药品质量标准研究技术、方法与程序--刘荣华.ppt

药品质量标准研究技术 方法与程序 TheTechnique MethodandProcedureoftheStudyontheQualityStandardofMedicine 刘荣华 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室KeyLaboratoryofModernPreparationofTCM JiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicine MinistryofEducation 2 中国药典沿革 一 中华人民共和国药典 3 第一版 中国药典 1953年版 收载药品531种 化学药215种 植物药与油脂类65种 动物药13种 抗生素2种 生物制品25种 各类制剂211种 1957年出版 中国药典 1953年版第一增补本 4 第二版 中国药典 1963年版 中医常用的中药材446种 中药成方制剂197种 化学药品667种 共收载药品1310种 一部 二部 5 第三版 中国药典 1977年版 共收载药品1925种 中草药材 包括少数民族药材 中草药提取物 植物油脂以及一些单味药材制剂等882种 成方制剂 包括少数民族药成方 270种 一部收载1152种 二部收载化学药品 生物制品等773种 6 第四版 中国药典 1985年版 共收载药品1489种 中药材 植物油脂及单味制剂506种 中药成方207种 一部收载713种 二部收载化学药品 生物制品等776种 1985年7月1日 中华人民共和国药品管理法 正式执行 该法规定 药品必须符合国家药品标准或者省 自治区 直辖市药品标准 7 1987年11月出版 中国药典 1985年版增补本 新增品种23种 修订品种172种 附录21项 1988年10月 第一部英文版 中国药典 1985年版正式出版 第四版 中国药典 1985年版 8 第五版 中国药典 1990年版 共收载品种1751种 一部收载784种 中药材 植物油脂等509种 中药成方及单味制剂275种 二部收载化学药品 生物制品等967种 与1985年版药典收载品种相比 一部新增80种 二部新增213种 含1985年版药典一部移入5种 删去25种 一部3种 二部22种 对药品名称 根据实际情况作了适当修订 中国药典 1990年版英文版于1993年7月出版发行 9 第六版 中国药典 1995年版 收载品种共计2375种 一部收载920种 二部收载1455种 包括化学药 抗生素 生化药 放射性药品 生物制品及辅料等 中药材 植物油脂等522种 中药成方及单味制剂398种 一部新增品种142种 二部新增品种499种 二部药品外文名称改用英文名 取消拉丁名 中文名称只收载药品法定通用名称 不再列副名 1997年完成了 中国药典 1995年版英文版 10 第七版 中国药典 2000年版 共收载药品2691种 中国药典 2000年版英文版与中文版同步出版 一部收载992种 二部收载1699种 11 第八版 中国药典 2005年版 共收载3214种 其中新增525种 一部收载1146种 二部收载1967种 新增154种 修订453种 新增327种 修订522种 三部收载101种 源于 中国生物制品规程 新增44种 修订57种 2005年完成了 中国药典 2005年版英文版 12 二 中药质量标淮的研究 国家药典 以下简称药典 卫生部标推 以下简称部颁标准 省 市 自治区药品标准 