人教版选修1 多聚酶链式反应扩增DNA片段 作业.doc

选修1专题5课题2多聚酶链式反应扩增dna片段1在pcr扩增前，需要将下列哪些物质加入微量离心管中？（ ）模板dna模板rnadna解旋酶耐高温的dna聚合酶引物pcr缓冲液脱氧核苷酸贮备液核苷酸贮备液abcd【答案】a【解析】pcr扩增需要的条件是模板dna 、耐高温的dna聚合酶、引物、pcr缓冲液、脱氧核苷酸贮备液，a正确。2.复性温度是影响pcr特异性的较重要因素。变性后温度快速冷却至4060 ，可使引物和模板发生结合。pcr的结果可不考虑原来解旋开的两个dna模板链的重新结合，原因是（ ）a引物是人工合成的b引物为dna聚合酶提供了3端c加入引物的量足够多而模板链数量少d模板链加热解旋已经变性不可能再次结合【答案】c【解析】pcr的结果可不考虑原来解旋开的两个dna模板链的重新结合，原因是引物为dna聚合酶提供了3端.故c正确。3.有关pcr技术的说法，不正确的是（ ）apcr是一项在生物体外复制特定的dna片段的核酸合成技术bpcr技术的原理是dna双链复制c利用pcr技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列dpcr扩增中必须有解旋酶才能解开双链dna【答案】d【解析】a、pcr全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定的dna片段的核酸合成技术，a正确；b、pcr技术以解开的双链作为模版，利用的原理是dna复制，b正确；c、前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物，c正确；d、双链dna模版在热作用下，氢键断裂，形成单链dna，可见该过程不需要解旋酶解开双链dna，d错误4.有关pcr技术的说法，不正确的是（ ）apcr是一项在生物体外复制特定的dna片段的核酸合成技术bpcr技术的原理是dna双链复制c利用pcr技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列dpcr扩增中必须有解旋酶才能解开双链dna【答案】d【解析】a、pcr全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定的dna片段的核酸合成技术，a正确；b、pcr技术以解开的双链作为模版，利用的原理是dna复制，b正确；c、前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物，c正确；d、双链dna模版在热作用下，氢键断裂，形成单链dna，可见该过程不需要解旋酶解开双链dna，d错误5.引物的作用是（ ）a.打开d.na.双链 b.催化合成d.na.子链c.提供模板 d.使d.na.聚合酶能够从引物的3端开始复制【答案】d【解析】pcr技术的原理是d.na.复制，而d.na.的复制需要引物，其主要原因是d.na.聚合酶只能从3端延伸d.na.链。因此，引物的作用是使d.na.聚合酶能够从引物的3端开始复制。6.复性温度是影响pcr特异性的较重要因素。变性后温度冷却至4060,可使引物和模板发生结合。pcr的结果可不考虑原来解旋开的两个dna模板链的重新结合,原因不包括（ ）a.由于模板dna比引物复杂得多b.引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞c.模板链加热解旋已经变性不可能再次结合d.加入引物的量足够多而模板链数量少【答案】c【解析】复性的原理是碱基互补配对，解旋后dna分子变成单链，碱基序列未发生改变，冷却后仍可以进行复性，c项错误。7.pcr过程与细胞内的dna复制过程相比，主要有两点不同，它们是（ ）pcr过程需要的引物是人工合成的单链dna或rnapcr过程不需要dna聚合酶pcr过程中dna的解旋不依靠解旋酶，而是通过对反应温度的控制来实现的pcr过程中，dna不需要解旋，直接以双链dna为模板进行复制a b c d【答案】c【解析】pcr过程需要的引物是人工合成的单链dna，正确；pcr过程需要耐高温的dna聚合酶，错误；pcr过程中dna的解旋不依靠解旋酶，而是通过对反应温度的控制来实现的，正确；pcr过程中，dna不依靠解旋酶解旋，而是利用高温解旋，然后以单链dna为模板进行复制，错误。故c正确。8.pcr技术中下列说法错误的有几项（ ）复性的目的是使原来分开的dna的两条单链重新连接成双链pcr技术是扩增完整的dna分子dna聚合酶不能从头开始合成dna，只能从5端延伸dna链dna引物在细胞外可在dna聚合酶的作用下合成a有一项 b有二项 c有三项 d有四项【答案】d【解析】pcr 全称为聚合酶链式反应，pcr 技术是一项在生物体外复制特定dna的核酸合成技术，原理是dna复制，前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物，条件还包括模板dna、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定dna聚合酶（taq酶），具体过程有高温变性：dna解旋过程；低温复性：引物结合到互补链dna上；中温延伸：合成子链pcr扩增中双链dna解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。故d正确。9.