离体肠段平滑肌的生理特性.doc

实验六 离体肠段平滑肌的生理特性【原理】哺乳动物消化管平滑肌具有肌组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。但是消化道平滑肌肉有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。将离体组织器官至于模拟体内环境的溶液中，可以在一定时间内保持其功能。本实验以台氏液作灌流液，在体外观察及记录家兔离体肠段的一般生理特性。 取离体兔肠段置于台氏液中，用计算机采集系统扫描其收缩曲线，假如肾上腺素、乙酰胆碱、阿托品等不同的化学药物，观察他们对于离体肠段收缩的影响。通过这种观察，学习离体肠段平滑肌的实验方法，分析消化馆平滑肌组织的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。【实验步骤与结果】1如右图装好实验装置，麦氏浴槽外的水浴温度为37，浴槽内调温至370.5.2制备离体兔肠段用立掌(或木槌)猛击兔后头延髓部，致其昏迷后立即剖开腹腔，找到胃幽门与十二指肠交界处。在十二指肠起始端扎一线，剪取十二指肠、空肠，放入冷台氏液内。先用20m1注射器冲洗肠内容物，冲洗干净后剪成若干约15cm长的小肠段(每一实验小组一段)。在其两端结扎，一端做一短线环固定在通气的L管下方或浴皿内，另一端扎线与张力传感器相连。将肠段完全浸浴在调好温度的麦氏浴槽中，并调整好台氏液充气量(小气泡接连不断)。游离及取出肠段时，动作要快，取兔肠及兔肠穿线时，尽可能不用金属及手指触及。为保持离体肠段的活性，可先预冷充氧的营养液，游离肠段及穿线在预冷的营养液中进行。实验中始终要通气。3开启计算机采集系统，接通与张力传感器相连的通道。固定L管并调节扎线与张力传感器，使肠段运动自如又能牵动传感器(注意：扎线不可贴壁或过紧过松)。调节增益与扫描速度，使肠段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。4实验观察(1)记录对照肠段运动曲线后，加入2滴肾上腺素(1：10 000)，观察并记录曲线变化。(2)记录对照肠段运动曲线后加入12滴乙酰胆碱(1：10 000)，观察并记录曲线变化。(3)记录对照肠段运动曲线后加入3滴阿脱品后立即加入与(5)同样剂量的乙酰胆碱，记录并观察曲线变化。同(2)比较曲线有何不同。(4)记录对照肠段运动曲线后，加入28台氏液，并记录曲线变化，同时观察肠段紧张度变化。同法，当出现明显变化后，立即用新鲜37台氏液冲洗，待恢复正常。(5)同法加入45台氏液并记录曲线变化，同时观察肠段紧张度变化。当出现明显变化后，立即用新鲜37台氏液冲洗并待恢复。(6)记录对照肠段运动曲线后，停止供气1分钟并记录曲线变化，同时观察肠段紧张度变化。当出现明显变化后，立即恢复供气。用新鲜37台氏液冲洗，待恢复正常(注意作好标记)。【讨论】1 消化道平滑肌具有肌组织的一般特性，如兴奋性和收缩性，同时又有自己的特点，如和骨骼肌相比，消化道平滑肌的兴奋性较低，收缩速度较慢，但伸展性大。消化道平滑肌对电刺激不敏感，而对机械牵张，温度变化和化学刺激敏感。许多部位的消化道平滑肌有自发节律性运动，但频率慢且节律不稳定。 与骨骼肌相比较，消化道平滑肌的收缩速度为骨骼肌的1/41/20。这是因为平滑肌纤维彼此紧靠，在平滑肌收缩和舒张时，可以相互牵拉，以维持较长时间的张力。也就是可以产生紧张性收缩，从而对消化道内容物保持稳定的压力。另一方面，消化道平滑肌的伸缩能力也比骨骼肌大得多。它可以展长于本身长度的四倍，这对于改变消化道的口径有很大意义。消化道平滑肌钙泵作用较骨骼肌慢，故平滑肌收缩持续时间较骨骼肌长得多，其持续时间长以秒来计算。2 在台氏液中加入肾上腺素，肠段的收缩明显变缓，幅度变小。也就是说，肾上腺素抑制了肠段的收缩。而加入乙酰胆碱后，肠段的收缩幅度明显变大，即乙酰胆碱促进了肠段的收缩。然而在加入阿托品后立即加入同样剂量的乙酰胆碱，肠段的收缩不再被促进，这说明阿托品是乙酰胆碱的抑制剂，但是只加入乙酰胆碱不会减弱平滑肌的收缩。其主要的作用机理是：乙酰胆碱与肠道的平滑肌细胞上的特殊位点结合，促进钙离子在肌浆网中的传递，从而增强平滑肌的收缩；当加入阿脱品后，阿脱品与平滑肌细胞上的乙酰胆碱结合位点结合，竞争性阻碍了乙酰胆碱与平滑肌细胞的结合，从而抑制了乙酰胆碱的作用，但只加如阿脱品时对平滑肌的收缩没有影响。 肠的平滑肌有神经调节的作用。小肠平滑肌的肌间神经丛中主要有两类神经元。 一类神经元含血管活性肠肽、腺苷酸环化酶激活肽、一氧化氮合成酶等，它们可以使中间神经元或抑制性运动神经元；另一类神经元含乙酰胆碱、速激肽、P物质等，它们可以使中间神经元或兴奋性运动神经元。这些神经元通过他们末梢释放的递质，调节小肠平滑肌的活动。故加入乙酰胆碱，实际上是通过其对于神经元的作用来调节肠段的运动，加快加剧肠段的收缩。 肠段的活动还受到体液因素的作用。肾上腺素就是动物体内所固有的一种体液，它与胰高血糖素、促胰液素等的作用一样，都是对肠段的活动进行抑制。3 温度对于肠段的运动也有影响。当将体外环境温度改变至