以下简称地方标准 1985年药品管理法正式颁布执行 规定以下三级标准为药品生产必须遵循的法定依据 13 临床研究用质量标准 保证临床研究试验药品的质量稳定 生产用质量标准 保证上市药品的质量稳定 目前我国新药的研制 在 新药审批办法 中明确要求 在新药取得批准文号后 其它研究资料如药效 毒理 临床研究资料均已完成历史使命 可存档备用 唯有质量标准需伴随产品 终身 只要有药品生产 销售 使用 就要有质量标准的监测和保证 因此 质量标准的制定 不仅在研制新药中 而且对老药再评价均具有相当重要的地位 14 一 药品标准的定义与要求 定义 药品标准是国家对药品质量及检验方法所作的技术规定 是药品生产 经营 使用 检验和监督管理部门共同遵循的法定依据 制定药品标准 必须坚持质量第一 充分体现 安全有效 技术先进 经济合理原则 择优发展的作用 凡正式批准生产的药品 包括中药材饮片及其制剂 敷料和基质都要制定标准 要求 15 二 质量标准的分类 法定标准 经过卫生部与省 市 自治区卫生行政部门批准的标准有国家标准 包括药典和部颁标准 及地方标准 卫生部正在对成药的地方标准经过有计划的整顿提高 逐步纳入国家标准 目前已有1600种中成药已分别收载于部颁标准之中 新药被批准后其生产用质量标准再经过二年试行期即直接转为部颁标准 企业标准 一般有两种情况 一种为检验方法尚不够成熟 但能达到某种程度的质量控制 一种为高于法定标准要求 主要指多增加了检测项目或提高了限度标准 作为创优 企业竞争 特别是对保护优质产品本身 严防假冒等均为重要措施 国外较大的企业均有企业标准 对外保密 16 三 质量标准的特性 药品应具安全性 有效性 稳定性及可控性 而质量标准在保证药品上述性质的同时 其本身又具有如下特性 权威性 药品必须符合国家药品标准或省市自治区药品标准 但可以采用非药典方法进行检验 但需要仲裁时 只有各级法定标准 特别是国家药典具有权威性 现行 科学性 方法 针对性 含量限定性 方法的确定与规格的制订均应有充分的科学依据 进展性 质量标准是对客观事物认识的阶段小结 既使法定标准也难免有不够全面之处 随着生产技术水平提高和测试手段的改进 应对药品标准不断进行修订和完善 如 比色法 薄层扫描 HPLC 17 注 在申报新药中要求的临床研究用质量标准 生产用质量标准以及在标准试行二年转为部颁标准的过程中均可不断补充完善 指标专属性可以加强 检验方法考查更加完善 内在质量评价要求更加严谨 限度制定更为合理 但处方 原料和工艺绝不允许更动 三 质量标准的特性 18 四 质量标准制定的前提 三个先决条件 原料稳定 药材除药用部位 产地 采收和加工涉及质量优劣外 特别要注意的是药材的真伪与地区习惯用药的鉴别与应用 处方组成固定 工艺稳定 新药的研制在处方确定以后 结合临床服用要求 确定剂型 进行工艺条件的研究 优选出最佳工艺条件 至少是适合中试生产规模 条件具备后 才可进行质量标准的实验设计 19 不同干燥方法对复方何首乌制剂成分的影响 20 五 质量标准的内容 2005版药典一部 中药及中成药质量标准内容 品名 包括中文名称 汉语拼音 拉丁名 来源 处方 制法 性状 鉴别 检查 浸出物 含量测定 炮制 性味与归经 功能与主治 用法与用量 注意 规格 贮藏 制剂等 21 中成药质量标准研究 要求明确 简短 科学 不容易混淆 误解 夸大 一 名称 1 单味制剂 含提取物 一般采用原料 药材 名与剂型名结合 如穿心莲片 绞股蓝皂甙片等 2 复方制剂 1 方内主要药味缩写加剂型 如葛根芩连微丸 