下列关于pcr的描述中，正确的是( )pcr是一种酶促反应引物决定了扩增的特异性扩增dna利用了热变性的原理扩增的对象是氨基酸序列a b c d【答案】d【解析】pcr技术的概念是pcr全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定dna的核酸合成技术，原理是dna复制，前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物，条件还包括模板dna、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定dna聚合酶（taq酶），具体过程有高温变性：dna解旋过程；低温复性：引物结合到互补链dna上；中温延伸：合成子链pcr扩增中双链dna解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。10.如图表示细胞内dna复制和细胞外pcr扩增两个过程,两反应过程的条件中相同的是（ ） a.模板 b.原料 c.酶 d.能量供应【答案】b【解析】选项a模板不同,胞内dna复制以整个dna分子作为模板,pcr扩增却以一段目的dna作为模板。选项b原料相同,均以4种脱氧核苷酸为原料。选项c酶不相同,胞内dna解旋需要解旋酶,延伸需要dna聚合酶等;胞外pcr扩增通过高温解旋而不需要解旋酶,延伸只需热稳定的taq酶。选项d能量供应不同,胞内dna复制过程由atp提供能量,而pcr扩增主要由外界供能。11.重叠延伸pcr技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板，通过多次pcr扩增，从而获得目的基因的方法。该技术在扩增较长片段的dna、不同来源的dna片段拼接、基因的定点诱变等方面具有广泛的应用前景。右图是利用重叠延伸pcr技术扩增某目的基因的过程。其主要没计思路是用具有互补配对片段的引物（图中引物2、引物3），分别pcr，获得有重叠链的两种 dna片段，再在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸获得目的基因。结合所学知识，分析下列问题。（1）引物中g+c的含量影响着引物与模板dna结合的稳定性，引物中g+c的含量越高，结合稳定性_。（2）在第一阶段获得两种具有重叠片段dna的过程中，必须将引物l、2和引物3、4置于不同反应系统中，这是因为_ 。（3）若在引物l和引物2组成的反应系统和引物3、引物4组成的反应系统中均复制一次，共产生_种双链dna分子。（4）在引物1、引物2组成的反应系统中，经第一阶段形成图示双链dna至少要经过_ 次复制。（5）若利用微生物扩增该目的基因，其基本步骤包括：_ 、_ 、微生物的筛选和培养、从菌群中获取目的基因。【答案】（1）越高（2）吸引物2和吸引物3存在互补配对片段，置于同一反应系统中它们会发生结合而失去作用（3）3（4）2（5）基因表达载体的构建 将目的基因进入受体细胞【解析】（1）由于一个c-c之间有三个氢键，而一个a-t之间有两个氢键，所以引物中c+c含量越高，引物与模板dna的结合就越稳定（2）从图中可以看出，引物2和引物3相应的碱基之间可以进行配对，所以如果将引物2和3放在一个反应系统中，则会引起引物2和3 的失效（3）两个反应系统中各自形成两种dna分子，但由于引物1和引物4形成两个与原dna相同的dna分子，所以含有引物1和4的dna属于同一种dna，故总共形成三种dna分子（4）第一次复制形成的两个dna分子分别含有引物1和引物2，图中第一阶段形成的dna分子同时具有引物1和引物2，图示双链dna分子至少要经过第二次复制才能形成（5）利用微生物扩增该目的基因，需要将目的基因导入受体细胞，而导入受体细胞首先要将目的基因与载体结合12.近十年来，pcr技术（多聚酶链式反应）成为分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用dna半保留复制，在试管中进行dna的人工复制（如图），在很短的时间内，将dna扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。(1)pcr技术能把某一dna片段进行扩增，依据的原理是： 。(2)加热使dna双链打开，这一步是打开 键，称为 ，在细胞中是在 的作用下使此键断裂。(3)当温度降低时，引物与模板 端结合，在dna聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成2个dna分子，此过程中加入四种脱氧核苷三磷酸的目的是 ，遵循的原则是 。(4) pcr技术的必要条件，除了模板、原料、atp、酶以外，至少还需要三个条件. 即：液体环境、适宜的 和 。(5)pcr一般要经历三十多次循环，每次循环可分为 、 、 三个步骤。【答案】(1)dna分子具有双螺旋结构和dna分子中碱基的互补配对(2)氢 解旋 解旋酶(3)3 既是原料，又能提供能量 碱基互补配对原则(4)温度 酸碱度(5)变性、退火和延伸【解析】（1）pcr技术又称聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定dna分子的核酸合成技术。pcr技术能把某一dna片段进行扩增，依据的原理是：dna分子具有双螺旋结构和dna分子中碱基的互补配对。（2）加热使dna双链打开，这一步是打开氢键，称为解