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高二生物 SW-16-XX01-005专题二 课题1 微生物的实验室培养导学案(二)编写人:张勇 审核人:肖鸿 编写时间: 2016-02-26班级: 组别: 姓名: 等级:_【学习目标】掌握无菌技术的操作过程及分析与评价;【学法指导】1、认真阅读学习目标,牢牢把握学习要求。导学案完成后一定要再回头看学习目标,检测自已是否能达成学习目标。导学案的落实在课堂,而不是在课后,在预习课和展示课中都要进行知识的落实。2、预习时注意分析图提拱的信息,一定要结合课本中的图来记,做到心中有图。3、将预习中遇到的疑难点问题标识出来以备课堂小组计论、突破。【知识探究】:实验操作 - 大肠杆菌的纯化培养:本实验所用的培养基是 ,本实验可分成 和 两个阶段进行。一、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是 、 、 、 、 。思考5在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中,动作要迅速,原因是什么?溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么?思考6牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质?2 倒平板:待培养基冷却至 左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是:在火焰旁右手拿 ,左手 ;使锥形瓶的瓶口 ;左手将培养皿 ,右手 ,立刻盖上皿盖。待平板冷却凝固后,将平板 。思考7锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么?思考8倒平板的目的是什么?思考9若皿盖和皿底之间粘有培养基,则该平板能否培养微生物?为什么?思考10配制斜面培养基作用是什么?试管为什么要加塞棉塞? 二、纯化大肠杆菌 微生物接种:最常用的是 法和 法。另外还有穿刺接种和斜面接种等。1平板划线法是 的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。其操作步骤是:将 在酒精灯火焰上灼烧直至 。在酒精灯火焰旁冷却接种环,并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。将菌种试管口通过火焰达到 的目的。将冷却的接种环伸入到 。将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。将皿盖打开一条缝隙,把接种环 ,盖上皿盖,不要划破培养基。灼烧接种环,冷却后从 划线。重复上述过程,完成三、四、五区域内划线。注意不要将 相连。将平板 培养。思考11取菌种前灼烧接种环的目的是什么? 为什么除第一次划线外,其余划线前都要灼烧接种环? 取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行,其目的是?最后灼烧接种环的目的是? 。在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是? 。2稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将_进行培养。当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的标准菌落。3.系列稀释操作:取盛有 mL水的无菌试管6支 ,编号101、102、103、104、105、106。用灼烧冷却的移液管吸取 mL菌液注入编号为101试管中,并吹打3次使之混匀。从101倍稀释液中吸取 mL菌液注入到编号为102 倍稀释液试管内吹打均匀,获得102倍液。依此类推。思考12系列稀释操作的注意事项是什么?思考13涂布平板操作的步骤是什么?结果分析与评价1培养未接种培养基的作用是什么?,若有菌落形成,说明什么?2在琼脂固体培养基上,大肠杆菌菌落颜色?形态?3培养12h和24h后的菌落大小?
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