复方银连颗粒 银黄口服液 2 方中主要药味缩写加功效加剂型 如银翘解毒冲剂 参附强心丸 桂龙咳喘宁胶囊 3 药味数与主要药名或功效加剂型 如十全大补口服液 六味地黄丸 4 功效加剂型 如妇炎康复片 通脉冲剂 胃乃安胶囊 镇脑宁胶囊 5 君药前加复方 后加剂型 如复方天仙胶囊 复方丹参注射液 22 二 处方 中成药质量标准研究 净药材或饮片处方 如天麻丸 天麻60g羌活100g独活50g杜仲 制 50g牛膝60g荜薢60g附子 制 10g当归100g地黄160g玄参60g 粗提物处方 如复方川贝精片 麻黄膏适量 桔梗75g 半夏 制 60g 川贝母20g 远志42 8g 五味子42 8g 陈皮75g 甘草膏12g 有效部位 组分 如总黄酮 总皂甙 挥发油等处方 如北豆根片 北豆根总碱150g 淀粉1000g 硬脂酸镁100g 以化学成分单体处方 如穿心莲内酯片 穿心莲内酯500g 微晶纤维京125g 淀粉30g二氧化硅20g 滑石粉15g 硬脂酸镁10g 23 处方要求 1 处方药味若属国家药品标准收载品种 名称均应与其一致 如淫羊藿不应称仙灵脾 金银花不应称双花 黄芪不应称北芪等 国家药品标准未收载的药材品种 可采用地方标准收载的名称 地方药品标准收载的品种与国家药品标准名称相同 来源不同的应另起名称2 处方药味排列顺序 应根据处方原则 按君 臣 佐 使排列 或主药 辅药排列 3 处方中有需要炮制的药味 应加括号注明 如蜜黄芪 应为黄芪 密制 4 处方中药味均用法定计量单位 重量以 g 容量以 m1 表示 处方量多根据剂型不同 如片剂折算成出1000片的药量 液体制剂如糖浆以出1000m1的药量写出 以求按药典标准规范化要求 24 5 处方原料均应附标准 药材标准 包括其基源名称及科 属 种拉丁学名 确实的主要产地 药用部位等均应反映原料的实际情况 并说明属何级法定标准 药典 部颁 地方标准 收载者 如原料为地方标准 则应提供标准全文复印件 如原料在各级法定标准中均未收载 除应按 新药审批办法 有关规定提供申报资料外 应参照药材申报资料要求制定质量标准 6 如处方原料为药材 而制剂由粗提物 浸膏 等制成 则浸膏制法及要求做为半成品规定 记述于制备工艺中 不作为原料要求另附标准 处方要求 25 三 制法 中成药质量标准研究 在 中药新药审批办法 有关中药部分的修订和补充规定 以下简称 补充规定 中已明确增加了4号申报资料即制备工艺及其研究资料的要求 首先须写明工艺的全过程 工艺的技术控制条件 方法 时间 温度 压力 及理由 工艺分工序中间体的质量检测要求如相对密度 指标成分含量等 优选工艺的详细对比数据 定最佳工艺的依据 并附工艺流程图 工艺中应注意的几个问题 新药申报时应提供至少为中试以上规模的工艺条件有的工艺不尽合理 未能针对中药的主要成分性质设计工艺条件 如含大量挥发性成分未经蒸馏加入 而在高温长时间浓缩中损失 又如水煎醇沉工艺 乙醇浓度过高 致使有效成分沉淀损失 以及过多的采用毒性大 成本高的有机溶剂提取等 26 四 性状 中成药质量标准研究 从制剂外观反映产品的质量 包括形 色 气 味 27 五 鉴别 中成药质量标准研究 1 鉴别药味的选择 复方用药为中医药特点之一 处方药味从两三味 十余味至几十味 一般未要求逐个进行鉴别 依处方原则首选君药与臣药进行 贵重药虽量少 但有时起重要作用 加强质量监督也是很必要的 含毒剧药物也须鉴别 更须规定含量或限度 选择鉴别药味也应结合药物本身的基础研究工作情况 如其成分不清楚 或通过试验摸索干扰成分难以排除 