能合成纤维素酶的单菌落,可采用_法将初筛菌液接种在固体培养基上,这种培养基属于_培养基。(2)关于制备固体培养基的叙述,错误的是_。a制备固体培养基时可以加入琼脂b操作的顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌c待培养基冷却至50 左右时进行倒平板d待平板冷却凝固约510 min后将平板倒过来放置(3)实验过程中如何防止其他微生物的污染?_。(4)下表的培养液ph均为4.8,若对mc1中纤维素酶的活力进行测定,则不能选择表中的_培养液。(多选)(5)分离获得了具有较高纤维素酶活性的菌株mc1,为了在此基础上获得纤维素酶活性更高的菌株,最可行的做法是_。(6)某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_指示剂培养几种菌后,指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的菌株;若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入_染料,培养后,培养基中出现透明圈,就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。答案(1)划线/涂布选择(2)b(3)培养基灭菌、接种过程无菌操作(4)a、b、c(5)人工诱变(紫外线照射等)处理菌株,再进行筛选(6)酚红刚果红5回答下列有关微生物培养与运用的问题。kh2po41.4 gna2hpo42.1 gmgso47h2o0.2 gfecl30.1 gx1 g维生素微量琼脂15 g(1)上表是筛选异养型细菌的培养基配方。从物理性质上看该培养基属于_培养基,其中成分x除了为目的菌提供能源,还能提供_。制备该培养基的一般操作顺序是计算称量_灭菌_。对培养基进行灭菌的常用方法是_。(2)如图a、b是纯化微生物培养的两种接种方法,c、d是接种后培养的效果。某同学接种培养后获得图c所示效果,则其采用的接种方法是_(选填“a”“b”);接种时可能的失误操作是_。(3)微生物强化采油是利用某些微生物能降解石油、增大石油的乳化度、降低石油黏度的原理,通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。为筛选和纯化该类微生物,应向培养基中添加_作为唯一碳源;培养一段时间后在培养基上形成降油圈,此时选取_就可获得高效菌株。解析(1)表中培养基的成分有凝固剂琼脂,因此该培养基为固体培养基。培养基除应含有水、无机盐、特殊营养物质(维生素等)外,还应有碳源和氮源。制备固体培养基的一般顺序是计算称量溶化灭菌倒平板。(2)图a运用接种环,为平板划线法,相应培养效果如图d所示;图b运用涂布器,为稀释涂布

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