则也可鉴别其它药味 但应在起草说明中写明理由 如为单方制剂 成分无文献报道的 应进行植化研究 搞清大类成分及至少一个单体成分 借以建立鉴别乃至含量测定项目是完全必要的 28 五 鉴别 中成药质量标准研究 2 鉴别方法 鉴别一般包括显微鉴别 一般理化鉴别及色谱鉴别和其它 显微鉴别 动植物组织细胞或内含物的形态鉴别 针对含有原生药粉的成药或制剂 一般理化鉴别 有荧光法 显色法 沉淀法 升华法 结晶法等 色谱鉴别 薄层色谱 气相色谱和液相色谱对中药进行真伪鉴别 其它 如光谱鉴别 紫外或红外光谱等 同一品种药材 如红外光谱用于鉴别树脂类药材血竭 乳香 动物药牛黄 矿物药石膏 胆矾等 紫外光谱可以鉴别西红花 29 五 鉴别 中成药质量标准研究 薄层色谱 可通过特征成分鉴别药材 党参苷I 党参特有 可区别异构体 如冰片所含龙脑与异龙脑 以龙脑与异龙脑为对照品 可鉴别真伪 人参 Rf Rg1 Rb2 Rb3 西洋参不含 可以区别不同药用部位 可用于鉴别未知成分的药品 可同时鉴别多个药材的多种成分 色谱鉴别 30 气相色谱 适用于含挥发性成分的鉴别 如90版药典收载伤湿止痛膏中鉴别冰片 樟脑 2000及2005版药典中又增加为鉴别冰片 樟脑 薄荷脑 水杨酸甲酯四种成分 也可结合含量测定进行 如牛黄清心九中检麝香酮等 五 鉴别 中成药质量标准研究 色谱鉴别 31 五 鉴别 中成药质量标准研究 液相色谱 如葛根汤中鉴别麻黄生物碱类 多结合含量测定进行 很少单独用于鉴别试验 色谱鉴别 32 五 鉴别 中成药质量标准研究 3 实验设计中的有关问题 提取纯化问题 选择适宜的溶剂直接提取 固体剂型 或萃取 液体剂型 对蜜丸的前处理 加入分散剂如硅藻土 硅胶 石英砂等进行套研 再用溶剂提取 大复方中挥发性成分的分离 用微量升华 亲脂性溶剂提取 挥发油测定器蒸馏等 检定苷元类成分 水解后溶剂提取 含生物碱类 季铵碱除外 酚类及有机酸类成分 用酸碱提取法 对某些成药中杂质如油脂 蛋白 氨基酸或色素等 用色谱法处理 对于含乙醇的酊剂 酒剂甚至口服液均应将乙醇挥去 或彻底蒸干 以适宜的溶剂萃取或提取 色谱鉴别 33 层析条件的选择 五 鉴别 中成药质量标准研究 3 实验设计中的有关问题 规范化 欲检成分药典已有收载的 应先采用与其相同层析条件 显色剂的选择应灵敏并具专属性 如稀碘化铋钾试液 印三酮溶液或三氯化铝等专属性显色剂 可鉴别生物碱 氨基酸 肽类或黄酮类成分 必要时尚须取同类品种或同类其它种药材作平行试验 避免假阳性 色谱鉴别必须采用阴性对照 色谱鉴别 34 色谱试验对照品选择 五 鉴别 中成药质量标准研究 3 实验设计中的有关问题 单体成分对照 2005版药典收载282个 对照提取物 2005版药典对照提取物11个 对照药材 2005年版收载218个 用文字描述 层析斑点的Rf值范围和色泽等 用相对比移值表示 以外加成分 为被检药材所不含 作参比标准 色谱鉴别 35 用单体对照品可确切地鉴别某种成分 科学性强 但当所检成分为数种药材所共有时 则专属性差 其鉴别结果只能证明是否含有此成分 而不一定能确定是否含有某药材 芦丁 采用药材对照品对照 往往能提供更多的鉴别倍息 但对于多来源药材 各品种之间的色谱图可能有差异 应对各品种进行考察 找出共同的特征斑点作为鉴别依据 药材对照品与化学单体同时应用则效果更佳 提取物对照品只能用于鉴别试验而不可用于定量 36 薄层色谱应以彩色照片记录其真实性 日光下显色明显的可复印 定量试验也可用扫描图 从原点至前沿 记录 五 鉴别 中成药质量标准研究 3 实验设计中的有关问题 色谱鉴别 37 六 检查 中成药质量标准研究 主要指控制药材或制剂中可能引入的杂质或与药品质量有关的项目 归纳为三类 质量参数类型 与质量直接有关的专定检查项目 如大黄中检土大黄苷 川乌 草乌炮制后乌头碱的限量 黄连素中检棕榈碱及药根碱等 监测伪品的掺入 药物纯度及安全性等 剂型的要求类型 不同剂型有不同的质量要求 如固体制剂要求测水分 酊剂 酒剂要求测含醇量 总固体 相对密度 PH值等 片剂 胶囊要求侧重量差异 崩解度 近代已发展要求测均匀度 溶出度 这是重量差异与崩解度的延伸 药典附录根据有关剂型分别要求检查不同项目 38 注射剂要求比较严格 澄明度 pH值 蛋白质 鞣质 重金属 砷盐 草酸盐 钾离子 树脂 炽灼残碴 热原 无菌等项均应做检查 总固体的测定在注射剂中列于含量测定项下 以此量为基础 计算所含有关成分的量 2005版药典中增加安全性控制指标对重金属和有害元素要求更加严格 有一条说明 中药用硫磺熏 以漂白 增艳 防虫虽是传统加工方法 但现代研究证明由此会使中药材残留大量的二氧化硫 SO2 及砷 As 汞 Hg 等重金属 新版药典删除了山药 葛根等加工方法中的硫磺熏 这表明中药材以后将不再允许用硫磺熏 并且还拟将在2005年版增补本中增加二氧化硫残留量测定法 而新药益通丸中的主要就是葛根 所以要引起重视 39 六 检查 中成药质量标准研究 3 污染的控制类型 异物污染 可分为钝性异物和有害异物两类 前者如夹杂泥沙杂草 非药用部位等 昆虫及微生物污染 自六十年代以来 国内外对非灭菌药物制剂 包括药材与中成药 的生物性污染都有一些考察 有些属严重污染 据国外报道 在一份甘草中分离出黄曲霉菌的代谢产物黄曲霉毒素B1及B2 有些外用成药中曾检出破伤风杆菌等 化学污染 可能来自土壤 化肥 化学除草剂 农药 药材熏蒸 杀虫剂 水源等 2005版药典对西洋参 白芍 甘草 丹参 金银花 黄芪等首次规定其含重金属限量为 铅 Pb 5 0mg kg 镉 Cd 0 3mg kg 汞 Hg 0 2mg kg 砷 As 2 0mg kg 铜 Cu 20 0mg Kg 40 七 含量测定 中成药质量标准研究 1 含量测定选定原则 1 项目与药味的选定 一般制剂建立一项较为完善的含量测定 要求方法准确 灵敏 考核实验数据齐全 累积相当数据 限度制定合理 但如君药 贵重药 剧毒药同时存在 则要求二项测定也不算过分 对出口中成药 多要求建立二项以上的含量测定 对于注射剂 要求大部分成分或组分均要说清楚 更要研究建立多项测定 以达可控要求 保证药物安全有效 外用药也同样要求研究建立含量测定项 控制质量 41 单方制剂所含成分必须基本清楚 即如明确为生物碱类等 并搞清其中主要成分的分子式与结构式 既能测定其总成分 又便于以主要成分计算 复方制剂处方原则有君 臣 佐 使之分 应首先选其君药及所含贵重药建立含量测定项 如具泻火舒肝功能的左金丸 具清热解毒功能的万氏牛黄清心丸中 测定黄连 黄柏中小檗碱是合适的 但这绝不意味着中医用药主要用小檗碱代黄连 黄柏 甚至黄连 黄柏通用 而是以此成分衡量各自的成药质量 含毒剧药的如马钱子 生川乌 草乌 蟾酥 斑蝥等 应重点研究 建立含量测定项 量微者也要规定限度试验 对前述药味基础研究薄弱或在测定中干扰成分多 也可依次选定臣药等其他药味进行含量测定 但须在起草说明中阐述理由 42 2 测定成分的选定 七 含量测定 中成药质量标准研究 1 含量测定选定原则 有效成分或指标性成分清楚的可针对性定量 成分类别清楚的 可对总成分进行测定 但必须无干扰才进行 所测成分应归属于某一单一药味 对于因药材原料产地和等级不同而含量差异较大的成分 需注意检测指标的选定和产地的限定 含量过低的成分较难真正反映成药的内在质量 检测成分应尽可能与中医用药的功能主治相近 43 中西药结合的制剂一般不提倡 除非经拆方试验 药效学证实复方制剂优于单独中药或西药 此药才能成立 含量测定则要求不仅测中药君药 所含西药也必须建立含量测定项目 复方制剂中 测定干扰难以克服或含量极低 无法进行某些成分含量测定的 也可选择适宜的溶剂进行浸出物测定 对成药进行各种探讨均无法确定含量测定项目时 也可择其君药之一的药材原料进行含量测定 间接控制成药质量 44 2 含量测定方法 七 含量测定 中成药质量标准研究 含量测定方法很多 常用的如经典分析方法 容量法 重量法 比色法 分光光度法 计算分光光度法如二波长 三波长紫外分光光度法 导数光谱法等 因其 杂质 并非恒定 所以计算公式只适用于同批样品 有时不具重现性 故只适合于内控应用 气相色谱法 高效液相色谱法 薄层扫描法 薄层一分光光度法或比色法以及生物测定法等等 含量测定是质量标准的核心部分 它是质量控制中最能有效考察产品内在质量的项目 也是药品稳定性考察最重要的依据 因此 含量测定方法的建立也是质量标准中的难点与重点 45 1 实验设计 仪器分析方法 前处理方法 2 供试品溶液的制备 3 色谱条件及测定法 步骤 46 3 方法学考察 七 含量测定 中成药质量标准研究 新药可以引用药典或文献收载的与其相同成分的测定方法 但因品种不同 与自行建立新方法一样 均要进行方法学考察研究 一般考察项目如下 提取条件的选定 分离纯化 测定条件的选择 空白试验 标准曲线的制备 测定方法的稳定性实验 精密度试验 重复性试验 检测灵敏度及检测下限的测定 回收率试验 加样回收 空白加对照品 空白加对照药材 至少需进行5次试验 回收率一般要求在95 105 47 4 含量测定方法实验设计中应注意的几个问题 七 含量测定 中成药质量标准研究 1 提取问题对含药材原粉的制剂 其固体体积不可忽视 2 测定总成分如总黄酮 总皂苷等问题 所测总成分以某一单体成分为对照品制定标准曲线并计算 考虑最大吸收波长 阴性 空白 对照液吸收图谱 与基线吻合 或略有吸收 其吸收值若低至样品吸收值5 以下可忽略不计 按上述方法制备背景空白以消除干扰是不可行的 由于处方原料不相同 工艺未知 配制出的背景空白条件不可能相同 吸收值差异较大 故此方法无推广价值 只能作为企业内部的质控方法暂时使用 为了消除其它组分干扰 采用导数光谱或二波长 三波长等方法测定单一或大类成分 仅用于药味较少的制剂 其空白试验取多批次样品测定 结果一致才可采用 48 3 回收率测定问题加样回收测定 不是在称样开始时即加入纯品 而是将其加至制备好的供试品溶液中 这样不能考察提取 纯化过程中被测成分是否损失 也有在薄层扫描试验中 于薄层板上依次点对照品溶液 供试品溶液及对照品与供试品重叠点于同一原点上 测定后计算 这只能反映板上的回收率 而不能代表全部含量测定方法的回收率 4 对照品问题含量测定用对照品只能用化学纯品 不可用药材或总提取物 测定大类成分如皂苷也不宜采用总皂苷为对照品 因总皂苷组分复杂 各成分比例不稳定 不同批次的皂苷难于保持一致 采用同系物之一的化学单体并以其计算 定出限度是可行的 如测定人参总皂苷 以人参皂苷Rb1 Re等作对照品并计算 但如处方中含有的不同药味皂苷成分结构差异较大 有的甚至不是皂苷而是其它各种苷类 例如处方中有黄芪